四川省卫生厅科研基金(120371)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：罗茂李蓉吴剑波裴傲秋何晓彬更多>>
- 相关机构：泸州医学院泸州医学院附属医院泸州市江阳区妇幼保健院更多>>
- 发文基金：四川省卫生厅科研基金国家自然科学基金四川省教育厅青年基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 少白细胞血小板miRNA提取方法
- 2013年
- 目的:建立常规梯度离心结合MACS磁珠分选纯化和小分子RNA分离试剂盒简便快速提取血小板miRNA的方法。方法:利用常规梯度离心获取血小板后,结合MACS磁珠分选和小分子RNA分离试剂盒提取少白细胞血小板(LDP)小分子RNA;经血小板计数、CD45和GPIIb mRNA marker PCR扩增检测,判定纯化效果;通过小分子RNA浓度、纯度及毛细管电泳完整性检测,以及内参U6和血小板miR-449b加尾及引物延伸RT-PCR后PCR扩增结果验证构建血小板miRNA的cDNA模板真实性。结果:提取小分子RNA纯度较高,有效去除白细胞污染,虽然含量较少,但内参U6和血小板miR-449b真实性验证结果提示,构建血小板miRNA的cDNA模板质量较高。结论:常规梯度离心结合MACS磁珠分选纯化和小分子RNA分离试剂盒,可有效去除白细胞污染,保证小分子RNA完整性,从而提取高质量血小板miRNA的cDNA模板,可用于后续血小板miRNA试验研究。
- 罗茂万沁刘飞马卫中吴剑波
- 关键词：MIRNAMACS
- 富含多糖的植物组织miRNA提取方法的改进被引量：1
- 2013年
- 目的:建立冻融法结合小分子RNA分离试剂盒简便快速提取富含多糖的植物组织miRNA的方法。方法:利用乙醇/醋酸钾沉淀法、小分子RNA分离提取试剂盒标准步骤提取方法和结合反复冻融法改进的小分子RNA分离提取方法分别提取玉米胚乳组织小分子RNA,通过小分子RNA浓度、纯度及完整性检测,以及内参5s rRNA扩增验证模板真实性等比较3类方法小分子RNA的提取效果。结果:乙醇/醋酸钾沉淀法易丢失大量小分子RNA;小分子RNA分离提取试剂盒标准步骤提取所获小分子RNA浓度、纯度较低,富含大量多糖杂质;反复冻融法结合小分子RNA分离试剂盒提取的小分子RNA浓度、纯度较高,有效去除多糖杂质,内参5s rRNA扩增验证真实性表明其所获miRNA的cDNA模板质量较高。结论:结合反复冻融法和小分子RNA分离试剂盒,可以简便快速去除多糖内杂质,保证小分子RNA完整性,加尾及引物延伸RT-PCR、所获miRNA的cDNA模板质量较高,可用于后续miRNA实验研究。
- 罗茂李蓉张春罗波
- 关键词：玉米胚乳MIRNA
- 结直肠癌中microRNA标志物临床诊断价值的研究进展被引量：2
- 2014年
- 结直肠癌是最常见的消化道恶性肿瘤,其发生、发展及诊疗、预后已成为当前临床研究关注的热点。microRNAs(miRNAs)是一类内源性的、19~25个碱基长度的小分子非编码RNA,在人体生命活动中具有广泛的调节功能。目前发现,部分miRNAs异常表达与结直肠癌的发生、发展密切相关,提示miRNAs可作为结直肠癌临床早期诊断及预后评估的特异性新型生物标志物。文章综述了miRNAs作为结直肠癌临床早期诊断、预后和治疗结果评估生物标志物的研究进展,揭示结直肠癌miRNAs参与的基因表达调控机制,展望miRNAs作为结直肠癌新型诊断分子标志物及治疗靶点的广阔临床应用前景。
- 裴傲秋罗茂何晓彬
- 关键词：结直肠癌MIRNA预后评估生物标志物
- 微小RNA调控血管平滑肌表型转化的研究进展被引量：1
- 2014年
- 血管平滑肌细胞（VSMC）表型转化是高血压、动脉粥样硬化和血管成形术后再狭窄等心血管疾病发生发展过程中的关键性步骤,是增殖和向血管内膜迁移的先决条件,主要表现为VSMC从收缩型转变为合成型,并获得增殖、迁移和合成、分泌大量细胞外基质的能力.研究VSMC表型调节机制对于防治上述心血管疾病及其预后、疗效评估等具有重要意义.
- 曾敏罗茂李蓉邓鑫吴剑波
- 关键词：血管平滑肌细胞表型转化微小RNA血管成形术后再狭窄VSMC
