国家自然科学基金(31070930)
- 作品数：10 被引量：44H指数：4
- 相关作者：黄宇光申乐许力王之遥虞雪融更多>>
- 相关机构：北京协和医院中国医学科学院基础医学研究所中国医学科学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金中央保健专项资金资助科研项目北京协和医院青年科研基金更多>>
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- miR-146a激动剂对大鼠神经病理性疼痛行为学和IRAK1、TRAF6表达的影响被引量：3
- 2015年
- 目的：探讨miR-146a激动剂（agomiR-146a）经鞘内给药对大鼠神经病理性疼痛的影响.方法：雌性SD大鼠16只,体重200～250g,采用随机数字表法随机分为对照组（n=8）和agomiR-146a组（n=8）,两组均行双侧坐骨神经结扎手术,于手术当天及术后第3、5、7、10天分别经鞘内注射体积为15 μl的agomiR-对照组或agomiR-146a（5nmol溶于生理盐水）,于术前及术后第1、3、7、14天进行动物行为学评估,观察大鼠对机械和热刺激的反应.实时定量PCR法检测术后第14天大鼠L4～6背根神经节（dorsal root ganglion,DRG）中miR-146a、白介素1受体相关激酶（interleukin-1receptor-associated kinase 1,IRAK1）、肿瘤坏死因子受体相关因子6（tumor necrosis factor-associated factor 6,TRAF6）的mRNA表达水平;Western-blot法检测IRAK1及TRAF6蛋白表达水平变化.结果：agomiR-146a组大鼠缩足反射热辐射潜伏期自建模后3天显著增加,而缩足反射机械刺激阈值在建模后7和14天比对照组明显升高（P＜0.05）.与对照组相比,术后14天agomiR-146a组miR-146a表达显著上调（P＜0.05）,IRAK1、TRAF6的mRNA表达水平下降（P＜0.05）;agomiR-146a组IRAK1、TRAF6蛋白水平亦明显降低（P＜0.05）.结论：miR-146a激动剂agomiR-146a经鞘内给药可以减轻大鼠神经病理性疼痛,可能为治疗神经病理性疼痛提供新的靶点.
- 王之遥申乐魏敏丘玥马超黄宇光
- 关键词：肿瘤坏死因子受体相关因子6TRAF6
- 维生素C复合低剂量加巴喷丁对大鼠神经病理性痛的影响
- 2014年
- 目的 评价维生素C复合低剂量加巴喷丁对大鼠神经病理性痛的影响.方法 SPF级雄性SD大鼠50只,体重225 ～ 275 g,6～7周龄,采用随机数字表法,将其分为5组（n=10）：假手术组（Sham组）、神经病理性痛组（NP组）、维生素C组（VitC组）、加巴喷丁组（Gap组）、维生素C复合加巴喷丁组（VitC＋ Gap组）.采用坐骨神经慢性结扎（CCI）法建立神经病理性痛模型.VitC组、Gap组和VitC＋ Gap组分别于建模后7d腹腔注射维生素C 500 mg/kg、加巴喷丁30 mg/kg、维生素C 500mg/kg和加巴喷丁30 mg/kg的混合液,连续7d,2次/d.所有药物生理盐水稀释至1ml,Sham组和NP组则腹腔注射生理盐水1ml.于建模前、建模后3、7和14 d时测定机械缩足阈（PWMT）和热缩足潜伏期（PWTL）.于建模后14 d,采集颈动脉血样6 ml,处死后取脊髓,采用硫代巴比妥酸法测定血清MDA浓度,RT-PCR法测定脊髓Slc23a2 mRNA表达水平.结果 与Sham组比较,NP组、VitC组、Gap组和VitC＋ Gap组左足PWMT和PWTL降低,NP组血清MDA浓度升高,脊髓Slc23a2 mRNA表达下调,VitC组和Gap组脊髓Slc23a2 mRNA表达下调（P＜0.05）,VitC＋ Gap组脊髓Slc23a2 mRNA表达差异无统计学意义（P＞0.05）.与NP组比较,VitC＋ Gap组建模后14 d时左足PWMT和PWTL升高,血清MDA浓度降低,脊髓Slc23a2 mRNA表达上调,VitC组血清MDA浓度降低（P＜0.05）,VitC组、Gap组左足PWMT和PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）.各组各时点右足PWMT和PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）.结论 维生素C复合低剂量加巴喷丁可以有效缓解神经病理性痛,其机制可能与两药物复合应用上调了Slc23a2 mRNA表达,增加维生素C转运入神经细胞,从而抑制氧化应激有关.
- 李锐申乐虞雪融刘薇黄宇光
- 关键词：神经痛抗坏血酸加巴喷丁
- JAK2/STAT3通路参与大鼠坐骨神经结扎神经病理性疼痛模型被引量：10
- 2014年
- 目的结扎大鼠双侧坐骨神经复制bCCI模型,观察JAK2/STAT3通路的激活情况。方法 60只体质量180~200 g SD雌性大鼠随机分为3组,bCCI组,sham组及Nave组。分别于bCCI手术术前1 d,术后3、7、14和21d取腰段脊髓背角,并进行RT-PCR及Western blot观察通路中主要因子的mRNA水平及蛋白水平的变化。结果 bCCI组大鼠对机械、热刺激及冷丙酮刺激的痛觉阈值明显降低。与sham组及Nave相比,bCCI组STAT3、SOCS3、JAK2及IL-6 mRNA水平显著升高,且3组在不同时间点具有差异（P〈0.05）。与sham组及Nave相比,bCCI组P-STAT3、JAK2和SOCS3蛋白水平升高。结论大鼠bCCI神经病理性疼痛模型JAK2/STAT3通路激活。
- 薛照静申乐王之遥黄宇光
- 关键词：JAK2STAT3神经病理性疼痛
- miR-146a在大鼠神经病理性疼痛模型中的表达及其作用机制被引量：1
- 2015年
- 目的研究miR-146a对神经病理性疼痛的调控机制。方法将大鼠随机分为:1)nave组(n=12);2)假手术组(n=12):进行大鼠双侧假手术;3)双侧慢性压迫损伤(b CCI)组(n=12):建立大鼠双侧坐骨神经结扎模型。在建模前1 d及后第1、3、7和14天监测机械刺激诱发痛、热刺激诱发痛行为学指标;实时定量PCR法检测背根神经节(L4-L6)miR-146a及TNF-α受体相关因子6(TRAF6)、白介素1受体相关激酶(IRAK1)的mRNA表达水平;Western blot法检测TRAF6及IRAK1蛋白表达。结果 b CCI大鼠双足热刺激诱发痛痛阈、机械刺激诱发痛痛阈较nave组、假手术组显著降低(P<0.05)。术后第14天b CCI组miR-146a表达水平较nave组显著下降(P<0.05)。b CCI组TRAF6、IRAK1的mRNA表达水平较nave组升高(P<0.05);TRAF6、IRAK1蛋白表达水平较假手术组和nave组均显著增加(P<0.05)。结论神经病理性疼痛大鼠背根神经节miR-146a表达水平下调,miR-146a可能通过过度激活其靶基因TRAF6和IRAK1发挥作用。
- 王之遥申乐赵欣黄宇光
- 关键词：神经病理性疼痛TRAF6
- 炎症反应和自身免疫在复杂性区域疼痛综合征中作用被引量：14
- 2016年
- 复杂性区域疼痛综合征(complex regional pain syndrome,CRPS)是一种神经病理性疼痛综合征,常伴感觉、运动以及自主神经的异常。CRPS的外周敏化与神经源性炎症密切相关,主要包括C纤维末梢神经肽的释放、局部促炎性细胞因子的表达上调,以及肥大细胞的激活。脊髓背角炎症反应参与CRPS中枢敏化过程,主要包括N-甲基-D-天冬氨酸(N-methyl-D-aspartic acid,NMDA)受体的磷酸化、促炎性细胞因子的释放,以及星形细胞和小胶质细胞的激活。CRPS患者系统性和局部氧化应激水平升高,这或许与线粒体功能异常相关。CRPS患者的血清中存在结合自主神经受体的自身抗体,提示自身免疫机制或与自主神经功能异常相关。本文对神经炎症和自身免疫在复杂性区域疼痛综合征中的作用展开综述,其详细和全面的机制尚需更深入研究。
- 徐宵寒许力黄宇光
- 关键词：复杂性区域疼痛综合征神经源性炎症自身免疫氧化应激
- T型钙通道:糖尿病神经病理性疼痛干预的新靶点被引量：5
- 2015年
- 糖尿病是目前世界上发病率最高的慢性疾病之一,糖尿病神经病理性疼痛是其常见慢性并发症,但其发病机制尚未完全明确。近期研究显示,T型钙通道在糖尿病神经病理性疼痛中起重要作用。采用药物抑制、基因抑制、基因敲除等技术研究发现,T型钙通道在糖尿病神经病理性疼痛的机械及热痛觉过敏形成中起重要作用,其受调节机制可能与选择性剪接、氧化还原修饰、磷酸化修饰以及糖化修饰等有关。采用膜片钳、神经元电容监测、荧光原位杂交等技术研究发现,T型钙通道还可通过增强神经元可兴奋性、上调神经递质释放促进神经病理性疼痛的发生。
- 汪一申乐闫洪彦陈雯黄宇光
- 关键词：神经病理性疼痛疼痛钙通道
- P38 MAPK抑制剂对神经病理性疼痛大鼠脊髓TNF-α合成的影响被引量：8
- 2012年
- 目的通过建立坐骨神经慢性压迫损伤模型,研究P38丝裂原激活蛋白激酶(P38 MAPK,P38)与TNF-α在神经病理性疼痛发生与发展中的相互作用。方法 SD大鼠分5组:1)空白对照组,2)假手术组,3)CCI手术未治疗组,4)CCI手术0.9%氯化钠注射液治疗组,5)CCI手术SB203580(P38抑制剂)治疗组。上述治疗组中,0.9%氯化钠注射液或SB203580分别于术前1天、术后第1和第7天鞘内注射。各组大鼠分别于术后3、7和14 d测定机械痛阈。采用Western blot和免疫组化方法测定脊髓中TNF-α含量及P38活化水平。结果与假手术组相比,CCI手术后3、7和14 d磷酸化P38(p-P38)水平分别增加275%±65%、267%±66%和253%±56%(P<0.05)。外周神经损伤后引起机械性触诱发痛,并且使脊髓中TNF-α浓度增加,与对照组相比术后3、7和14 d时TNF-α浓度分别增加93%±22%、73%±25%和52%±15%(P<0.05)。预先或术后立即给予SB203580抑制P38活化可以减少脊髓TNF-α合成,使其降至接近对照组水平,从而有效缓解病理性疼痛。结论外周神经损伤后,作为信号传导通路之一的P38可能通过促进脊髓TNF-α合成,引发神经病理性疼痛。
- 许力虞雪融黄宇光
- 关键词：神经病理性疼痛P38MAPKTNF-Α脊髓
- 鞘内注射突触后致密蛋白95siRNA对神经病理性疼痛大鼠脊髓CaMK Ⅱα活性的影响被引量：1
- 2013年
- 目的探讨突触后致密蛋白95(PSD-95)基因沉默对神经病理性疼痛模型大鼠脊髓Ca2+/钙调蛋白依赖的蛋白激酶Ⅱα(CaMKⅡα)表达及活性的影响。方法用化学合成针对大鼠PSD-95基因的siRNA转染神经母细胞瘤/大鼠神经胶质细胞瘤杂交瘤细胞(NG108-15细胞),并观察干扰效果。选取91只成年SD大鼠随机分为3组:Naive组、假手术组(sham)与坐骨神经慢性缩窄损伤(CCI)手术组。CCI组大鼠进一步被分为4个亚组,分别于CCI术后第5天开始鞘内注射生理盐水(Control组)、转染试剂(Vehicle组)、阴性对照(mmRNA组)和PSD-95基因特异siRNA(siRNA组)。连续给药3d,各组大鼠分别于鞘内给药后第1、3、7天评估机械缩足反射阈值(MWT)的改变,并留取腰4～6脊髓节段标本,以Western blotting方法观察脊髓背角PSD-95、CaMKⅡα蛋白表达水平及活性的变化。结果大鼠PSD-95基因特异的siRNA可以有效地沉默NG108-15细胞中PSD-95基因表达。与生理盐水治疗组相比,鞘内注射PSD-95特异siRNA 3d后,大鼠脊髓背角PSD-95蛋白水平明显降低(P<0.05),CCI大鼠神经病理性疼痛得到明显缓解(P<0.05),同时脊髓背角pThr286CaMKⅡα蛋白水平受到明显抑制(P<0.05),而总CaMKⅡα蛋白水平无明显变化(P>0.05)。结论 PSD-95基因特异的siRNA可被成功导入大鼠中枢神经系统,引起脊髓PSD-95基因沉默,在缓解病理性疼痛的同时可抑制神经损伤导致的脊髓CaMKⅡα磷酸化水平的增加,阻断中枢敏化相关的信号通路。
- 许力喻洁申乐李旭黄宇光
- 关键词：神经病理性疼痛慢性压迫损伤免疫印迹法
- 信号转导和转录激活子3抑制剂WP1066作为神经病理性疼痛治疗新靶点的可行性
- 2014年
- 目的：观察Janus激酶2（Janus kinase 2， JAK2）/信号转导和转录激活子3（signal transducers and activators of transcription 3， STAT3）通路抑制剂WP1066对神经病理性疼痛的影响。方法12只体重180～200 g雌性SD大鼠用随机数字表法分为WP1066组及对照组（n＝6），均行双侧坐骨神经结扎手术，两组于术前1 d、术前及术后第3、5天分别经鞘内注射容量为10μl的WP1066（10 mmol/L溶于二甲基亚砜）或二甲基亚砜，于术前及术后第3、5、7、10、14天进行动物行为学检测，观察大鼠对机械、热及丙酮冷刺激的反应。术后第14天处死大鼠，于L4～L6腰膨大脊髓背角处取材，使用RT-PCR及Western blot检测STAT3、细胞因子信号抑制因子3（ suppressor of cytokine signaling 3， SOCS3）、 JAK2 mRNA及蛋白水平。结果大鼠机械缩足反射阈值、热刺激缩足反射潜伏期和冷痛阈值分别从第3、5、5天开始， WP1066组较对照组明显升高，差异具有统计学意义（P＜0.05）。与对照组相比， WP1066组STAT3、 SOCS3、 JAK2 mRNA表达均明显降低（ P＜0.05）； WP1066组磷酸化STAT3、 SOCS3、 JAK2蛋白水平均亦明显降低（ P＜0.05）。结论 WP1066可明显改善大鼠神经病理性疼痛，可能为治疗神经病理性疼痛提供新的靶点。
- 薛照静申乐王之遥黄宇光
- 关键词：神经病理性疼痛JAK
- 神经病理性疼痛相关蛋白质在双侧慢性缩窄性损伤大鼠脊髓后角的表达被引量：2
- 2013年
- 目的评估双侧慢性缩窄性损伤(CCI)大鼠的疼痛行为学改变,分析鉴定双侧CCI大鼠神经病理性疼痛相关蛋白的表达情况。方法以雌性SD大鼠为研究对象,采用双侧坐骨神经松结扎法制造双侧CCI模型,电子von Frey和丙酮刺激检测机械痛阈与冷痛阈,液相色谱-质谱/质谱联用(LC-MS/MS)技术分析鉴定CCI大鼠脊髓后角神经病理性疼痛相关蛋白质的表达情况。结果双侧CCI大鼠术后第7和14天的机械痛阈和冷痛阈较假手术组与正常组大鼠显著降低(P均<0.05)。双侧CCI大鼠与假手术大鼠比较,共发现25种差异表达蛋白质,其中表达上调18种,表达下调7种。结论双侧CCI大鼠的机械痛阈与冷痛阈显著降低,发现其脊髓后角存在25种与疼痛行为学相关的蛋白质。
- 申乐李旭王海棠虞雪融黄宇光
- 关键词：机械痛阈蛋白质组学
