上海市卫生局科研基金(2009096)
- 作品数：5 被引量：34H指数：4
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- 串联质谱两种前标本处理法检测新生儿氨基酸的比较研究被引量：11
- 2013年
- 目的 比较串联质谱两种前标本处理方法（衍生化法和非衍生化法）检测新生儿滤纸干血片上丙氨酸（Ala）,精氨酸（Arg）,瓜氨酸（Cit）,甘氨酸（Gly）,亮氨酸（Leu）,甲硫氨酸（Met）,鸟氨酸（Orn）,苯丙氨酸（Phe）,酪氨酸（Tyr）,缬氨酸（Val） 10种氨基酸水平分布和差异,为实验室开展新生儿氨基酸代谢障碍疾病筛查提供方法学依据.方法 方法比较研究.选择2012年1至6月在上海市儿童医院新生儿筛查中心进行遗传代谢性疾病筛查滤纸干血片标本,共计4135份.采用衍生化法和非衍生化法及相应试剂盒：（1）同时检测100份新生儿滤纸干血片标本,以配对方式比较10种氨基酸水平之间差异；（2）分别各自检测2000份正常新生儿滤纸干血片标本,了解正常新生儿10种氨基酸水平分布；（3）同时检测经临床确诊的7种氨基酸代谢异常标本35份,验证两种方法临床判断的一致性.采用配对t检验.结果 正常新生儿的10种氨基酸水平经K-S单标本正态分布检验,Z值在1.997 ～6.229之间,呈偏态分布（P＜0.01）；除Leu和Tyr外,其余8种氨基酸非衍法比衍生法检测浓度低,两种方法检测均值差异,除Met高达47.8％外,其他9种氨基酸水平差异均＜10％,平均为7.8％；除Met、Phe和Tyr,两种方法测得的7种氨基酸水平差异无统计学意义（P＞0.05）；以0.5～99.5百分位数建立的10种氨基酸正常参考值范围,衍生法均比非衍法高,平均高25.3％,正常参考值范围有重叠；经临床验证,对于确诊患儿异常指标的检测,两种方法间无统计学意义（P＞0.05）,两种方法均能检测出疾病患儿,检出率均为100％.结论 衍生法和非衍法检测多种氨基酸水平有差异,但对氨基酸代谢障碍疾病的异常指标的检测结果无差异,对疾病的临床判断无影响；两种方法均可用于新生儿氨基酸代谢障碍疾病的筛查.
- 田国力王燕敏龚振华姚静
- 关键词：氨基酸类串联质谱法标本制备
- 非衍生化串联质谱法检测酰基肉碱方法的应用被引量：9
- 2011年
- 目的建立非衍生化串联质谱检测酰基肉碱的方法,以便用于有机酸和脂肪酸代谢病的检测和筛查。方法使用含13种稳定同位素标记的酰基肉碱内标准品的溶剂萃取滤纸干血片中的游离肉碱和酰基肉碱,串联质谱仪直接进样,检测游离肉碱(C0)、乙酰基肉碱(C2)、丙酰基肉碱(C3)、丁酰基肉碱(C4)、异戊酰基肉碱(C5)、戊二酰基肉碱(C5DC)、己酰基肉碱(C6)、辛酰基肉碱(C8)、葵酰基肉碱(C10)、十二烷酰基肉碱(C12)、十四烷酰基肉碱(C14)、十六烷酰基肉碱(C16)和十八烷酰基肉碱(C18)的浓度。分析该方法的精确性、准确性及稀释回收率。结果低浓度酰基肉碱的批内变异系数(CV)为6.61%～10.97%之间,批间CV为13.31%～18.98%;高浓度酰基肉碱的批内CV为5.74%～12.13%,批间CV为12.70%～18.88%。除C5DC外,其余酰基肉碱的偏倚为-15%～20%;酰基肉碱不同稀释浓度的回收率在90%～115%之间,实测值与预测值的相关系数(r)为0.97～0.99。结论非衍生化串联质谱检测酰基肉碱有较高的精确性和准确度,有临床应用价值。此技术可以作为新生儿遗传代谢病筛查的常规技术。
- 田国力龚振华王燕敏
- 关键词：酰基肉碱串联质谱
- 非衍生化串联质谱技术在氨基酸代谢障碍患儿诊断中的应用被引量：7
- 2011年
- 【目的】应用非衍生化串联质谱技术检测多种氨基酸,以便用于氨基酸代谢障碍的检测和筛查。【方法】使用含11种稳定同位素标记的氨基酸内标准品的溶剂萃取滤纸干血片中的氨基酸,直接进样串联质谱仪,检测丙氨酸（Ala）,精氨酸（Arg）,瓜氨酸（Cit）,谷氨酸（Gly）,亮氨酸（Leu）,蛋氨酸（Met）,鸟氨酸（Orn）,苯丙氨酸（Phe）,脯氨酸（Pro）,酪氨酸（Tyr）,缬氨酸（Val）的浓度。分析该方法的精确性和准确性;并应用于1 093例高危儿童的筛查和诊断。【结果】低水平浓度氨基酸的批内CV为5.84%~9.57%,批间CV为13.89%~18.65%;高水平浓度酰基肉碱的批内CV为4.57%~8.78%,批间CV为13.55%~17.25%;测定值与靶值的偏倚为4.24%~16.16%,平均相对偏倚为4.10%;检出5种共11例氨基酸代谢障碍,包括高苯丙氨酸血症4例,枫糖浆尿症3例,瓜氨酸血症2例、酪氨酸血症及精氨酸血症各1例。【结论】非衍生化串联质谱检测氨基酸有较高的精确性和准确度,有临床应用价值。
- 田国力龚振华王燕敏姚静
- 关键词：氨基酸串联质谱
- 新生儿期至青春期血中肉碱和酰基肉碱的变化被引量：8
- 2010年
- 目的 用串联质谱测定不同年龄儿童血中游离肉碱和各种酰基肉碱浓度,为诊断肉碱缺乏和各种有机酸和脂肪酸代谢病奠定基础.方法 研究对象是围产期新生儿1376例,大于1周的新生儿49例,小于1岁的婴幼儿64例,1～15岁儿童401例.围产期新生儿是无选择的产院出生儿,包括了少量早产儿和低出生体重儿.其余主要是排除了发热、腹泻、肝病、严重疾病等影响脂肪代谢的门诊小手术的体检儿童.用非衍生法前处理滤纸血片,串联质谱测定其中游离肉碱和30种酰基肉碱浓度.结果 游离肉碱（C0）、短链酰基肉碱（C2、C3、C4、C5）、中链酰基肉碱（C6、C8、C 10）及其烯酰基、羟基、二酰基肉碱和总肉碱水平新生儿阶段较低,1～3个月时最高,之后降低,2～15岁在相同水平维持.长链酰基肉碱（C12、C14、C16、C18）及其烯酰基肉碱、羟基酰基肉碱及其总和新生儿阶段最高,逐渐降低,2～15岁在相同水平维持.游离肉碱浓度（23.387±7.702）μmol/L,（30.064±8.252）μmol/L,（25.021±6.630）μmol/L,总长链酰基肉碱浓度（4.998±1.557）μmol/L,（2.854±0.821）μmol/L,（2.459±0.553）μmol/L,肉碱酰基肉碱总浓度（43.497±12.632）μmol/L,（49.013±12.497）μmol/L,（39.656±9.257）μmol/L在新生儿组、小于1岁组和大于1岁组差异有统计学意义（P＜0.01）.围产期新生儿男婴组肉碱（24.115±7.715）μmol/L和肉碱和酰基肉碱总和（43.65±5.252）μmol/L分别高于女婴（22.696±7.246）μmol/L和（41.90±5.038）μmol/L（P＜0.05）.新生儿组游离肉碱占总肉碱比值（54.0%±7.1%）明显小于非新生儿组（62.1%±6.1%,P＜0.05）,而长链（33.5%±6.0%）、中链（1.3%±0.3%）和短链脂酰基肉碱（11.6%±2.5%）与总肉碱比值分别高于非新生儿组（30.1%±4.9% 0.9%±0.6% 6.5%±2.3%,P＜0.05）.结论 1岁以内血中肉碱和酰基肉碱水平和构成变化较大,在评价肉碱营养状态和诊断有机酸和�
- 龚振华田国力王燕敏
- 关键词：串联质谱法肉碱年龄因素
- 0～15岁儿童血中氨基酸浓度变化调查被引量：3
- 2011年
- 目的调查0～15岁儿童血中氨基酸浓度的变化情况，为评价氨基酸营养状态和诊断氨基酸代谢病提供帮助。方法以1900名0—15岁儿童为研究对象，采用非衍生法前处理滤纸血片，串联质谱测定11种氨基酸浓度。结果血缬氨酸、亮氨酸、苯丙氨酸、甘氨酸、酪氨酸、脯氨酸、鸟氨酸和丙氨酸浓度在出生后开始逐渐降低，4～6个月时最低，此后逐渐升高，7个月-1岁后相对稳定；血蛋氨酸、精氨酸浓度在出生后最低，1—3个月时最高，此后开始下降，4～6个月后水平稳定；血丙氨酸和甘氨酸浓度分别在9岁女孩和11岁男孩中达到第2高峰。鸟氨酸／精氨酸、瓜氨酸／精氨酸和鸟氨酸／瓜氨酸的比值出生时较高，此后逐渐降低，3个月-1岁后维持稳定；苯丙氨酸／酪氨酸比值在出生时最低，以后逐渐升高，6个月～1岁后维持稳定。7个月～15岁年龄组的血氨基酸水平与1d～1个月年龄组和／或2～6个月年龄组间差异均有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。1d～1个月年龄组和全年龄组女性氨基酸浓度均明显高于男性（P〈0．05或P〈0．01）。结论1岁以内血中氨基酸浓度和构成比变化较大，在评价氨基酸营养状态和诊断氨基酸代谢病时要考虑年龄因素。
- 龚振华田国力王燕敏
- 关键词：串联质谱氨基酸性别年龄
