南京市医学科技发展项目(YKK07097)
- 作品数：5 被引量：17H指数：2
- 相关作者：李苏宜林岩杨芳陆颖芝程璐更多>>
- 相关机构：东南大学南京医科大学第二附属医院连云港市第二人民医院更多>>
- 发文基金：南京市医学科技发展项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 重组人生长激素对荷人胃癌裸鼠移植瘤血管内皮生长因子表达的影响被引量：2
- 2010年
- 目的研究重组人生长激素（rhGH）对生长激素受体（GHR）不同表达状态裸鼠人胃癌移植瘤生长及血管内皮生长因子（VEGF）表达的影响。方法采用免疫细胞化学染色法筛选出GHR阳性和阴性表达的细胞株各1株，分别接种于24只裸鼠皮下。将两种细胞接种裸鼠均随机分为对照组（0．9％NaCl，0．2ml／d）、低剂量rhGH组（0．5U·kg^-1·d^-1，0．2ml／d）和高剂量rhGH组（2．5U·kg^-1·d^-1，0．2mL／d）3组，每组8只，各组均连续给药14d，观察并记录裸鼠体重和肿瘤体积变化；采用酶联免疫吸附法测定各组裸鼠血清VEGF含量，免疫组织化学方法检测胃癌组织中VEGF蛋白表达，RT-PCR方法检测胃癌组织VEGFmRNA水平变化。结果筛选出GHR阳性表达的人胃癌细胞株SGC-7901和阴性表达的MKN-45。对于GHR^＋SGC-7901接种裸鼠，rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大（P〈0．05），且高剂量rhGH组促增长效应最为显著（P〈0．05），3组间体重差异无统计学意义（P〉0．05）；高剂量rhGH组的血清VEGF浓度为（252．94±15．32）ng／L，明显高于对照组的（49．94±5．73）ng／L和低剂量rhGH组的（167．60±9．54）ng／L（P〈0．05）；对照组VEGF表达为中度阳性，rhGH给药组呈强阳性；高剂量rhGH组肿瘤组织中VEGFmRNA相对表达量为0．6470±0．0447，明显高于对照组的0．3230±0．0258和低剂量rhGH组的0．4120±0．0351（P〈0．05）。对于GHR—MKN-45接种裸鼠，rhGH给药组体重明显大于对照组（P〈0．05）；肿瘤体积大小、血清VEGF水平、肿瘤组织VEGF蛋白及mRNA表达，3组间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论rhGH能促进GHR阳性表达的SGC-7901移植瘤生长，并促进VEGF表达增高；对于GHR阴性的MKN-45移植瘤，则没有表现出明显的促肿瘤生长及促VEGF表达效应。GHR存在可能是rhGH影响VEGF分泌的关键靶点。
- 程璐林岩曹鹏蒋苏豫李苏宜
- 关键词：重组人生长激素生长激素受体血管内皮生长因子胃癌
- 重组生长激素体外干预人肝癌细胞膜GHR密度变化被引量：2
- 2009年
- 目的体外环境下，针对人肝癌细胞生长激素受体（GHR）的不同表达状态，研究重组人生长激素（rhGH）对其胞膜表面GHR密度变化的影响。方法采用免疫细胞化学方法分别半定量测定人肝癌细胞株HepG2、SMMC7721、和QGY7701的GHR表达情况，采取50ng／mLrhGH，100ng／mLrhGH，200ng／mLrhGH干预和未处理4种干预方式体外培养上述3种细胞，然后利用放射性受体分析方法定量检测胞膜表面GHR密度变化。结果免疫细胞化学检测细胞株HepG2呈GHR高表达状态，50ng／mLrhGH、100ng／mLrhGH、200ng／mLrhGH干预后胞膜表面GHR位点数分别为8．4350±0．2396、9．3957±0．5143、8．3297±0．3133（10^3／cell），较空白对照组7．5137±0．5352（10^3／cell）明显增加（P〈0．05）；细胞株SMMC7721呈GHR弱表达状态，50ng／mLrhGH、100ng／mLrhGH、200ng／mLrhGH干预后胞膜表面GHR位点数分别为3．8343±0．2590、3．8213±0．2276、3．6947±0．2722（10^3／cell），与空白对照组3．7190±0．2824（10^3／cell）差异无统计学意义（P〉0．05）；细胞株QGY7701未表达GHR，各种rhGH干预后均未出现GHR表达的现象。结论rhGH明显促GHR高表达细胞株HepG2胞膜表面GHR密度增加，对GHR低表达细胞株SMMC772胞膜表面GHR密度无影响。rhGH不会改变细胞株QGY7701的GHR不表达状态。
- 陆颖芝林岩李苏宜杨芳
- 关键词：重组人生长激素生长激素受体肝癌
- 重组人生长激素对不同生长激素受体的人肝癌细胞的体外干预
- 2009年
- [目的]研究重组人生长激素(rhGH)在体外对不同生长激素受体(GHR)表达的人肝癌细胞系的影响。[方法]采用免疫组织化学方法检测人肝癌细胞系GHR的表达。每种肝癌细胞分4组处理:未处理组、50ng/mlrhGH干预组、100ng/mlrhGH干预组和200ng/mlrhGH干预组。采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂(CFSE)荧光染色、ELISA法分析不同浓度rhGH对人肝癌细胞系的生长率和增殖等影响。[结果]在GHR高表达细胞rhGH干预组生长率明显增高(P<0.05),CFSE荧光强度明显减弱(P<0.05),下游蛋白IGF-1明显增加。而GHR未表达、低表达肝癌细胞则未见明显影响(P>0.05)。[结论]rhGH对GHR高表达肝癌细胞明显促进增殖,并且下游蛋白IGF-1表达明显增加,rhGH对GHR无表达、低表达肝癌细胞不受影响其细胞增殖和IGF-1的表达。
- 陆颖芝林岩李苏宜杨芳
- 关键词：肝肿瘤重组人生长激素生长激素受体胰岛素样生长因子-1
- 重组人生长激素对裸鼠胃癌移植瘤生长及血清VEGF浓度的影响被引量：5
- 2010年
- 目的:研究重组人生长激素(rhGH)对裸鼠人胃癌移植瘤生长及血清VEGF水平的影响。方法:取60只雄性裸鼠进行实验,通过免疫细胞化学染色法检测胃癌细胞株SGC-7901及MKN-45生长激素受体(GHR)的表达状况,将GHR阳性表达的胃癌细胞株SGC-7901及GHR阴性表达的胃癌细胞株MKN-45分别接种于4只裸鼠皮下,制作裸鼠胃癌皮下移植瘤模型,3周后取出移植瘤制成组织匀浆,接种于剩余52只裸鼠。依据接种细胞种类不同分为移植瘤GHR阳性表达和GHR阴性表达裸鼠,不同GHR表达的裸鼠进一步分为对照组(C组:予0.9%NaCl,0.2 ml.d-1)、rhGH低剂量组(L组:予rhGH0.5 U.kg-1.d-1)、rhGH高剂量组(H组:予rhGH2.5 U.kg-1.d-1),连续给药14 d,观察并记录各组裸鼠体重和肿瘤体积变化,酶联免疫吸附法测定血清VEGF含量。结果:SGC-7901为GHR阳性表达的人胃癌细胞株,MKN-45为GHR阴性表达的人胃癌细胞株。对于接种GHR阳性表达的人胃癌细胞株的裸鼠,rhGH给药组皮下移植瘤体积较对照组增大(P<0.05),且H组促增长效应显著(P<0.05),3组间体重差异不明显(P>0.05);血清VEGF检测,L组为(167.60±9.54)pg.ml-1,H组为(252.94±15.32)pg.ml-1,较C组(49.94±5.73)pg.ml-1升高(P<0.05);对于接种GHR阴性表达的人胃癌细胞株的裸鼠,L组、H组体重均大于对照组(P<0.05),而3组之间肿瘤体积大小、血清VEGF水平比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:rhGH能促进GHR阳性表达的胃癌细胞株SGC-7901移植瘤生长,并促进血清VEGF表达增高;对GHR阴性表达的胃癌细胞株MKN-45移植瘤没有表现出明显的促肿瘤生长及促血清VEGF表达效应。GHR表达情况可能是rhGH影响血清VEGF分泌的关键靶点之一。
- 程璐林岩李苏宜
- 关键词：重组人生长激素生长激素受体血管内皮生长因子胃癌
- 重组人生长激素体外干预人肝癌细胞生长及受体表达被引量：8
- 2009年
- 目的研究体外环境下重组人生长激素（rhGH）对生长激素受体（GHR）不同表达状态的人肝癌细胞株增殖、凋亡及其细胞膜表面GHR密度的影响。方法体外培养人肝癌细胞株HepG-2、SMMC7721和QGY-7701，采用免疫细胞化学方法检测这3种肝癌细胞GHR的表达。每种肝癌细胞根据不同处理分为4组：未处理组、50ng／mlrhGH干预组、100ng／mlrhGH干预组、200ng／mlrhGH干预组。采用四甲基偶氮唑蓝比色法、羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺脂（CFSE）荧光染色法、酶联免疫吸附法分析不同浓度rhGH对人肝癌细胞系的细胞生长、增殖、胰岛素样生长因子-1（IGF-1）分泌等的影响。流式、放射性受体分析方法检测rhGH处理后细胞膜表面GHR表达情况。结果细胞株HepG-2高表达GHR；与未处理组相比，50、100、200ng／mlrhGH干预24h后生长率明显增高为：107．705％、114．181％、107．406％（P〈0．05），48h后生长率明显增高为：109．594％、114．156％、109．292％（P〈0．05）；CFSE荧光强度明显减弱（P〈0．05）；50、100、200ng／mlrhGH干预组24h后下游蛋白IGF-1分别为（236．94±19．07）、（247．16±14．56）、（217．94±33．61）pg／ml，明显高于未处理组的（173．86±27．46）pg/ml（P〈0．05）；50、100、200ng／mlrhGH干预后，流式细胞术检测胞膜表面GHR表达情况，荧光强度较未处理组明显增加（P〈0．05）；放射性受体分析法检测50、100、200ng／mlrhGH干预后胞膜表面GHR位点数（10^3／细胞）分别为：8．44±0．24、9．40±0．51、8．33±0．31，明显多于空白对照组的7．51±0．54（P〈0．05）。细胞株SMMC7721弱表达GHR，细胞株QGY-7701未表达GHR，与未处理组比，rhGH干预组生长率、CFSE荧光强度、下游蛋白IGF-1、GHR表达差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论体外环境下，rhGH可以促进GHR高表达人肝癌细胞株HepG-2增殖，提高其IGF-1的�
- 陆颖芝李苏宜林岩杨芳谈华阳何向明
- 关键词：重组人生长激素生长激素受体胰岛素样生长因子-1肝癌
