云南省自然科学基金(2008CD120)
- 作品数：4 被引量：6H指数：1
- 相关作者：万晓红邵建林王雁赵国良龚小红更多>>
- 相关机构：昆明医科大学昆明医学院第二附属医院昆明医学院第一附属医院更多>>
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- 血红素氧合酶-1蛋白转导对大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤的影响
- 2014年
- 目的 探讨血红素氧合酶-1（HO-1）蛋白转导对大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤的影响.方法 采用pET-21a（＋）-p53-11R质粒（11R质粒）构建11R-HO-1质粒,鉴定和收集11R-HO-1融合蛋白.采用随机数字表法将培养7d的大鼠海马神经元分为5组（n=171）：氧糖缺失/复氧复糖组（OGD/R组）、生理盐水组（NS组）、11R质粒组（11R组）、300 nmol/L 11R-HO-1组（H1组）、1 500nmol/L 11R-HO-1组（H2组）.NS组、11R组、H1组和H2组神经元分别经300 nmol/L生理盐水、300nmol/L11R质粒、300 nmol/L11R-HO-1融合蛋白、1 500 nmol/L 11R-HO-1融合蛋白孵育2h后制备氧糖缺失/复氧复糖模型.神经元用5％ CO2-95％N2饱和的无糖/无氧DMEM液和5％ CO2-95％N2培养箱孵育45 min,随后更换回高糖型DMEM培养液放置于37℃、5％CO2-95％空气培养箱培养24h,以制备氧糖缺失/复氧复糖损伤模型.模型制备结束即刻采用MTT法检测神经元存活率,TUNEL法检测神经元凋亡率,Western blot法检测HO-1和caspase-3蛋白的表达水平.结果 与OGD/R组比较,H1组和H2组神经元存活率升高,凋亡率降低,caspase-3蛋白表达下调,HO-1蛋白表达上调（P＜0.05）,NS组和11R组上述指标差异无统计学意义（P＞0.05）;与H1组比较,H2组神经元存活率升高,凋亡率降低,caspase-3蛋白表达下调,HO-1蛋白表达上调（P＜0.05）.结论 HO-1蛋白转导可减轻大鼠海马神经元氧糖缺失/复氧复糖损伤.
- 邵建林万晓红曾卫军龙茹华王雁赵国良
- 关键词：重组融合蛋白质类海马神经元HEME
- HO-1对氧糖剥夺海马神经元的保护作用及机制的研究被引量：1
- 2009年
- 目的研究HO-1对氧糖剥夺海马神经元的影响及其机制.方法将培养7d的大鼠海马神经元随机分为4组:正常培养组(C组)、正常培养+血晶素组(C+H组)、氧糖剥夺组(D组)、氧糖剥夺+血晶素组(D+H组).C组正常培养方法培养.C+H组在正常培养的神经元培养液中加入血晶素使其终浓度为10μmol/L后按正常培养24h.D组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理.D+H组神经元用10μmol/L血晶素处理24h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理.进行神经元纯度鉴定,细胞存活率,HO-1-mRNA表达,HO-1、Apaf-1、Caspase3蛋白表达,细胞色素C和神经元凋亡的检测.结果C+H组神经元HO-1-mRNA和HO-1表达高于C组(P<0.01),Apaf-1、Caspase3、细胞色素C、神经元存活率和神经元凋亡率变化无统计学意义(P>0.05);D组神经元HO-1-mRNA和HO-1表达高于C组(P<0.01),Apaf-1、Caspase3、细胞色素C高于C组(P<0.01),神经元存活率低于C组(P<0.01),神经元凋亡率高于C组(P<0.01);D+H组神经元HO-1-mRNA和HO-1表达高于D组(P<0.01),Apaf-1、Caspase3、细胞色素C低于D组(P<0.01),神经元存活率高于D组(P<0.01),神经元凋亡率低于D组(P<0.01).结论HO-1降低细胞色素C的释放和Apaf-1、Caspase3的表达,抑制神经元的凋亡.
- 王雁邵建林万晓红龚小红朱子夫
- 关键词：缺糖复氧神经元凋亡神经元存活细胞色素
- 血红素氧合酶-1对体外氧糖剥夺海马神经元Caspase-12表达抑制作用的研究
- 2009年
- 目的研究HO-1对氧糖剥夺海马神经元Caspase-12的影响及其机制.方法将培养7d的大鼠海马神经元随机分为4组:正常培养组(C组)、正常培养+血晶素组(C+H组)、氧糖剥夺组(D组)、氧糖剥夺+血晶素组(D+H组).C组正常培养方法培养.C+H组在正常培养的神经元培养液中加入血晶素使其终浓度为10μmol/L后按正常培养24h.D组神经元进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理.D+H组神经元用10μmol/L血晶素处理24h后进行缺糖、缺氧后复糖、复氧处理.进行神经元纯度鉴定,细胞存活率的检测,HO-1、Caspase-12、Caspase-3蛋白表达和神经元凋亡的检测.结果C+H组神经元HO-1表达高于C组(P<0.01),Caspase-12、Caspase-3、神经元存活率和神经元凋亡率变化无统计学意义(P>0.05);D组神经元HO-1表达高于C组(P<0.01),Caspase-12、Caspase-3高于C组(P<0.01),神经元存活率低于C组(P<0.01),神经元凋亡率高于C组(P<0.01);D+H组神经元HO-1表达高于D组(P<0.01),Caspase-12、Caspase-3低于D组(P<0.01),神经元存活率高于D组(P<0.01),神经元凋亡率低于D组(P<0.01).结论HO-1可抑制氧糖剥夺海马神经元Caspase-12的表达,从而抑制神经元的凋亡.
- 邵建林万晓红王雁朱子夫龚小红
- 关键词：缺糖复氧CASPASE-12
- 转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤被引量：5
- 2014年
- 目的评价血红素氧合酶-1(HO-1)蛋白转导对脑缺血/再灌注损伤沙土鼠海马神经元的影响。方法构建11R(11个精氨酸残基)-HO-1蛋白,50只沙土鼠随机分为5组(n=10):脑缺血/再灌注组(C组),沙土鼠行脑缺血/再灌注损伤。脑缺血/再灌注+生理盐水组(S组)、脑缺血/再灌注+11R组(R组)、脑缺血/再灌注+5 mg·kg-111R-HO-1组(H1组)和脑缺血/再灌注+25 mg·kg-111R-HO-1组(H2组),各组沙土鼠腹腔分别注射5 mg·kg-1生理盐水、5mg·kg-111R蛋白、5 mg·kg-111R-HO-1蛋白或25 mg·kg-111R-HO-1蛋白,3 h后行脑缺血/再灌注损伤。24 h后取沙土鼠海马,电镜下观察海马组织线粒体的变化,检测海马神经元凋亡、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平。结果C组、S组和R组3组间海马神经元线粒体变性率、神经元凋亡率、Caspase-3和HO-1蛋白表达、cAMP水平变化无差异(P>0.05);H1组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs C组、S组和R组,P<0.01);H2组海马神经元线粒体变性率降低、神经元凋亡率降低、Caspase-3蛋白表达下调、HO-1蛋白表达上调、cAMP水平升高(vs H1组,P<0.01)。结论 HO-1蛋白转导减轻了脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤。
- 万晓红王雁赵国良陈华梅邵建林
- 关键词：血红素氧合酶-1海马蛋白蛋白转导域
