国家自然科学基金(30200140)
- 作品数：9 被引量：48H指数：4
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 分子成像及其应用被引量：14
- 2005年
- 分子成像是近来新出现并迅速发展的一个生物医学领域,用它来显示和测定活体内生物过程在细胞和分子水平上的特征,可为深入揭示生理和病理过程的机制,以及对疾病及其治疗进行实时、动态、细致、无创、靶向性的探测和跟踪提供有效手段。预计在不远的将来,分子成像技术的迅速发展可能会带来临床医疗的重大变革。本文就分子成像及其应用作一综述。
- 蒋星军任彩萍
- 关键词：分子成像分子探针绿色荧光蛋白量子点
- 人胚胎干细胞培养体系的研究进展
- 2006年
- 人胚胎干细胞具有广泛的研究前景,建立一个理想的人胚胎干细胞培养系统是利用它的前提.较详细地对目前关于人胚胎干细胞培养体系的研究进展、一些细胞因子对人胚胎干细胞的作用和影响以及体外长期培养对人胚胎干细胞核型的影响进行了综述.
- 杨红任彩萍
- 关键词：人胚胎干细胞细胞因子核型
- MicroRNAs与胚胎干细胞研究
- 2010年
- MicroRNAs(miRNAs)是一种大小约20～25个碱基的非编码小分子RNA,一般通过特异性抑制靶蛋白翻译或降解靶基因mRNA发挥负调控基因表达的作用.胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞)是从植入前早期胚胎内细胞团或原始生殖细胞中分离得到并能在体外长期培养的高度未分化的多能细胞系,在揭示胚胎早期发育机理、药物筛选、临床再生医学等领域具有广泛的应用前景.最近研究发现miRNAs在ES细胞自我更新和分化过程中均发挥着重要的调控作用,但具体调控机制尚未完全阐明.进一步深入研究miRNAs在ES细胞中的作用,全面了解ES细胞自我更新和定向分化的机制是实现ES细胞广阔临床应用前景的基础.
- 曾英蒋星军李贵妃任彩萍
- 关键词：MICRORNAS胚胎干细胞基因调控
- 利用报道基因检测鼻咽癌细胞的RNA干扰作用被引量：14
- 2005年
- 背景与目的:RNA干扰(RNAinterference,RNAi)具有高效特异阻断基因表达的特点,在基因功能研究、信号转导通路的研究以及基因治疗中得到很广泛的应用。本实验通过体外转录合成siRNA和构建表达shRNA的质粒载体两种方法,检测鼻咽癌细胞系的RNAi作用,建立一个较完善的RNAi技术平台。方法:体外转录合成或通过pSUPER.retro构建表达针对GFP和荧光素酶的siRNAs或shRNAs,将它们和报道基因一起瞬时转染HeLa、CNE1、CNE2和5-8F细胞,用荧光显微镜和Westernblot检测GFP表达情况;用荧光素酶检测系统分析荧光素酶的活性。结果:3'末端带UU突出的siGFP2和psGFP能特异性地抑制细胞中GFP的表达,而单链反义RNA和3'末端不带UU突出的siGFP1无此作用。定量荧光素酶活性分析发现,siLuc能抑制HeLa、CNE1、CNE2和5-8F细胞中荧光素酶的表达,其抑制率分别达到91.43%,78.01%,90.30%和62.85%。HeLa细胞瞬时转染psLuc后,荧光素酶的表达抑制率可达到78.22%。结论:体外转录合成的siRNA和表达shRNA的质粒均能诱发RNAi效应。3'UU突出末端在siRNA诱发的RNAi中起作用。鼻咽癌细胞与HeLa细胞一样存在RNAi效应。
- 尹志华任彩萍李峰蒋卫红杨旭宇冯湘玲姚开泰
- 关键词：鼻咽肿瘤RNA干扰绿色荧光蛋白荧光素酶
- 无饲养层培养人胚胎干细胞方法的建立被引量：9
- 2005年
- 人胚胎干细胞(humanembryonicstemcell,hES细胞)是当前医学研究的热点之一.然而hES细胞培养条件苛刻,通常需要采用鼠胚胎成纤维细胞(mouseembryonicfibroblast,MEFs)饲养层来维持其未分化状态,成为目前hES细胞研究的瓶颈之一.本实验成功地将hES细胞接种在细胞外基质包被的六孔板上培养,传代20次后细胞仍然保持良好的未分化状态,各种hES细胞生物学特性(如表面标志物SSEA-3、SSEA-4、TRA-1-60和TRA-1-81,OCT-4,碱性磷酸酶及体内外分化潜能等)均无改变;其冻存、复苏效果与生长在饲养层上的hES细胞无明显差异.因此,该无饲养层培养体系可以用于培养hES细胞,并为hES细胞转基因研究及大规模培养打下良好的基础.
- 赵明任彩萍蒋星军杨旭宇张宏波单文姣周亮冯湘玲
- 关键词：人胚胎干细胞基因转染
- 一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法被引量：4
- 2004年
- 目的 :利用Fugene 6基因转染试剂建立一种简便高效的人胚胎干细胞转染方法 ,并建立稳定表达增强型绿色荧光蛋白 (enhancedgreenfluorescentprotein ,EGFP)报告基因的人胚胎干细胞系 ,为人胚胎干细胞研究提供一个非常有用的细胞模型。方法 :通过Fugene 6基因转染试剂成功地将EGFP基因转入无饲养层培养的人胚胎干细胞中 ,嘌呤霉素筛选得到稳定表达EGFP的克隆 ;利用倒置荧光显微镜和流式细胞仪检测EGFP在人胚胎干细胞中的表达情况。结果 :EGFP瞬时转染效率为 30 %～ 40 % ,稳定转染效率约 1 1 0 4～ 5,且稳定转染的人胚胎干细胞均表达EGFP。结论 :Fugene 6是一种良好的基因转染试剂 ,它可以有效地将外源基因转入人胚胎干细胞中 ,为人胚胎干细胞的转基因研究提供新的实验手段。
- 赵明尹志华蒋星军杨旭宇姚开泰任彩萍
- 关键词：人胚胎干细胞EGFP基因稳定转染流式细胞仪检测细胞研究报告基因
- 人胚胎干细胞和拟胚体基因表达谱的初步分析被引量：3
- 2008年
- 利用人类全基因组Affymetrix芯片检测人胚胎干细胞与其自发分化7d的拟胚体之间的差异表达基因.结果显示:与未分化的人胚胎干细胞相比,在分化7d的拟胚体中表达下调2倍及以上的已知和未知基因共有1100个,表达上调2倍及以上的已知或未知基因共有2283个.利用Gostat对这些差异表达基因进行功能分析,发现它们分别与细胞的生物代谢过程、信号传导通路、系统发育、细胞分化、分子功能及亚细胞组分相关.胚胎干细胞具有自我更新能力,是研究早期胚胎发育理想的细胞模型,因此对差异表达基因的功能研究有助于了解维持人胚胎干细胞自我更新的分子机制以及胚胎发育早期的分子事件.
- 赵明任彩萍杨红蒋星军曾英王磊周文祝斌冯湘玲姚开泰
- 关键词：人胚胎干细胞拟胚体基因芯片生物信息学分析
- 人胚胎干细胞的体外定向分化被引量：1
- 2007年
- 人胚胎干细胞(human embryonic stem cells,hESCs)由囊胚期胚胎内细胞团分离培养获得,具有保持未分化状态的无限增殖能力。hESCs具有多向分化潜能,在体内和体外均可分化形成所有三个胚层(外胚层、中胚层、内胚层)的衍生物。hESCs一般在鼠胚胎成纤维细胞(mouse embryonic fibroblast,MEF)饲养层上培养和扩增。为了优化培养条件,目前人们已发展了多种人类细胞饲养层和无饲养层、非条件培养基体系。hESCs可以在体外定向诱导分化为多种细胞类型,为揭示人胚早期发育机制和发展多种疾病的细胞移植治疗奠定了基础。hESCs可以在体外进行遗传修饰,将有助于揭示特定基因在发育过程中的调控和功能。对hESCs的深入研究将极大地推动医学和生命科学的进展,并将最终应用于临床,造福人类。
- 刘卫东任彩萍姚开泰
- 关键词：人胚胎干细胞定向分化遗传修饰
- 胚胎干细胞诱导分化的研究进展被引量：5
- 2005年
- 胚胎干细胞(embryonic stem cell, ESC)因其具有自我更新能力和发育的多能性,成为当前医学研究的热点。ESC不但可以自发分化,而且在诱导因素作用下可以定向分化为某一种特定的成熟细胞。因此,ESC在移植医学、发育生物学等领域有着广阔的应用前景。本文对几种定向诱导ESC分化的策略进行了综述。
- 赵明任彩萍
- 关键词：胚胎干细胞诱导分化细胞因子
