四川省教育厅科学研究项目(2006ZD019)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：张志霞宋杰李洪王丽刘晓燕更多>>
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- 流行性乙型脑炎病毒E蛋白基因在大肠杆菌中的克隆与表达被引量：2
- 2008年
- 目的;获得JEVE蛋白基因,构建重组表达载体并在E.coli中高效表达。方法:参照GeneBank中的日本乙型脑炎病毒SA14-14株序列设计一对特异性引物,采用RT-PCR法扩增E基因全长,克隆至PUCm-T载体,经测序证实后克隆至原核表达载体pET32a中,转化入BL21(DE3),IPTG诱导表达,对表达产物进行SDS-PAGE电泳分析。结果:限制性核酸内切酶酶切鉴定、PCR和核酸序列分析表明,扩增出了JEVE蛋白基因全长1500bp,成功构建了重组质粒pET-32a/JEVE,SDS-PAGE分析显示目的蛋白主要以包涵体的形式在大肠杆菌中获得表达,表达量占总菌体蛋白的35%。结论:在大肠杆菌中成功表达了JEVE蛋白,为ELISA早期诊断试剂盒的研制和E蛋白基因结构与功能的分析奠定了基础。
- 王丽李洪张志霞刘晓燕谢华福宋杰梅志强
- 关键词：流行性乙型脑炎病毒基因克隆
