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河北省自然科学基金(303473)
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2
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相关作者:
郭志远
崔建岭
曹宏伟
赵纳
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2006年
崔建岭
郭志远
荧光素酶光成像实时监测诱导凋亡配体基因治疗裸鼠肺癌A549细胞移植瘤的实验研究
2012年
目的应用人肿瘤坏死因子相关的诱导凋亡配体(hTRAIL)基因和萤火虫荧光素酶(luc)基因的腺病毒双表达载体(ad—hTRAIL-luc),以luc为报告基因,活体内监测hTRAIL基因的表达及作用。方法皮下接种法建立肺癌A549细胞裸鼠移植瘤模型,瘤内多点注射腺病毒载体ad—luc.hTRAIL、ad—hTRAIL、ad.luc。对照组注射磷酸盐缓冲液(PBS)。于注射后4、7、10、14、21、28d动态测量各组肿瘤大小,并利用高敏感、超低温(CCD)照相机进行活体生物发光成像检测luc活性,然后处死动物,免疫组织化学(简称免疫组化)法检测各组hTRAIL蛋白表达情况,并进行免疫组化评分(IHS);TUNEL法检测各组肿瘤细胞凋亡情况,并计算凋亡率。统计分析组间比较采用方差分析,两样本比较采用配对t检验。对ad-luc-hTRAIL组的发光光子数、免疫组化评分、凋亡率3种结果进行线性相关分析。结果ad.1uc—hTRAIL与ad—hTRAIL组肿瘤生长速度明显较PBS组缓慢(t=2.71、2.72,P〈0.05),28d后各组肿瘤体积分别为(208.4±42.3)、(181.5±23.9)、(427.0±59.3)mm2,ad—luc组与PBS组肿瘤生长差异无统计学意义(t=2.07,P〉0.05)。ad—luc—hTRAIL组luc活性于治疗后第7天达高峰(1.37±1.04)后快速下降。ad—luc—hTRAIL与ad.hTRAIL2组在注射载体后第7天hTRAIL表达及肿瘤细胞凋亡率达高峰,IHS峰值分别为6.25±2.06和6.5±2.89,肿瘤细胞凋亡率峰值分别为(60.75±8.06)%和(61.50±8.47)%。ad-luc—hTRAIL组lue表达量(绝对光子数)与IHS、肿瘤细胞凋亡率三者间均呈线性正相关(r光子影IHs=0.942,r光子数/凋亡率=0.842,rIHS/凋亡率=0.887,P值均〈0.05)。结论目的基因可以有效地通过ad—luc—hTRAIL转导入裸鼠肺癌A549细胞移植瘤内并高水平表达,发挥生长抑制和促凋亡作用,体外CCD照相�
曹宏伟
崔建岭
赵纳
郭志远
关键词:
发光蛋白质类
肿瘤坏死因子类
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