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山东省卫生厅青年科研基金(JW10)
作品数:
2
被引量:5
H指数:1
相关作者:
苏维奇
毕春霞
闫志勇
张德坤
刘成玉
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相关机构:
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发文基金:
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2008
1篇
2006
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微型寡核苷酸芯片检测脑脊液病原菌研究与应用
被引量:1
2008年
目的建立快速检测脑脊液标本中常见病原菌的微型寡核苷酸芯片。方法根据脑脊液中常见病原菌16S rRNA基因序列设计通用引物和检测探针;探针固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片;通用引物扩增病原菌DNA并标记生物素,产物与芯片进行反向杂交检测;对该体系的敏感性和特异性进行了测试,并检测了32例临床病原菌感染的脑脊液标本。结果所有实验菌株均只与芯片上相应探针杂交。该法最低可检测出10 CFU/ml的大肠埃希菌;32例临床本的检测结果与常规鉴定法完全一致。结论该寡核苷酸芯片法能够准确、敏感、快速地检测脑脊液标本中的病原菌。
闫志勇
毕春霞
鲁晓晴
苏维奇
宋旭霞
王斌
关键词:
脑脊液
病原菌
寡核苷酸芯片
分子杂交
脑脊液病原菌16S rRNA微型寡核苷酸芯片检测方法的初步研究
被引量:4
2006年
目的初步建立一种脑脊液标本中常见病原菌的快速检测方法。方法根据脑脊液标本中常见病原菌16S rRNA基因保守区的序列设计用于基因扩增的通用引物,制备细菌的通用探针、革兰阳性和阴性菌通用探针,以及肠杆菌科属、嗜血杆菌属和脑膜炎奈瑟菌、金黄色葡萄球菌、凝固酶阴性葡萄球菌、肺炎链球菌、产单核李斯特菌的属或种特异性探针,将探针加尾后固定于尼龙膜上制成寡核苷酸芯片。提取标本中病原菌DNA后用通用引物行PCR扩增,扩增过程中用生物素标记;将产物变性后分别与点有各种探针的尼龙膜反向杂交,检测脑脊液中细菌的感染情况。结果所有探针均只与其相应的细菌DNA扩增产物反应产生杂交信号。结论建立的脑脊夜病原菌寡核苷酸芯片能够准确、敏感、快速、高效地检测脑脊液标本中病原菌的感染情况。
毕春霞
武静
张德坤
苏维奇
刘成玉
闫志勇
关键词:
脑脊髓液
寡核苷酸芯片
寡核苷酸序列分析
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