国家自然科学基金(30200123)
- 作品数：13 被引量：73H指数：7
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- 相关机构：第三军医大学西南医院第三军医大学大坪医院第三军医大学更多>>
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- TK1在肺癌患者血清中的表达水平及其与肿瘤临床病理特征及预后的关系被引量：7
- 2016年
- 目的:探讨肺癌患者血清胸腺嘧啶核苷激酶1(TK1)与肿瘤临床病理特征及预后的关系。方法:选择2012年1月-2014年1月在我院接受治疗的肺癌患者79例作为研究对象,另选择同期在我院接受健康体检的志愿者53例作为对照组。采用化学发光法检测两组研究对象血清中TK1的表达情况,并分析TK1表达与肿瘤临床病理特征及预后的关系。结果:TK1在肺癌患者血清中的阳性表达率(56.96%)显著高于健康对照组(16.98%),差异具有统计学意义(P<0.05)。肿瘤分期为晚期的患者血清中TK1的阳性表达率高于肿瘤分期为早期的肺癌患者,差异具有统计学意义(P<0.05);肿瘤远处转移的患者血清中TK1的阳性表达率高于未发生远处转移的患者,差异具有统计学意义(P<0.05)。TK1在性别、抽烟史、淋巴结转移及病理类型不同患者血清中的阳性表达率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。TK1阳性患者两年生存率(42.22%)低于TK1阴性患者(64.71%),差异具有统计学意义(P<0.05)。结论:肺癌患者血清中TK1呈高表达,其表达水平与肿瘤远处转移、TMN分期及预后有关。
- 赵晓龙孟胜蓝蔡云婷张景阁牛会军
- 关键词：胸腺嘧啶核苷激酶肺癌远处转移
- 树突状细胞扫描电镜样本制备方法被引量：16
- 2005年
- 目的 探讨具有特殊结构的悬浮树突状细胞的扫描电镜制样方法。方法 对比观察细胞离心成团与自然沉降法制备扫描电镜样品对细胞形态学的影响。结果 自然沉降法能很好地显示树突状细胞的形态结构。结论 自然沉降法是制作具有特殊结构悬浮细胞的扫描电镜制样方法。
- 陶忠芬蔡永国杨仕明可金星黄文琪肖桃元房殿春
- 关键词：树突状细胞扫描电镜自然沉降法细胞形态学特殊结构
- 人肝素酶基因正反义荧光真核表达载体的构建及肝癌细胞转染被引量：3
- 2006年
- 目的构建正义和反义人肝素酶绿色荧光蛋白真核共表达载体,并分别转染人低转移肝癌细胞株MHCC97-L及高转移细胞株MHCC97-H和HCCLM6。方法采用基因重组技术,用EcoRⅠ从pcDNA3-Hpa质粒上切下约1.7 kb的人肝素酶全长cDNA片段,然后连入pIRES2-EGFP质粒的EcoRⅠ酶切位点上,经BamHⅠ酶切鉴定出正义和反义表达载体,并进一步测序确认。用脂质体法将肝素酶正义真核表达载体转入人低转移肝癌细胞株MHCC97-L,反义真核表达载体转入人高转移肝癌细胞株MHCC97-H和HCCLM6,24 h后荧光倒置显微镜下检测转染结果。结果经BamHⅠ酶切后,正义质粒形成5.3 kb和1.7 kb两条DNA片段,而反义重组质粒为6.5 kb和0.5 kb两条DNA片段,与理论计算值完全一致;测序结果进一步确认了方向的正确性。转染成功的肝癌细胞在倒置荧光显微镜下呈绿色荧光。结论成功构建了人肝素酶的正、反义真核表达载体,并成功转染人低、高转移肝癌细胞株,为进一步研究正、反义肝素酶基因转染对肝癌细胞的转移能力的影响奠定了基础。
- 陈陵李志宏杨仕明李晶晶蔡永国房殿春罗元辉王东旭
- 关键词：肝素酶转染
- 肝素酶基因修饰的树突状细胞疫苗对胃癌细胞的免疫效应研究被引量：11
- 2006年
- 目的研究肝素酶基因修饰的树突状细胞(DC)疫苗对胃癌细胞的免疫效应,探讨肝素酶疫苗在胃癌主动免疫治疗中的可行性。方法将含有肝素酶全长cDNA的重组肝素酶腺病毒感染人类白细胞抗原A2(HLA-A2)阳性健康志愿者外周血单个核细胞来源的DC,制备肝素酶基因修饰的DC疫苗,刺激同一来源的淋巴细胞,使其活化为肝素酶特异性细胞毒T淋巴细胞(CTL),采用标准51Cr释放试验验证其对KATO-Ⅲ和SGC-7901胃癌细胞的体外免疫效应,肝素酶特异性的CTL与不同靶细胞共孵育后干扰素(IFN)-γ的释放采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法。结果经肝素酶重组腺病毒感染后该DC中肝素酶蛋白质的表达明显升高。肝素酶特异性的CTL在各效/靶比时对HLA-A2及肝素酶均阳性的KATO-Ⅲ胃癌细胞都有明显的免疫杀伤活性;相反,对肝素酶阳性但HLA-A2阴性的SGC-7901胃癌细胞不具有杀伤效应,即使在最高效/靶比时,其杀伤活性亦仅为11·1%±4·6%;进一步研究发现肝素酶特异性CTL对自体淋巴细胞亦不具有免疫杀伤作用,在最高效/靶比时,其杀伤活性为11·4%±7·9%。同时研究还发现,肝素酶修饰的DC刺激的效应细胞与KATO-Ⅲ共孵育后,其IFN-γ的表达明显高于空病毒修饰组以及IL-2刺激组(280pg/ml±24pg/mlvs121pg/ml±19pg/ml和60pg/ml±11pg/ml,P<0·05);而经肝素酶修饰的DC刺激的特异性效应细胞与SGC-7901或自体淋巴细胞孵育后所检测的IFN-γ在各组间差异无统计学意义(均P>0·05)。结论肝素酶基因修饰的DC疫苗可以诱发特异性CTL,对HLA相匹配且肝素酶阳性的胃癌细胞具有良好的免疫杀伤活性,而对自体淋巴细胞不具有免疫杀伤作用,是一种安全有效的肿瘤免疫基因治疗的靶位。
- 蔡永国房殿春陈陵王东旭罗元辉汤旭东陈婷杨仕明
- 关键词：肝素裂合酶癌症疫苗
- 胃癌组织c-met蛋白表达的意义及其与微血管密度的关系被引量：9
- 2005年
- 目的探讨cmet蛋白在胃癌组织中的表达与胃癌临床病理特征及其肿瘤微血管密度的关系。方法对47例手术切除的胃癌组织采用免疫组织化学法检测cmet蛋白的表达及其肿瘤微血管密度。结果胃癌组织中cmet蛋白表达阳性率为85.1%,cmet阳性率与胃癌肿瘤的直径、有无淋巴结转移、浸润深度、TNM分期、是否有淋巴管及静脉癌栓有关;cmet阳性组胃癌微血管密度高于对照组。结论cmet蛋白的表达促进了胃癌的生长、浸润及转移,并促进胃癌的血管生成,与胃癌预后不良及临床病理特征有重要关系。
- 蔡永国房殿春杨仕明陈陵罗元辉王东旭
- 关键词：原癌基因蛋白质C-MET微血管密度胃肿瘤
- 乙酰肝素酶在肿瘤发生、发展、转移及康复预后中的作用被引量：7
- 2003年
- 细胞外基质(extrcellularmatrix,ECM)和基底膜(Basementmembrance,BM)是肿瘤细胞侵袭及转移的屏障。糖氨聚糖是此屏障的主要成分之一,它的主要成分为硫酸乙酰肝素蛋白多糖(heparinsulphateproteoglycan,HSPGs)。肝素酶是近年来发现并克隆成功的酶,与肿瘤侵袭和转移相关,是裂解连接于HSPGs核心分子上硫酸肝素的一类葡糖苷酸内切酶。肝素酶在转移性肿瘤组织中表达程度与患者的预后具有相关性,癌症患者检测肝素酶的表达将对手术范围的选择有参考价值,术后监测肝素酶的表达水平,有望成为判断患者的复发、预后、生活质量的一个新的指标。因此,对乙酰肝素酶的结构、功能、基因定位、分子生物学特征在正常组织和肿瘤组织中的表达及其作用机制等方面进行详细综述。对肝素酶抑制剂及其临床应用前景进行简要概括。
- 蔡永国杨仕明房殿春
- 关键词：乙酰肝素酶肿瘤发生肿瘤发展肿瘤转移康复预后
- hTERT基因修饰对人外周血树突状细胞生物学行为的影响被引量：1
- 2006年
- 目的观察人端粒酶逆转录酶(hTERT)基因修饰对树突状细胞生物学行为的影响。方法用负载hTERT目的基因的复制缺陷型腺病毒(rAd-hTERT)感染原代培养的人树突状细胞(DC)以获取hTERT基因修饰的DC(DC-hTERT),采用免疫组化及Westernblot法检测DC-hTERT内hTERT及增殖细胞核抗原(PCNA)的表达;采用流式细胞术检测DC-hTERT表面成熟标志的变化;采用MTT法检测DC-hTERT的增殖能力。结果rAd-hTERT感染DC后hTERT蛋白表达明显增加;流式细胞术检测显示,感染Ad-hTERT后DC表面成熟指标CD83及CD86无明显变化;成熟DC经hTERT修饰后的生长曲线显示,DC-hTERT在前2周数量稍有增加,但DC/PBS及DC/rAd-LacZ数量明显下降,在第3周三者数量均有下降趋势,但DC-hTERT组细胞数量仍明显多于其他两组;Westernblot检测显示DC-hTERT内PCNA的表达明显增强。结论hTERT基因表达上调后,DC增殖能力明显增强,衰老速度延缓。
- 陈陵蔡永国梁光萍苏踊跃房殿春汤旭东陈婷余松涛罗元辉杨仕明
- 关键词：人端粒酶逆转录酶树突细胞重组腺病毒
- 腹水脱落细胞中肝素酶的表达对良恶性腹水鉴别诊断的价值被引量：3
- 2005年
- 肝素酶是近年来发现的能够降解基底膜及细胞外基质的关键酶,具有促进肿瘤细胞向周围组织间隙侵袭的作用.我们前期研究表明,肝素酶在胃癌组织中高表达,能够促进胃癌的血管生成、浸润与转移,是胃癌患者预后不良的一个指标[1].在腹水脱落细胞中肝素酶是否表达,能否用于鉴别腹水的性质鲜见报道.我们采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法检测肝素酶在腹水脱落细胞中的表达,探讨肝素酶在良恶性腹水鉴别诊断中的意义.
- 蔡永国房殿春杨仕明罗元辉陈陵杨孟华王东旭
- 关键词：腹水脱落细胞肝素酶恶性腹水良性腹水
- 人肝素酶基因正反义荧光真核表达载体的构建及肺癌细胞转染
- 2004年
- 目的 :构建正义和反义人肝素酶与绿色荧光蛋白真核共表达载体 ,并分别转染人低转移肺癌细胞株 95C及高转移细胞株 95D .方法 :采用基因重组技术 ,用EcoRⅠ从pcD NA3 Hpa质粒上切下约 1 .7kb的人肝素酶全长cDNA片段 ,然后连入pIRES2 EGFP质粒的EcoRⅠ酶切位点上 ,经BamHⅠ酶切鉴定出正义和反义表达载体 ,并用脂质体法将肝素酶正义真核表达载体转入人低转移肺癌细胞株 95C、反义真核表达载体转入人高转移肺癌细胞株 95D ,G4 1 8筛选后 ,荧光倒置显微镜检测转染结果 .结果 :经BamHⅠ酶切后 ,正义质粒形成 5 .3+1 .7kb两条DNA片段 ,而反义重组质粒为 6 .5和 0 .5kb两条DNA片段 ,与理论计算值完全一致 ;转染后肺癌细胞倒置荧光显微下呈绿色荧光 .结论 :成功构建了人肝素酶的正、反义真核表达载体 ,并成功转染人低、高转移肺癌细胞株 ,为进一步研究正。
- 牛会军杨仕明范士志蔡永国房殿春罗元辉王东旭
- 关键词：肝素酶转染
- 乙酰肝素酶与肿瘤转移研究进展被引量：7
- 2005年
- 乙酰肝素酶是目前发现的哺乳动物细胞中唯一能切割细胞外基质中硫酸肝素蛋白多糖侧链的内源性糖苷酶。本文对乙酰肝素酶的结构、功能、分子特性、基因定位、核苷酸序列及其对血管生成的影响,在正常组织、肿瘤组织及转移癌组织中的表达和该酶参与肿瘤转移的机制等方面进行了综述。对用筛选乙酰肝素酶抑制剂的方法、寻找抗肿瘤新药的最新进展做了概述,旨在为肿瘤转移机制研究、寻找治疗方法提供一些线索。
- 李志宏杨仕明
- 关键词：乙酰肝素酶血管生成肿瘤转移哺乳动物细胞细胞外基质抗肿瘤新药
