重庆市自然科学基金(CSCT2005BB5311)
- 作品数：6 被引量：41H指数：3
- 相关作者：陈道荣王丕龙黄爱龙张秉强陶小红更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院重庆医科大学附属第二医院重庆市巴南区人民医院更多>>
- 发文基金：重庆市自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Ⅰ型肝肾综合征的临床分析被引量：4
- 2009年
- 目的探讨Ⅰ型肝肾综合征的发病原因、诱因及临床指标变化，以提高对该病的整体认知水平。方法回顾性查阅我院2000年至今收治的Ⅰ型HRS住院患者病例29例，分析其基础疾病及病因；发生肝肾综合征的诱因；肝肾功能及凝血象变化；CTP及MELD肝功能分级；尿量变化及生存率等。结果Ⅰ型HRS主要发生于晚期肝硬化和重症肝炎患者。易出现腹水、肝性脑病、感染及消化道出血等并发症。Child-Pugh评分多在B级和C级，以C级为主（82．76％）。MELD评分中有27例在20分以上（93．1％），多数位于20～40分之间。Child-Pugh评分B级和C级间的MELD评分存在显著性差异。其尿量逐渐减少，甚至无尿。29例患者中21例在住院期间死亡，8例自动出院。结论Ⅰ型HRS患者死亡率极高，应争取早发现、早诊断、早治疗，以改善预后。
- 陈道荣陶小红王丕龙
- 关键词：肝肾综合征肝功能衰竭肝硬化
- 沉默dnmt1基因对胃癌细胞株AGS细胞周期、增殖及凋亡的影响被引量：6
- 2006年
- 背景与目的:DNA甲基转移酶1(DNAmethyltransferase1,dnmt1)基因在多种肿瘤细胞中表达量相当高,而在正常成人细胞中则低表达,因此dnmt1基因的高表达与肿瘤的发生有密切的关系。本研究观察以dnmt1基因为靶基因的重组质粒对胃癌细胞株AGS细胞周期、增殖及凋亡的影响。方法:设计短发夹状RNA(shorthairpinRNA,shRNA)的寡核苷酸片段,再克隆至载体pTZU6+1中构建重组体pshRNA-dnmt1,转染胃癌细胞株AGS。实验分为空白对照组(仅予脂质体)、pTZU6+1组(予空质粒pTZU6+1)和pshRNA-dnmt1组(予以重组质粒pshRNA-dnmt1)3组。Westernblot检测dnmt1蛋白水平变化;RT-PCR法评估mRNA水平;流式细胞技术分析细胞周期的变化;MTT法检测细胞生长情况;吖啶橙/溴乙锭双染色(AO/EB)法、电镜和TUNEL观察细胞凋亡情况。结果:成功构建重组质粒pshRNA-dnmt1,并经序列分析得到确认。pshRNA-dnmt1转染AGS细胞后24h出现dnmt1蛋白表达量减少,24、48、72h抑制率分别为28.24%、68.54%、81.47%。转染pshRNA-dnmt1后24、48、72h对AGS细胞中dnmt1mRNA的抑制率分别为21.63%、52.97%、72.06%。转染后72hS期细胞由空白对照组的(36.58±1.76)%降至pshRNA-dnmt1组的(18.54±6.59)%;G2/M期细胞由空白对照组的(6.18±0.32)%升至pshRNA-dnmt1组的(18.53±1.42)%,均有显著性差异(P<0.05)。转染后24、48、72h细胞存活率分别为79.49%、51.63%和39.16%。AO/EB法、电镜和TUNEL均可见大量典型的凋亡和坏死细胞。结论:重组质粒pshRNA-dnmt1能特异有效地抑制AGS细胞内dnmt1的表达、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡,为肿瘤的基因治疗提供依据。
- 陈道荣王丕龙黄爱龙张秉强
- 关键词：DNMT1基因AGS细胞细胞周期
- Dnmt1基因对胃癌细胞株AGS细胞增殖凋亡的影响
- 2006年
- 目的:利用RNA干扰(RNAi)技术,以Dnmt1(DNAmethyltransferase1)为靶基因,设计构建重组体pshRNA-Dnmt1,研究其对胃癌AGS细胞增殖凋亡的影响.方法:设计shRNA的寡核苷酸片断,再克隆至载体pTZU6+1中构建重组体pshRNA-Dnmt1,转染胃癌细胞株AGS,用WesternBlot检测DNMT1蛋白水平变化,用RT-PCR法评估mRNA水平,MTT法动态监测活细胞数,AO/EB法、电镜和TUNEL观察其促凋亡作用.结果:成功构建重组质粒pshRNA-Dnmt1后,进行序列分析得到确证.RT-PCR检测结果证实:重组质粒pshRNA-Dnmt1对胃癌AGS细胞中Dnmt1基因的转录有着明显抑制作用,转染后24h抑制率在21.63%左右;48h为52.97%;72h为72.06%.WesternBlot检测结果表明:pshR-NA-Dnmt1转染AGS细胞后24h出现DNMT1蛋白表达量减少,抑制率为28.24%;48h为68.54%;72h为81.47%.MTT结果提示:转染后24,48和72h细胞数存活率为对照组的79.49%,51.63%和39.16%.AO/EB法、电镜和TUNEL都看见大量典型的凋亡和坏死细胞,转染后48h的细胞凋亡率由对照组的5%上升为35%左右.结论:重组质粒pshRNA-Dnmt1能特异有效地抑制胃癌细胞株AGS内Dnmt1基因的表达,能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡,从而为肿瘤的基因治疗开辟了新途径.
- 陈道荣王丕龙杨雪琴黄爱龙张秉强陶小红
- 关键词：DNMT1基因RNA细胞周期
- 1型肝肾综合征的临床分析
- 2009年
- 目的:探讨1型肝肾综合征(HRS)的发病原因、诱因及临床指标变化,以提高对该病的整体认知水平.方法:回顾性查阅我院2000-01/2008-08收治1型HRS住院患者29例,分析其基础疾病;病因;诱因;肝功能、肾功能及凝血像;Child-Pugh及终末期肝病模型(MELD)肝功能分级;尿量及生存率等.结果:1型HRS主要发生于晚期肝硬化和重症肝炎患者.Child-pugh评分均在B级以上,以C级为主(82.8%).B级与C级间血清总胆红素(TB),凝血酶原时间国际标准化比值(INR),血清白蛋白(ALB),MELD指标差异具有统计学意义(P<0.05).C级患者更易出现腹水、肝性脑病和感染.MELD评分20分以上27例(93.1%),多数在20～40分之间.不同MELD组间TB,INR,Cre,Child-pugh评分存在显著差异(P<0.05).MELD评分越高越易发生肝性脑病.29例患者随访1mo全部死亡.结论:1型HRS患者死亡率极高,应根据临床生化指标及肝功能分级综合判断其预后,做到早诊断,早治疗,以改善预后.
- 陈道荣陶小红王丕龙
- 关键词：肝肾综合征肝功能衰竭肝硬化
- 精神心理因素与功能性胃肠病的关系被引量：31
- 2010年
- 功能性胃肠病是近年来研究的一个热点,发病率高,临床上常见。精神心理因素在其发病过程中起着重要作用,可能与胃肠道动力和感觉异常的脑肠轴调节障碍有关。联合抗抑郁药及心理治疗功能性胃肠病在改善精神症状的同时,还能明显减轻躯体症状,对健康相关生活质量的改善及降低复发率有不错的效果。因此,精神心理因素在功能性胃肠病中的作用不容忽视,正确理解并加强认识对诊疗的提高尤为重要。
- 叶佳媚陈道荣
- 关键词：功能性胃肠病精神心理因素抗抑郁治疗心理治疗
- pshRNA-DNMT1介导的胃癌AGS细胞凋亡的体内外研究
- 2006年
- 目的构建沉默DNMT1基因的重组体pshRNA-DNMT1,研究其体内外对胃癌AGS细胞增殖凋亡的影响。方法设计短发夹RNA(shRNA)的寡核苷酸片断,克隆到载体pTZU6+1中,构建重组体pshRNA-DNMT1,转染胃癌细胞株AGS,用Western印迹检测DNMT1蛋白质水平变化,用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法评估mRNA水平,四甲基偶氮唑盐比色法(MTT法)动态监测活细胞数,电镜和原位末端标记技术(TUNEL)观察其体外的促凋亡作用。构建裸鼠胃癌模型,经pshRNA-DNMT1处理后观察瘤体大小,绘制生长曲线;用苏木素伊红(HE)染色法、电镜和TUNEL检测细胞凋亡,用增殖细胞核抗原(PCNA)法评价细胞的增殖能力。结果成功构建重组质粒pshRNA-DNMT1后,进行序列分析得到确证。pshRNA-DNMT1转染AGS细胞后24h出现DNMT1蛋白质表达量减少,抑制率为28·24%,48h为68·54%,72h为81·47%,重组质粒pshRNA-DNMT1对胃癌AGS细胞中DNMT1基因的转录有着明显抑制作用,转染后24h抑制率为21·63%,48h为52·97%,72h为72·06%。转染后24、48和72h细胞数存活率为PBS组的79·49%、51·63%和39·16%。pshRNA-DNMT1能抑制肿瘤生长,呈一定的时间和剂量依赖性。结论重组质粒pshRNA-DNMT1能特异有效地抑制胃癌细胞株AGS内DNMT1基因的表达。在胃癌细胞株AGS的体内外实验中均能抑制细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 陈道荣王丕龙黄爱龙张秉强
- 关键词：胃肿瘤脱噬作用
