江苏省自然科学基金(BK2009205)
- 作品数：9 被引量：27H指数：2
- 相关作者：范钰祁卫东周永静蒋鹏程马圭更多>>
- 相关机构：江苏大学附属人民医院南京大学医学院附属鼓楼医院江苏省人民医院更多>>
- 发文基金：江苏省自然科学基金镇江市科技支撑计划(社会发展)项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-155反义寡核苷酸转染对人大肠癌Lovo细胞侵袭的影响被引量：1
- 2012年
- 目的探讨miR-155对人大肠癌细胞侵袭能力的影响。方法大肠癌Lovo细胞分为3组:脂质体介导反义miR-155(AS-miR-155)组、无义寡脱氧核苷酸(ODN)组和对照组。测定荧光素酶活性验证3组细胞中miR-155的表达,采用Matrigel基质生长试验检测细胞生长情况,以Transwe Ⅱ方法检测细胞的侵袭力,结果与对照组和无义ODN组比较,转染AS-miR-155组Lovo细胞miR-2l表达水平降低;Matrigel基质生长试验显示,转染AS-miR-155组Lovo细胞体外培养克隆平均直径较小,Transwe Ⅱ细胞侵袭试验显示转染AS-miR-155组穿膜细胞数较少。结论 miR-2l高表达可促进Lovo大肠癌细胞侵袭生长,提示miR-155可以作为基因治疗大肠癌的候选靶点。
- 毛镇伟朱灵范钰
- 关键词：大肠癌MIR-155
- siRNA沉默S100A4基因表达抑制甲状腺癌细胞侵袭的研究被引量：3
- 2010年
- 目的 探讨S100A4基因对甲状腺癌细胞侵袭的影响和可能机制.方法 采用S100A4基因小干扰RNA（small interfering RNA,siRNA）转染处理人甲状腺癌ARO细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和Western blot检测S100A4基因和基质金属蛋白酶-2mRNA和蛋白水平;分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力.结果 siRNA转染组S100A4基因mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度依赖性（P＜0.000 1）.siRNA转染组软琼脂集落形成数和穿过滤膜的细胞数均明显下降,且呈浓度依赖性（P＜0.005;P＜0.005）.S100A4转染组MMP-2基因mRNA和蛋白水平明显下调.结论 采用S100A4 siRNA转染可抑制甲状腺癌细胞侵袭转移,其机制可能与下调MMP-2表达有关.
- 蒋鹏程范钰周永静
- 关键词：甲状腺肿瘤小干扰RNAS100A4
- 榄香烯乳对大肠癌HCT-116细胞侵袭及miR-155表达的影响被引量：2
- 2012年
- 目的观察榄香烯乳对人大肠癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法采用不同浓度的榄香烯乳处理人大肠癌HCT116细胞后,以划痕试验方法检测癌细胞迁移能力,以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力,采用荧光实时定量PCR方法检测癌细胞miR-155 mRNA水平。结果人大肠癌HCT116细胞经榄香烯乳处理后,迁移和侵袭力均明显下降,且呈剂量依赖性(P<0.05)。榄香烯乳处理组miR-155 mRNA水平明显下调,且呈浓度依赖性。结论榄香烯乳可降低人大肠癌细胞侵袭能力,下调miR-155 mRNA表达是其重要机制之一。
- 毛镇伟满昌峰彭辉勇范钰
- 关键词：大肠肿瘤榄香烯乳侵袭力MIR-155
- RNA干扰下调肿瘤相关钙信号传导蛋白-2基因表达对胃癌细胞黏附、迁移和侵袭的影响被引量：18
- 2010年
- 目的 观察肿瘤相关钙信号传导蛋白-2（TROP-2）基因小干扰RNA（siRNA）对胃癌细胞生物学行为的影响.方法 培养人胃癌MGC-803、HGC-27及BGC-823细胞株,以荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）检测TROP-2基因mRNA表达;筛选出TROP-2表达最高者.采用TROP-2基因小干扰RNA转染胃癌细胞株,分别以荧光实时定量PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因mRNA和蛋白水平,然后以计数法检测细胞黏附,以划痕法观察癌细胞迁移、以Boyden方法检测癌细胞侵袭力.结果 荧光实时定量PCR方法显示,3株胃癌细胞中,TROP-2均有不同程度的表达,以胃癌BGC-823细胞最高;以TROP-2 siRNA转染胃癌BGC-823细胞后,癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白明显下降,且呈浓度依赖性;细胞黏附结果显示,转染组细胞黏附数量明显下降;划痕试验和Boyden试验结果显示,细胞迁移和侵袭力明显下降.结论 TROP-2基囚在胃癌细胞黏附、迁移和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染胃癌细胞,可抑制胃癌细胞黏附、迁移和侵袭能力.
- 詹洪峰周永静张焱范钰
- 关键词：胃癌RNA干扰
- RNAi沉默中期因子基因表达对胃癌细胞黏附和侵袭力的影响被引量：1
- 2010年
- 目的:探讨中期因子(midkine,MK)基因小干扰RNA对胃癌细胞生物学行为的影响。方法:培养人胃癌BGC-823、HGC-27、MGC-803及SGC-7901细胞株,以荧光实时定量PCR方法检测中期因子基因mRNA表达;筛选出中期因子表达最高者。采用中期因子基因小干扰RNA转染胃癌细胞株,分别以荧光实时定量PCR和免疫荧光方法观察中期因子基因mRNA和蛋白水平,然后以四唑蓝(MTT)比色法检测细胞黏附性,以Boyden方法检测癌细胞侵袭力。结果:4株胃癌细胞中,中期因子均有不同程度的表达,以胃癌BGC-823细胞最高;以MK siRNA转染胃癌BGC-823细胞后,癌细胞中期因子基因mRNA和蛋白水平明显下降,且呈浓度依赖性;转染组细胞黏附数量明显下降,细胞侵袭力明显下降。结论:中期因子基因在胃癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用;以siRNA转染胃癌细胞,可抑制胃癌细胞黏附和侵袭能力。
- 祁卫东蒋鹏程张恒马圭范钰
- 关键词：胃癌RNA干扰
- 表没食子儿茶素没食子酸醋对人胃癌细胞迁移、侵袭和cripto蛋白表达的影响
- 2012年
- 目的观察表没食子儿茶素没食子酸醋(EGCG)对人胃癌细胞迁移、侵袭的影响,并探讨其可能机制。方法将人胃癌BGC823细胞分为两组,实验组加入20、40、80μmol/L的EGCG处理,以RPMI1640代替EGCG处理细胞作为空白对照组,采用划痕试验法检测癌细胞迁移能力,以Transwell法检测癌细胞侵袭能力,用免疫荧光方法检测癌细胞cripto基因蛋白水平变化。结果实验组细胞迁移距离、细胞穿过滤膜个数、cripto基因蛋白阳性率明显低于对照组,且均呈剂量依赖性,P均<0.05。结论 EGCG可明显抑制胃癌BGC823细胞迁移和侵袭能力,其机制可能与下调cripto基因表达有关。
- 朱祥祁卫东蒋鹏程马圭范钰
- 关键词：胃肿瘤胃癌
- 结直肠癌组织TROP-2基因mRNA水平及临床意义被引量：1
- 2011年
- 大肠癌（结肠癌和直肠癌）是常见的恶性肿瘤，多数患者确诊时已属晚期，故病死率很高。大肠癌转移的发生机理至今仍不甚清楚，如何从分子生物学的角度来探讨这一机制，是目前研究的重点。
- 祁卫东徐肇敏范钰
- 关键词：直肠癌组织MRNA水平大肠癌转移分子生物学恶性肿瘤
- 肿瘤相关钙信号传导蛋白-2基因对人乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察肿瘤相关钙信号传导蛋白-2（TROP-2）基因小干扰RNA（siRNA）对乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响。方法培养人乳腺癌Bcap-37、LCC1、MCF-7、MDA-MB-231、MDA-MB-435、MDA-MB-468及ZR75—1细胞株，以荧光实时定量聚合酶链反应（PCR）方法检测TROP-2基因mRNA表达；筛选出TROP-2表达最高者。采用TROP-2基因siRNA转染乳腺癌细胞，分别以荧光实时定量RT—PCR和免疫荧光方法观察TROP-2基因mRNA和蛋白水平，然后以噻唑蓝（MTT）比色法检测细胞黏附性，以Transwell方法检测癌细胞侵袭能力。结果人乳腺癌Bcap-37、LCCl、MCF-7、MDA-MB-231、MDA—MB435、MDA—MB468及ZR75-1细胞株TROP-2 mRNA分别是1．362±0．057、2．207±0．056、2．997±0．052、0．136±0．045、0．122±0．025、0．194±0．028和2．706±0．039，以MCF．7细胞最高；以TROP^siRNA转染乳腺癌MCF-7细胞后，癌细胞TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下降，且呈浓度依赖性；黏附实验结果显示，5、10、20nmol/L siRNA组黏附率分别为（52．9±2．5）％、（25．6±2．3）％、（12．8±2．2）％（P〈0．01）；Transwell实验结果显示，5、10和20nmoFLsiRNA组穿过滤膜的细胞分别为78±17、39±15、19±16，而对照组分别为136±25、139±21（P〈0．01）。结论TROP-2基因在乳腺癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用；以siRNA转染乳腺癌细胞，可抑制乳腺癌细胞黏附和侵袭能力。
- 俞力詹洪峰龚丹丹邱志远周永静肖秀娣武正炎范钰
- 关键词：乳腺癌RNA干扰
- 特异性siRNA下调Cr-1基因表达对人结直肠癌细胞侵袭的影响
- 2012年
- 目的探讨RNA干扰(RNA interference,RNAi)沉默Cr-1(Cr-1)基因对人结直肠癌细胞侵袭的影响。方法应用Cr-1基因小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)转染处理结直肠癌SW480细胞后,分别采用荧光实时定量RT-PCR和蛋白质印迹检测Cr-1基因mRNA和蛋白水平,分别采用软琼脂集落培养试验和Boyden小室模型试验检测癌细胞的锚着不依赖性增殖和侵袭能力。结果 siRNA转染组Cr-1mRNA和蛋白水平明显下调,且呈浓度和时间依赖性(P<0.05)。体外试验发现,Cr-1siRNA可有效抑制结直肠癌细胞集落生长和侵袭能力,且与浓度相关(P<0.05)。结论 Cr-1在结直肠癌细胞侵袭中起着重要的作用,采用Cr-1siRNA转染可抑制结直肠癌细胞侵袭。
- 朱祥马圭祁卫东蒋鹏程范钰
- 关键词：结直肠肿瘤RNA干扰小干扰RNA
