国家自然科学基金(30570696)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
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- 癌基因TRE17与肌钙蛋白C2相互作用的鉴定被引量：5
- 2005年
- 目的:寻找癌基因TRE17的结合蛋白。方法:分别构建了TRE17/PGBKT7和TRE17(447)／PGBKT7诱饵质粒,用酵母双杂交技术筛选了人骨骼肌CDNA表达文库,并用GST-PULLDOWN分析进一步观察了癌基因TRE17与其结合蛋白之间的作用。结果:酵母双杂交分析提示,癌基因TRE17可能结合6种靶蛋白,包括PUR ALPHA、肌球蛋白轻链2、乳酸脱氢酶A和肌钙蛋白C2等,其中,仅肌钙蛋白C2能够既结合全长的癌基因TRE17,又结合仅编码TRE17 氨基端447个氨基酸的TRE17(447)。GST-PULLDOWN分析表明FRE17(447)明显结合肌钙蛋白C2,而不是阴性对照 GST。结论:肌钙蛋白C2能特异性结合癌基因TRE17,为进一步研究TRE17的恶性转化机制提供了新的线索。
- 沈传陆
- 关键词：癌基因肌钙蛋白蛋白相互作用酵母双杂交
- 细胞骨架蛋白肌球蛋白轻链与癌蛋白TRE17相互作用的鉴定被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨MLC2与TRE17之间的相互作用。方法:构建了MLC2原核表达质粒,在用pGEX蛋白表达系统表达和纯化GST-MLC2和GST蛋白后,用GST Pulldwon方法进一步观察MLC2与TRE17之间的相互作用。结果:限制性内切酶分析和DNA序列测定表明MLC2 cDNA完整ORF以正确的阅读框架插入pGEX-6P-1载体;IPTG诱导表达的GST-MLC2和GST蛋白纯度在90%以上;GST Pulldown分析表明癌蛋白TRE17(447)结合GST-MLC2融合蛋白,而不是对照GST蛋白。结论:MLC2是TRE17的特异性结合蛋白。
- 杨永刚田田郭丹武慧娟王露徐宁沈传陆
- 关键词：癌基因肌球蛋白轻链蛋白质相互作用
