王宝恩肝纤维化研究基金(20120131)
- 作品数：4 被引量：5H指数：1
- 相关作者：丛敏张群庞国进尤红王萍更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京友谊医院更多>>
- 发文基金：王宝恩肝纤维化研究基金国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 两种不同病毒载体携带靶向大鼠金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1小干扰RNA抗肝纤维化作用的比较
- 2013年
- 目的观察以腺相关病毒(AAV)及慢病毒(Lentivirus)为载体含有针对大鼠金属蛋白酶组织抑制因子(TIMP)-1具有较强抑制作用的小干扰RNA(siRNA)对四氯化碳(CCl4)诱导的大鼠肝纤维化模型的干预作用。方法挑选针对大鼠TIMP-1基因具有较强抑制作用的siRNA序列,在体外构建为短发夹表达载体后,将其包装为重组AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1,同时包装对照病毒AAV/EGFP和Lenti/EGFP。将Wistar大鼠分为对照组、CCl4模型组、AAV/EGFP组、Lenti/EGFP组、AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1组,观察CCl4造模4周后,经H&E及Masson染色评价各组动物的肝纤维化状况,经荧光定量RCR及Western blot方法检测TIMP-1的表达抑制情况。结果 H&E及Masson染色证实,与对照组相比,CCl4模型组、AAV/EGFP组、Lenti/EGFP组肝脏胶原纤维明显增加,纤维化评分多为3-4级,同时肝脏TIMP-1的转录与蛋白表达水平均明显上升;而AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1组肝纤维化程度明显减轻,纤维化评分多为2-3级,伴随肝脏TIMP-1的转录与蛋白表达水平均显著抑制。AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1组在组织学表现及TIMP-1基因的转录与表达水平上无统计学差异。结论 AAV/siRNA-TIMP-1和Lenti/siRNA-TIMP-1均可有效抑制大鼠肝脏TIMP-1基因表达,进而发挥抗肝纤维化作用。
- 马雪梅张群庞国进丛敏
- 关键词：腺相关病毒小干扰RNA金属蛋白酶组织抑制因子-1
- 慢性乙肝患者CD4^+ CD25^+ T细胞对外周血树突状细胞成熟的作用被引量：3
- 2014年
- 目的探讨慢性乙型肝炎(CHB)患者CD4+CD25+Treg细胞对外周血树突状细胞成熟的影响。方法对2013年6月至2013年12月就诊的15例CHB患者和18例健康对照各抽取外周血20 ml,分离外周血单个核细胞(PBMC),于体外培养获得树突状细胞(DC)及免疫磁珠分选获得CD4+CD25+Treg细胞;分别将CD4+CD25+Treg细胞和CD4+CD25-T细胞与DC共培养后采用流式细胞仪检测DC表面标志CD83、CD80、CD86、HLA-DR的表达。结果健康对照组,加入Treg后,相比于DC对照组及DC与CD4+CD25-T细胞共培养组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异有统计学意义。CHB患者组,加入Treg后,相比于DC对照组,DC的CD83、CD80、CD86表达下降,差异均有统计学意义;与DC和CD4+CD25-T细胞共培养组相比,Treg对DC的CD83、CD80表达抑制率较高,差异有统计学意义。CHB患者组的Treg对DC的CD83、CD80、CD86表达抑制率均高于健康对照组,差异均有统计学意义。结论 CHB患者外周血Treg细胞能够抑制DC的成熟,抑制效应强于健康对照。
- 张群庞国进谌双君刘天会王萍尤红丛敏
- 关键词：调节性T细胞树突状细胞
- 小RNA转染人外周血原代T淋巴细胞的转染试剂筛选被引量：1
- 2014年
- 目的探讨人工合成RNA转染人外周血原代T淋巴细胞的有效方法。方法从人外周血分离原代T淋巴细胞,采用Lipofectamine2000、Lipofectamine RNAiMAX、FuGENE6、Hiperfect和EntransterTM-R 5种不同转染试剂介导荧光标记的RNA转染原代T淋巴细胞,通过荧光显微镜观察及流式细胞术检测进行转染效率评价。结果分离的人外周血原代T淋巴细胞的纯度达到87.4%。采用上述5种转染试剂介导荧光标记的RNA转染T淋巴细胞,24 h后转染效率分别为(14.81±1.03)%、(14.33±1.24)%、(2.10±0.16)%、(1.69±0.08)%、(72.24±1.26)%。采用EntransterTM-R转染100及50 nmol/L对照RNA,24 h后转染效率分别为73.7%和56.0%;EntransterTM-R转染100 nmol/L对照RNA后48、72 h荧光标记细胞阳性率分别为62.0%、56.6%。结论转染试剂EntransterTM-R可有效介导人工合成RNA转染人外周血原代T淋巴细胞。
- 张群庞国进刘天会王萍马雪梅尤红丛敏
- 关键词：RNA干扰转染T淋巴细胞
- 调节性T细胞与乙型肝炎慢性化被引量：1
- 2013年
- 乙型肝炎病毒（HBV）感染是威胁人类健康的一个全球性问题。据世界卫生组织报道,全球约20亿人曾感染过HBV,其中3.5～4亿人为慢性HBV感染者。作为全世界感染HBV人数最多的国家,中国HBV携带者虽然已由9.75%降至7.18%,但仍有9 300万慢性HBV携带者,其中约有2 000～3 000万人为慢性乙肝患者。目前,中国每年约有50多万人死于慢性乙型肝炎导致的肝脏损害和肝癌[1]。
- 张群庞国进丛敏
- 关键词：乙型肝炎病毒调节性T细胞慢性HBV感染者慢性HBV携带者慢性化慢性乙肝患者
