国家自然科学基金(30871100)
- 作品数：12 被引量：48H指数：5
- 相关作者：王健民杨建民章卫平宋献民宋宁霞更多>>
- 相关机构：第二军医大学上海交通大学医学院附属瑞金医院中国人民解放军92474部队医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金上海市科学技术委员会基础研究重点项目卫生部卫生公益性行业科研专项更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 携带可诱导共刺激分子基因的重组腺病毒载体构建及其在小鼠间充质干细胞中的表达被引量：4
- 2012年
- 目的阻断可诱导共刺激途径协同骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)可能能增强急性移植物抗宿主病(acute graft versus host disease,aGVHD)的防治作用。文中旨在构建携带小鼠可诱导共刺激分子(inducible costimula-tor,ICOS)基因的重组腺病毒载体,转染小鼠骨髓MSCs,为转基因治疗提供实验基础。方法设计含有EcoRⅠ、SalⅠ酶切位点的引物,PCR扩增ICOS,将扩增产物克隆到穿梭质粒PDC318上,筛选阳性克隆,测序鉴定正确,将其与含有5型腺病毒右臂的质粒pPE3-F11B-EGFP在293细胞中同源重组,筛选获得含有ICOS基因的重组腺病毒质粒,行PCR鉴定。重组腺病毒质粒转染293细胞,扩增后用氯化铯密度梯度离心纯化病毒,用50%组织培养感染剂量法测定病毒滴度,并转染小鼠MSCs。结果重组腺病毒质粒经鉴定,证实含有ICOS基因,病毒滴度为6.54×109pfu/ml。转染小鼠MSCs,荧光显微镜下可见较多绿色荧光蛋白表达,流式细胞仪检测ICOS表达率为90.16%。结论成功构建了携带小鼠ICOS基因的重组腺病毒载体,并获得高滴度的病毒,能高效转染小鼠MSCs,为后续研究奠定了基础。
- 王利平包晓辰魏玮陈洁邵宇王健民钱其军
- 关键词：腺病毒载体可诱导共刺激分子间充质干细胞基因治疗
- EBMT积分在异基因造血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病中的预后价值被引量：6
- 2011年
- 目的分析慢性粒细胞白血病（CML）异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）治疗的危险因素，以利于更好地规避移植风险。方法回顾性研究分析121例接受allo—HSCT的CML患者。预后评估参照EBMT积分，即Gratwoh]积分，危险因素包括供者来源、患者年龄、患者移植前疾病状态、供患者性别差异、疾病确诊至移植时间。将患者分为3组：低危组（0～2分）、中危组（3～4分）和高危组（5分）。结果所有患者allo—HSCT后中位随访时间为37（1～126）个月，预期5年总生存（OS）率、无复发死亡（NRM）率及复发（RR）率分别为（56．8±5．0）％、（35．6±4．9）％和（12．9±3．7）％。其中低危组患者分别为（66．0±6．1）％、（28．8±6．0）％和（7．84-3．3）％，明显优于中危组[（47．2±8．7）％、（43．6±8．5）％和（18．7±8．1）％]和高危组[（16．8±15．2）％、（66．7±25．5）％和（50．0±25．0）％]，差异具有统计学意义（P值分别为0．0015、0．045和0．0053）。结论EBMT危险因素积分系统能全面反映预测allo—HSCT治疗CML的疗效、复发率和移植相关死亡率。
- 胡炯章卫平杨丹唐暐宋献民王玲赵维莅吴文王健民
- 关键词：造血干细胞移植预后
- 加强非血缘异基因造血干细胞移植的临床研究
- 2012年
- 异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）是治疗多种血液系统疾病和遗传性疾病的有效手段。HLA相合的血缘供者（MSD）仍是迄今最佳的移植供者，但HLA相容性屏障使其选择受到较大限制，在欧美国家也仅有30％左右的患者能找到HLA相合的血缘供者。我国自20世纪70年代未以来，
- 王健民
- 关键词：异基因造血干细胞移植非血缘HLA相合血液系统疾病遗传性疾病
- ICOS-Ig融合蛋白阻断ICOS信号通路可抑制异基因反应性T淋巴细胞的功能被引量：3
- 2009年
- 本研究探讨ICOS-Ig融合蛋白阻断ICOS-B7h信号通路对异基因反应性T淋巴细胞的作用和机制。建立稳定高表达ICOS-Ig的CHO细胞株,培养制备纯化的ICOS-Ig融合蛋白;以C57BL/6小鼠脾脏来源的CD4+淋巴细胞为反应细胞,BABL/C骨髓源成熟树突状细胞为刺激细胞,应用不同浓度梯度的ICOS-Ig干预,以相同浓度的人Ig作为对照。结果显示:获得的目标蛋白的分子量为54kD,内毒素含量<10EU/ml。ICOS-Ig在≥10μg/ml时可显著减少DC刺激引起的异基因反应性T淋巴细胞的增殖效应(p<0.01)。ICOS-Ig不影响T淋巴细胞的活化,ICOS-Ig浓度与CD4+ T淋巴细胞的凋亡成正相关。单纯刺激组、ICOS-Ig10μg/ml和20μg/ml干预组的CD4+Annexin V+PI-细胞群的频率分别为15.1%、26.4%和33.6%。ICOS-Ig作用后,Th1细胞因子TNFα分泌降低,Th2细胞因子IL-4分泌增加。结论:ICOS-Ig融合蛋白阻断ICOS通路可明显减弱异基因反应性T淋巴细胞的增殖反应,并改变Th细胞的极化,对CD4+ T淋巴细胞的活化无影响,但可促进活化的T淋巴细胞凋亡。
- 包晓辰王健民沈茜周虹杨建民宋宁霞王斌
- 关键词：T淋巴细胞
- 造血干细胞移植治疗珠蛋白生成障碍性贫血被引量：1
- 2010年
- 珠蛋白生成障碍性贫血（thalassemia）原称海洋性贫血或地中海贫血，是我国最常见的遗传性溶血性血红蛋白（Hb）病，是由于调控珠蛋白合成的基因发生突变、缺失等引起相应珠蛋白合成异常，最终导致构成Hb的α和β链比例失衡、红细胞寿命缩短的一种溶血性贫血。本文就目前应用造血干细胞移植（hematopoietiestemcelltransplantation，HSCT）治疗珠蛋白生成障碍性贫血的主要认识和进展作一论述。
- 王健民杨丹
- 关键词：珠蛋白生成障碍性贫血造血干细胞移植预处理
- 造血干细胞移植预处理研究现状被引量：5
- 2010年
- 造血干细胞（HSC）移植（HSCT）是治疗血液系统恶性疾病的有效治疗方法。而移植前的预处理是HSCT过程中的重要环节。一方面，通过预处理可清除体内的恶性肿瘤细胞，为正常HSC的植入提供足够的生长空间；另一方面，预处理可抑制受者的免疫系统，使之无力排斥移植物而使移植成功。
- 王健民吴涛
- 关键词：造血干细胞移植预处理
- 间充质干细胞与造血干细胞移植相关研究的进展被引量：11
- 2010年
- 骨髓中主要存在2种主要类型的干细胞：造血干细胞（hematopoietic stem cells，HSC）及非HSC或间充质干细胞（mesenchymal stem cells，MSC）。HSC移植可重建患者造血系统和免疫系统，因此，临床上HSC移植用于治疗各种恶性血液病、遗传性血液病、再生障碍性贫血及免疫缺陷病等。MSC是一种具有高度自我更新能力和多向分化潜能的成体干细胞，由于其取材方便、体外能大量扩增，
- 王健民宋宁霞
- 关键词：造血干细胞移植移植物抗宿主病间充质干细胞
- 减低剂量预处理方案对血缘与非血缘关系外周血干细胞移植治疗慢性粒细胞白血病疗效的影响被引量：6
- 2010年
- 目的观察和比较血缘与非血缘关系异基因外周血干细胞移植（allo—PBSCT）采用氟达拉滨（Flud）联合白消安（BU）组成的FB减低剂量预处理方案治疗慢性粒细胞白血病（CML）的疗效和移植相关并发症。方法采用FB（Flud30mg·m^2·d^-1×5d；Bu4mg·m^2·d^-1×3d）方案allo—PBSCT治疗CML共44例，接受血缘关系移植29例（血缘组），接受非血缘关系移植15例（非血缘组）。急性移植物抗宿主病（aGVHD）预防：血缘组为霉酚酸酯（MMF）＋环孢素（CsA）＋甲氨蝶呤（MTX），非血缘组在上述基础上另加兔抗人胸腺细胞球蛋白（ATG，5mg／kg×4d）。结果所有患者移植后均取得造血功能重建，血缘组与非血缘组中性粒细胞〉0．5×10^9／L的中位时间分别为13．7（9～18）d和13．6（12～17）d，血小板〉20×10^9／L的中位时间分别为15．3（9～20）d和14．7（10～26）d。但血缘组与非血缘组分别有2例与1例患者移植后5～8个月发生继发性植入排斥，其中血缘组1例再次行同一供体移植，重获造血功能重建。血缘组累计发生aGVHD共4例（13．8％），均为Ⅱ度；存活6个月以上28例患者中发生慢性GVHD（cGVHD）13例（46．4％），其中局限型和广泛型分别为10例和3例。非血缘组累计发生aGVHD共5例（33．3％），其中I～Ⅱ度4例，Ⅲ度1例；存活6个月以上14例患者中发生cGVHD8例（57．1％），其中局限型和广泛型分别为5例和3例。血缘组有2例患者移植后复发，给予冻存G—CSF动员的供者外周血干细胞输注（DSI）1～2次后再获得CR。本组中位随访时间34．7（2～73）个月，累计移植相关死亡10例（22。7％），主要死因是间质性肺炎、GVHD及继发排斥伴重症感染；34例患者存活，预期5年总生存率（OS）和无病生存率（DFS）分别为77．0％和73．9％；其中，血缘关系移植5年OS和DFS分别为79．O％和74．1％，非血缘关系移�
- 王健民章卫平宋献民冯曹波杨建民陈莉侯军周虹倪雄高磊邱慧颖李红梅丁晓勤
- 急性白血病患者白血病细胞B7-H2的表达与预后关系的初步研究被引量：3
- 2010年
- 目的研究急性白血病患者白血病细胞B7-H2的表达与预后的关系。方法收集47例初发的急性白血病[包括急性髓细胞白血病(AML)和急性淋巴细胞白血病(ALL)患者],应用流式细胞技术检测其白血病细胞上B7-H2的表达情况,分析所有白血病患者、AML患者及ALL患者预后因素与B7-H2表达的关系。另将47例患者分为B7-H2阳性率≥10%和B7-H2阳性率<10%两组,比较两组患者生存时间的差异。结果 47例急性白血病患者中,低危患者白血病细胞的B7-H2阳性率为0.04%±0.03%(n=24),中/高危患者为0.15%±0.07%(n=23,P=0.0015);在AML患者中,低危患者和中/高危患者白血病细胞B7-H2的阳性率为分别为0.05%±0.03%(n=16)和0.16%±0.09%(n=12,P=0.0412);在ALL患者中,低危患者和中/高危患者白血病细胞B7-H2的阳性率为分别为0.04%±0.03%(n=8)和0.15%±0.08%(n=11,P=0.0295)。47例白血病患者中,B7-H2阳性率≥10%的患者占25.53%,其中AML和ALL患者分别占21.42%(n=28)和31.57%(n=19);B7-H2阳性率≥10%的患者与B7-H2阳性率<10%的患者生存率有统计学差异(2χ=2.79,P=0.0453)。结论 B7-H2在急性白血病患者白血病细胞上有一定表达,并与预后密切相关。
- 王斌程辉张薇薇杨建民王健民
- 关键词：白血病急性白血病急性CD80预后
- 异基因造血干细胞移植后早期特发性肺炎综合征的相关危险因素分析
- 2011年
- 大剂量化疗后行异基因造血干细胞移植（allo—HSCT）已成为治疗血液系统恶性肿瘤的有效手段。40％～60％的患者在allo—HSCT后出现怖部并发症，其中10％-40％的患者因肺部并发症而死亡，成为影响移植预后的一个重要因素。
- 李莉莉王健民章卫平宋献民杨建民陈莉吕书晴
- 关键词：异基因造血干细胞移植移植后血液系统恶性肿瘤肺部并发症HSCT
