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国家自然科学基金(30972632)

作品数：1 被引量：1H指数：1
相关作者：高彩霞周鹏林子玉王锦红冯娇娇更多>>
相关机构：安徽医科大学第二军医大学安庆医药高等专科学校更多>>
发文基金：上海市科学技术委员会科研基金国家自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇噬菌体文库
  • 1篇体外进化
  • 1篇突变体
  • 1篇AC
  • 1篇SPA

机构

  • 1篇安徽医科大学
  • 1篇第二军医大学
  • 1篇安庆医药高等...

作者

  • 1篇邓松华
  • 1篇丁莹莹
  • 1篇潘卫
  • 1篇冯娇娇
  • 1篇王锦红
  • 1篇林子玉
  • 1篇周鹏
  • 1篇高彩霞

传媒

  • 1篇安徽医科大学...

年份

  • 1篇2015
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
SPA单结构域突变体组合噬菌体文库的构建及体外进化筛选被引量：1
2015年
目的使用人免疫球蛋白G(IgG)对金黄色葡萄球菌蛋白A(SPA)单结构域突变体组合文库进行体外分子进化筛选,判断不同突变体组合的特异结合优势,探索优势组合分子结构与功能间的关系。方法通过Overlap PCR获得SPA中A和C单结构域突变体片段组合构成的噬菌体文库,再使用人IgG对文库进行体外亲和筛选,期望通过对特定结合分子的定向改造及体外进化获得具有高结合优势的组合分子。结果成功构建符合体外筛选要求的SPA单结构域A在29、30位氨基酸定点突变文库(A1)、SPA单结构域C在36、37位定点突变文库(C1)和SPA单结构域A在37位后插入3个氨基酸随机肽(AI37)、SPA单结构域C在20位后插入3个随机连接肽(CI20),将A1、C1随机组合构建的噬菌体展示文库命名为库A1C1,将AI37、CI20随机组合构建的噬菌体展示文库命名为库AI37CI20。两个文库各自经过4、5轮亲和筛选,文库进化完全。Phage-ELISA高光密度值的单克隆,测序结果分析为A(Q29K30)A(I29I30)和AI-TQSA。结论通过定向改造技术获得了高结合能力的定点突变分子A(Q29K30)A(I29I30)和插入突变分子AI37-TQSA,为Ig结合分子的定向改造及具有新的Ig结合特性的重组Ig结合分子的进一步研究奠定了基础。
林子玉丁莹莹周鹏高彩霞冯娇娇王锦红潘卫邓松华
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