四川省教育厅自然科学科研项目(2005A030)
- 作品数:4 被引量:66H指数:3
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- 相关领域:轻工技术与工程化学工程生物学农业科学更多>>
- 产纤维素酶枯草芽孢杆菌C-36的产酶条件研究被引量:45
- 2006年
- 以产纤维素酶的枯草芽孢杆菌菌株C-36为研究对象,从碳源、氮源、接种量、培养基初始pH、温度等方面研究该菌株的产酶条件,结果表明该菌产酶的最适碳源为2%的CMC-Na,最适氮源为2.5%的蛋白胨+酵母粉复合氮源,最佳接种量为4%,最适起始pH为5.0,产酶最适温度为37℃。在此条件下,培养36 h后达到产酶高峰,CMC酶活为196.33 U/mL,是优化前的3倍。
- 韩学易陈惠吴琦梁如玉高凤菊胥兵
- 关键词:纤维素酶枯草芽孢杆菌产酶条件
- 纤维素酶基因工程菌pHBM-End培养条件的研究
- 2008年
- 对基因工程菌pHBM-End培养条件优化的研究结果表明:250mL三角瓶中装入50mLLB培养基(含有10μg/mLTet),按5%的接种量接种种龄为12h的液体种子,培养4h后加入终浓度为0.2%的木糖进行诱导,9h后上清液中酶活可达889U/mL,是出发菌株C-36(79.2U/mL)的11.22倍。
- 韩学易陈惠胥兵阮景军
- 关键词:巨大芽孢杆菌内切葡聚糖酶
- 枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶的纯化及酶学性质被引量:16
- 2006年
- 枯草芽孢杆菌C-36纤维素酶经硫酸铵、SephadexG-75、SephadexG-100分离纯化后,得到一个电泳纯的葡聚糖内切酶。SDS-PAGE结果表明,该酶分子量约为35kD。最适反应温度和pH分别为65℃和pH6.8,Zn2+、Pb2+、Fe3+对酶有抑制作用,Ba2+、Fe2+对酶有激活作用,在50℃,pH6.8条件下,酶对CMC-Na的米氏常数Km为0.34g/L,最大反应速度Vmax为0.17mg/(min.mL)。
- 胥兵陈惠韩学易官兴颖吴琦
- 关键词:枯草芽孢杆菌纤维素酶纯化
- 枯草芽孢杆菌C-36内切葡聚糖酶基因的克隆及其在大肠杆菌中融合表达被引量:11
- 2009年
- 以自行分离筛选出的天然枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)C-36的染色体DNA为模板,PCR扩增得到含有内切葡聚糖酶基因的DNA片段,将其克隆到pMD-18T载体中,序列分析表明,克隆得到的DNA片段全长1602bp,编码一个含有499个氨基酸的多肽。与其他芽孢杆菌内切葡聚糖酶基因序列比对,其核苷酸同源率为90%~93%,其编码的氨基酸序列的同源性在90%~98%,已将此基因注册GenBank(DQ782954)。将含内切葡聚糖酶基因的重组克隆质粒进行亚克隆,用Kpn I和EcoR I双酶切后,与相同酶切的表达载体pET-32a相连接,并导入大肠杆菌BL21中表达。蛋白质电泳实验结果表明在6.47×10^4处有表达蛋白带。经测定表达蛋白比酶活力达99.02U/mL,为出发菌C-36(63.78U/mL)的1.55倍。
- 官兴颖吴振芳吴琦胥兵陈惠
- 关键词:枯草芽孢杆菌克隆内切葡聚糖酶基因