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药用植物次生代谢相关酶基因克隆方法综述被引量：5: 2009年; 目的综述药用植物次生代谢酶基因克隆可采用的方法策略,为其基因克隆提供参考。方法查阅相关文献进行总结和归纳。结果阐述了用于克隆药用植物次生代谢酶基因的功能克隆方法、表型克隆方法(DD-PCR、cDNA–AFLP、SSH)、转座子标签克隆方法及图位克隆方法。结论适用于药用植物次生代谢相关酶基因克隆的技术方法有很多种,研究者可根据研究基础、目的和实验条件等进行选择。; 战晴晴隋春张杰魏建和; 关键词：药用植物次生代谢基因克隆

磁珠富集法开发北柴胡多态性简单序列重复标记被引量：5: 2010年; 目的:利用磁珠富集法分离北柴胡微卫星序列,以开发北柴胡微卫星引物,获得有多态性的简单序列重复(SSR)标记。方法:用生物素标记的混合探针(AC)15、(AG)15、(MAB)12和两端连接已知序列人工接头的北柴胡基因组DNA酶切片段混和后与磁珠杂交,构建微卫星序列富集的小片段插入文库;利用接头引物分别与生物素探针引物Biotin-(AC)15、Biotin-(AG)15、Biontin-(MAB)12形成3个组合,用PCR方法对文库进行初步筛选;对可能的阳性克隆子进行测序复筛,选取微卫星侧翼序列足够长的序列设计引物,用荧光标记的基因分型技术以栽培柴胡种质为材料分析其多态性。结果:开发了5对多态性SSR标记,它们在5份柴胡栽培种质中共扩增出30.70个多态性等位基因,平均每条引物可以扩增出6.14个多态性等位基因;观察等位基因数最多13个,最少3个;有效等位基因数最多11.4个,最少1.6个。同时分析了4对EST-SSR引物,比较了2种SSR标记扩增结果。结论:磁珠富集法是开发柴胡多态性SSR标记的有效方法。; 陈怀琼郑亭亭魏建和隋春; 关键词：柴胡简单序列重复磁珠富集法基因分型

利用ISSR和SSR分子标记构建北柴胡遗传图谱被引量：42: 2010年; 以北柴胡(Bupleurum chinense DC.)种内杂交所得的F1代96株植株为作图群体,利用拟测交理论,进行北柴胡遗传图谱构建。经父母本多态性筛选,从30条ISSR(inter-simple sequence repeat,内部简单重复序列)和44对SSR(simple sequence repeat,简单重复序列)引物中筛选出28条ISSR和14对SSR多态性引物。对F1代进行基因型和连锁分析,初步构建了包含13个连锁群、80个(72个ISSR和8个SSR)位点的首张北柴胡遗传图谱。该图谱覆盖长度2633.9cM,平均图距33.4cM,13个连锁群包含2～31个标记不等,连锁群遗传距离15.4～1295.7cM。该图谱为北柴胡性状基因定位、图位克隆以及分子标记辅助选择育种等研究奠定了基础。; 战晴晴隋春魏建和范圣此张杰; 关键词：北柴胡 ISSR SSR

北柴胡二代新品种“中柴2号”和“中柴3号”的选育研究被引量：36: 2010年; 目的:选育整齐度高、商品性好、皂苷含量高的北柴胡二代新品种。方法:从北柴胡一代品种"中柴1号"群体中筛选优良种质,单株选择法,选育优良品种。以形态性状、农艺性状和品质性状为指标,考察历代选育材料,开展品系比较试验和区域试验。结果:选育的北柴胡新品种"中柴2号"和"中柴3号"的整齐度显著提高,深色根比率分别达83.2%,89.9%,柴胡皂苷含量分别达到1.3%,1.0%。结论:选育的"中柴2号"和"中柴3号"具有整齐度高、根色深、有效成分含量高等优点,达到了选育目的。; 郑亭亭隋春魏建和金钺褚庆龙杨成民; 关键词：北柴胡农艺性状品质性状

植物SSR引物开发策略简述被引量：45: 2009年; SSR是一种优秀的分子遗传标记,已经广泛应用到遗传多样性检测、遗传种质鉴定、遗传连锁图谱构建、基因定位与标记辅助育种等多个领域。但SSR标记应用的前提是根据物种已知DNA序列设计特异引物,才能进行PCR扩增。对于大多数物种而言,目前获得的基因组DNA及表达的cDNA序列还非常有限或者根本没有。由此人们不断的设计出各种方法以开发出尽可能多的SSR引物,本文简要地介绍了基于序列数据设计和发展SSR引物的方法,这对于全基因组序列已经测序的或者已经拥有丰富DNA数据的物种是非常快捷的策略。对于那些遗传背景复杂或知之甚少或基因组数据有限的物种,本文也系统的介绍了传统的文库法、富集法等开发SSR引物的策略。进一步的本文结合本实验室的研究经验,对FIASCO磁珠富集法和ISSR-抑制PCR法进行了比较。; 陈怀琼隋春魏建和; 关键词：SSR

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中国博士后科学基金(20070410615)