目的建立高效的荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization,FISH)前人精子核去凝集方法和监测手段。方法精子标本经10mmol/L二硫代苏糖醇(dithiothreitol,DTT)处理,使人精子核去凝集,倒置相差显微镜监测精子核膨胀度。标本固定后制片,变性后行FISH分析。结果倒置相差显微镜下,人精子核膨大程度清晰可见,膨大精子细胞边缘清楚并完整。荧光显微镜下,可见精子头部染成蓝色,边缘清楚,背景清晰,精子杂交信号清晰,非特异性杂交少。结论本方法具有简便、高效的特点,精子核解聚程度可控性和可见性强,杂交后荧光信号强、易分辨和非特异性性杂交率低,可用于人精子核FISH前处理。
