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ABCG2基因单核苷酸多态性与闽南地区人群原发性痛风相关性研究被引量：12: 2013年; 目的:研究三磷酸腺苷结合转运蛋白G超家族成员2基因(ABCG2)第5外显子单核苷酸多态性C421A位点与中国闽南地区人群原发性痛风发病的相关性,为闽南地区人群痛风的早期诊断筛选合适的遗传标记。方法:采用改进的三引物法对154例痛风患者和160例健康志愿者的外周血样本进行扩增检测,利用统计学分析SNP位点(rs2231142)的基因型携带频率、相对危险度及与闽南地区人群痛风发病相关性。结果:痛风患者AA型携带频率为18.80%,而正常人群中为8.12%,痛风患者的AA基因型和A等位基因携带频率明显高于正常人群。P<0.01;痛风患者AA型携带频率为43.52%,而正常人群中为23.44%,P<0.01。rs2231142位点多态性与痛风发病显著相关(F值为31.97,P<0.01),AA型携带者与CC基因型相比,发病风险提高了4.397倍,经校正后为4.371倍;A/C杂合型携带者发病风险提高了3.250倍,校正后为2.879倍;A等位携带者发病风险与C等位基因相比提高了2.516倍。另外rs2231142位点的多态性对收缩压、舒张压以及血尿酸、尿尿酸、C–反应蛋白、甘油三脂、尿素氮、肾结石等生化指标检测值有显著影响。结论:ABCG2基因上单核苷酸多态性位点rs2231142与闽南地区人群痛风发病有很大相关性,可以作为闽南地区人群痛风早期诊断的一个遗传标记。; 杨会勇许超尘王清瑶游玉权饶华春郑晨娜刁勇; 关键词：痛风单核苷酸多态性

Tm值差异型不对称PCR方法的建立及其在分子诊断中的应用: 2016年; 多数分子诊断方法对靶基因的检测都是以单链DNA为基础的,如何获得大量和高质量的单链靶DNA分子一直是研究热点.以包含BRCA1基因上3个单核苷酸多态性(SNP)的DNA片段为研究对象,通过调整不对称扩增引物碱基序列组成(5′-端引入错配或加入锁核苷酸(locked nucleic acid,LNA)),使用相差10倍浓度来增加不对称引物间Tm值差异,改进扩增条件(添加增强剂的扩增缓冲液,不同退火温度的二阶循环扩增程序)后,进行不对称扩增来产生大量单链靶DNA产物.结果表明Tm差异型不对称PCR(Tm difference asymmetric PCR,TDA-PCR)可有效提高单链DNA分子产率,降低引物设计难度,也扩大了模板序列的适用范围.此外,还针对禽流感病毒H5N1的血凝素(haemagglutinin)HA基因保守序列进行不对称扩增,用获得的单链DNA为模板进行焦磷酸测序检测,所得结果与参考序列一致且无明显干扰信号.因此,采用Tm值差异型不对称PCR可使焦磷酸测序等分子诊断流程更为简便,成本更低,效率更高,具有很好的通用性和实用性.; 饶华春滕继云刁勇宋沁馨王立强杨会勇周国华; 关键词：焦磷酸测序禽流感病毒

重组腺相关病毒质量控制的qPCR技术研究进展被引量：4: 2014年; 综述实时荧光定量PCR(qPCR)技术在重组腺相关病毒(rAAV)的基因组滴度测定中的应用成果,以及qPCR技术在rAAV质量控制过程中的应用,如感染滴度及rcAAV污染率的测定等.分析qPCR技术存在的适用范围窄、易产生系统性误差和易受rAAV杂质干扰等问题的原因,并探讨相关的解决策略.; 肖桂清杨会勇刁勇; 关键词：重组腺相关病毒实时荧光定量PCR 基因治疗

抗生素开发的新靶点:核糖开关被引量：2: 2013年; 核糖开关是位于mRNA区域的特定片段,被小分子配体激活后即可顺式调控基因表达,无需蛋白参与。经进化选择,大部分细菌内核糖开关采用必需代谢产物为配体,负责调控与配体生物合成或转运相关基因的表达。代谢产物类似物可以抑制核糖开关介导的基因表达,抑制细菌生长,甚至引起细菌死亡,因此核糖开关可以作为抗生素开发的新靶点。已经发现的几种先导化合物显示了以核糖开关为靶点的开发潜力。本文简要阐述了可以作为抗生素靶点的核糖开关及其作用机制,介绍了以核糖开关为靶点的新型抗生素高通量筛选及药物设计方法,并对可能遇到的困难进行了分析。; 贾东方林俊生刁勇; 关键词：核糖开关耐药性抗生素

治疗用质粒DNACTAB纯化工艺的优化被引量：2: 2013年; 目的优化治疗用质粒DNA十六烷基三甲基溴化铵(cetyltrimethylammonium bromide,CTAB)纯化工艺,为其规模化生产奠定基础。方法采用碱裂解法裂解含质粒pEGFP的大肠埃希菌(E.coli)DH5α菌种,在碱裂解液中加入不同终浓度的CTAB及不同终浓度的NaCl、KAc、LiCl、CaCl2、MgCl2溶液,确定CTAB纯化质粒DNA的最佳浓度,并分析盐对质粒DNA选择性释放的影响。分别采用BCA蛋白浓度测定试剂盒、内毒素检测试剂盒和Real time-PCR法检测纯化的质粒DNA中宿主蛋白含量、内毒素含量和细菌基因组DNA含量;通过A549细胞及动物转染试验检测纯化质粒DNA的体外和体内生物活性。结果 CTAB纯化质粒DNA的最佳浓度为0.004%;用NaCl、KAc或LiCl提取的质粒DNA中,RNA均未完全去除,而用CaCl2或MgCl2提取的质粒DNA中,RNA含量(RNA/nucleic acid)均小于1%,CaCl2最佳终浓度范围为0.4～0.5 mol/L,MgCl2最佳浓度范围为0.3～0.4 mol/L;使用0.4 mol/L MgCl2的CTAB法纯化的质粒pEGFP的杂蛋白质、细菌基因组DNA、内毒素和RNA含量均符合FDA对治疗用质粒DNA的要求;纯化的质粒pEGFP DNA回收率达80%以上,且体外生物活性显著高于市售试剂盒纯化的质粒(P<0.05),而体内生物活性与试剂盒纯化的质粒相当(P>0.05)。结论优化了CTAB法纯化质粒DNA的工艺,该方法操作简便,经济高效,纯化得到的质粒DNA各项指标均符合FDA质量标准,且转染基因表达效率较高,质量可靠,适用于质粒DNA的大规模纯化生产。; 陈婷刘嘉王晓刁勇; 关键词：十六烷基三甲基溴化铵质粒纯化基因治疗

复方丹参片与复方丹参滴丸治疗冠心病的药物经济学分析被引量：7: 2013年; 目的探讨两种复方丹参制剂治疗冠心病的药物经济学效果。方法采用文献回顾的方式进行药物经济学评价,将88例冠心病患者随机分成两组,分别口服复方丹参片与复方丹参滴丸治疗,疗程均为4周,观察疗效并进行药物经济学评价。结果复方丹参片组总有效率为75%,复方丹参滴丸组为93%,复方丹参片组成本-效果比为0.19,复方丹参滴丸组为1.82。结论虽然复方丹参滴丸疗效优于复方丹参片,但复方丹参片具有较好的成本-效果比。; 汪宁卿汪素卿刁勇; 关键词：冠心病复方丹参片复方丹参滴丸药物经济学

下调间隙连接蛋白43表达对血管内皮细胞生物功能的影响被引量：3: 2015年; 间隙连接蛋白43(Cx43)在伤口愈合过程中发挥重要作用。血管生成也是创伤修复的一个重要特征,但目前很少有关Cx43对血管内皮细胞功能影响的研究。本文采用小干扰RNA(si RNA)特异性减少Cx43在人脐静脉内皮细胞(HUVEC)的表达,研究Cx43的表达下调对HUVEC细胞间信号传递、活力、增殖、迁移以及血管生成活性的影响。结果表明,经si RNA处理后,HUVEC内Cx43的表达降低约80%(P<0.05),HUVEC细胞间信号传递功能减少约65%(P<0.05),细胞活力、增殖和迁移活性显著降低(P<0.05)、血管生成速度减缓。推测在创伤早期维持Cx43的低水平表达,抑制渗透性和炎性等异常血管的生成速度,是保证伤口愈合过程中各关键步骤协调进行的前提条件之一。; 张才臻母晓凤徐先祥邱飞林俊生刁勇; 关键词：间隙连接蛋白43 伤口愈合内皮细胞血管形成

基于生物膜的伤口护理研究进展被引量：4: 2015年; 生物膜在伤口中存在并导致伤口延迟愈合已达成共识,如何清除伤口内的生物膜成为伤口护理的重点[1]。本文总结了生物膜阻碍伤口愈合的各种可能机制,如上皮和肉芽组织的形成受损、对抗菌药物及宿主免疫反应的敏感性降低等,并对有效处理生物膜的方法进行了讨论,包括清创和适当的抗菌治疗,提出基于生物膜的伤口护理(biofilm based wound care,BB-; 母晓凤刁勇; 关键词：生物膜清创伤口护理

核酶核糖开关在基因治疗中的应用及挑战被引量：3: 2014年; 在临床应用中如何根据病情按时、按需地调控基因表达,是基因治疗亟需解决的关键问题。核酶核糖开关具有基因表达水平的可调节性、结构的可组装性和靶基因的特异性等特点,是一种非常有应用前景的配体控制型基因调控系统。最新研究显示,核酶核糖开关不仅能调控哺乳动物细胞的转基因表达,还能调控细胞功能与命运。已建立的高通量筛选平台,不仅可以在微生物宿主中快速优化核酶核糖开关,还可将选定的活性序列元件直接应用于哺乳动物细胞。另外,可定量评价核酶核糖开关性能的数学模型的成功建立,为其前瞻性合理设计奠定了基础。但是,核酶核糖开关在基因治疗的成功应用,仍有赖于调节元件的优化设计和调控配体的生物相容性等关键问题的解决。; 冯婧娴王佳稳林俊生刁勇; 关键词：基因治疗核糖开关核酶

艾滋病疫苗替代品腺相关病毒介导抗体基因的研究进展: 2016年; 重组腺相关病毒(rAAV)载体介导的抗体基因治疗药物,可为宿主直接提供中和抗体而使其免受艾滋病毒感染,有望成为艾滋病预防及治疗疫苗的替代品。综述人免疫缺陷病毒(HIV)专属性广谱中和抗体发现过程的文献资料,介绍了rAAV介导的抗HIV抗体基因治疗的试验结果,并对rAAV在艾滋病预防及治疗的研究进展作了分析。; 殷剑波马守栋刁勇; 关键词：艾滋病疫苗腺相关病毒

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国际科技合作与交流专项项目(2011DFG33320)

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