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pIRES2-FL-IL-3转染协同促进脐血干细胞增殖的研究: 2007年; 目的观察真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染对脐血干细胞增殖的影响及目的蛋白IL-3和FL(Flt3ligand)的表达变化。方法分为4组:空白对照组(对照组)、pIRES2-IL-3组(IL-3组)、pIRES2-FL组(FL组)和pIRES2-FL-IL-3组(共表达组)。通过台盼蓝染色及MTT法检测pIRES2-FL-IL-3转染(共表达组)对脐血干细胞细胞存活率及增殖的影响,RT-PCR技术、Western blot技术检测脐血干细胞FL和IL-3的mRNA水平和蛋白表达。结果共表达组细胞存活率无显著变化(P>0.05),MTT法检测细胞增殖显著高于对照组,共表达组IL-3及FL mRNA水平和蛋白均显著高于对照组,并且高于IL-3组和FL组。真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染脐血干细胞后细胞存活率无显著变化(P>0.05),结论脐血干细胞增殖显著增强,目的蛋白能得到有效表达。; 张勇张林生郭朝华张红宾董世武; 关键词：FLT3配体真核表达增殖

质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染对脐血CD34^+干细胞增殖影响的实验研究被引量：1: 2007年; 目的观察真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染对脐血干细胞增殖水平的影响。方法利用流式细胞检测技术探讨pIRES2-FL-IL-3(共表达组)转染脐血CD34+干细胞后其增殖水平的变化,Western blot技术检测FL和IL-3蛋白表达。另设空白对照组、pIRES2-IL-3组(IL-3组)和pIRES2-FL组(FL组)。结果共表达组细胞增殖指数I、L-3及FL蛋白活性均显著高于对照组I、L-3组和FL组。结论真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染脐血干细胞后其细胞增殖指数显著提高,与IL-3及FL蛋白活性增加显著相关。; 张勇张林生郭朝华张红宾董世武; 关键词：FLT3配体质粒胎血

CD34^＋脐血干细胞转染pIRES2-FL—IL-3后静脉移植对辐射损伤小鼠的影响被引量：1: 2008年; 目的观察CD34^＋脐血干细胞转染质粒载体pIRES2-FL-IL-3后静脉移植对辐射损伤小鼠的影响并探讨其机制。方法质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染脐血CD34^＋干细胞，将其通过静脉移植到辐射损伤的小鼠体内（5×10^5个细胞，只，双表达组，12只），观察辐照后2、4和6周动物存活率及外周血象变化。6周时免疫荧光法检测实验小鼠脾脏CD34表达，RT-PCR法和Westernblot法进行IL-3和FL的mRNA和蛋白活性检测，另外3组为单纯CD34^＋细胞组（CD34组）、转染pIRES2-IL-3CD34^＋细胞组（IL-3组）和转染pIRES2-FL CD34^＋细胞组（FL组），各组动物数均为12只。结果CD34组、IL-3组和FL组动物6周存活率分别为25．0％、50．0％和50．0％，双表达组动物存活率为91．7％，显著高于其余各组。2周时双表达组白细胞数量、红细胞数量及血小板数量显著高于其余3组。双表达组脾脏CD34免疫荧光强度显著高于其余3组，IL-3及FL的mRNA水平及蛋白活性均显著高于其余3组。结论真核共表达质粒载体pIRES2-FL-IL-3转染CD34^＋脐血干细胞后对辐射损伤小鼠具有显著的促脾脏造血作用，其机制与移植后小鼠脾脏组织中移植CD34^＋脐血干细胞的聚集、增殖及目的蛋白的高效表达有关。; 张勇张林生郭朝华张红宾董世武; 关键词：白介素-3 FLT3配体干细胞

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国家自然科学基金(30200071)

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