国家自然科学基金(30771355)
- 作品数：7 被引量：31H指数：4
- 相关作者：李明春邢来君魏东盛钱雪艳郭东全更多>>
- 相关机构：南开大学吉林省农业科学院天津中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 高山被孢霉△6脂肪酸延长酶基因的克隆及功能验证
- 生产二十碳四烯酸（Arachidonic acid,AA）的高山被孢霉（Mortierella alpina）体内的脂肪酸延长酶MAELO（Mortierella alpina elongase）催化AA、EPA等生物合...
- 兰昊魏东盛邢来君李明春
- 关键词：高山被孢霉基因表达蛋白分析
- 文献传递
- 三角褐指藻Δ5-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及功能验证
- △-脂肪酸脱氢酶是合成花生四烯酸的关键酶。根据已报道的△-脂肪酸脱氢酶基因设计引物,分别从三角褐指藻基因组DNA和总cDNA中扩增得到1520bp和1410bp的特异片段,序列分析结果显示,结构基因中含有一个大小为110...
- 杨哲魏东盛邢来君李明春
- 关键词：花生四烯酸真菌酿酒酵母
- 文献传递
- 低温和外源不饱和脂肪酸对高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因表达的影响被引量：4
- 2012年
- 【目的】在转录水平上研究低温和外源不饱和脂肪酸对于高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因的表达调控机制。【方法】通过实时定量PCR技术和启动子报告基因融合载体的方法,研究低温和外源不饱和脂肪酸对于高山被孢霉3种脂肪酸脱氢酶基因表达随时间进程的影响。【结果】实时定量PCR的结果表明:低温对于3种脂肪酸脱氢酶基因的转录具有激活作用,外源不饱和脂肪酸对基因转录起抑制作用,而且这两种作用都是快速响应的,随时间延长逐渐减弱并消失。脂肪酸组成测定结果证明了基因转录水平变化与对应产物变化之间没有相关性。低温能够在短时间内诱导pFAD6启动子活性增加,并随时间延长而持续增强;外源不饱和脂肪酸对pFAD6启动子活性起抑制作用,其不饱和度和浓度越高,抑制作用越强,而且抑制作用是快速且持续的。【结论】低温和外源不饱和脂肪酸除了在转录水平上调控高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因表达发生变化之外,可能主要在转录后水平上介导了胞内脂肪酸组成的变化。而且,脂肪酸脱氢酶基因的表达可能受到胞内脂肪酸组成变化的反馈调节作用。本文首次在转录水平上对高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因的表达调控机制进行了探索,为深入了解脂肪酸脱氢酶基因表达及多不饱和脂肪酸合成对外界信号的应答机制提供了有用信息,也对应用微生物发酵和转基因技术生产不饱和脂肪酸具有指导意义。
- 于爱群石桐磊张飙邢来君李明春
- 关键词：不饱和脂肪酸脂肪酸脱氢酶实时定量PCR启动子
- 巴斯德毕赤酵母ppSpt23p对UFA脱氢酶基因调控作用研究
- 多不饱和脂肪酸是在酶复合物的作用下由脂酰链脱氢形成的,脂肪酸脱氢酶在脂肪酸代谢以及维持细胞膜正常结构和功能方面有重要作用。巴斯德毕赤酵母Gs115（Pichiapastoris）作为一种能够产生多不饱和脂肪酸亚油酸和α-...
- 魏东盛亓玉燕邢来君李明春
- 关键词：巴斯德毕赤酵母
- 文献传递
- 无选择标记转基因大豆表达载体的构建
- 转基因大豆是世界上转基因作物中推广时间最早、推广面积最大、效益最高的转基因作物。然而,和所有其他转基因植物一样,构建的转基因大豆不仅含有目的基因,还含有选择标记基因,这
- 黎明欧秀元魏东盛张代文邢来君李明春
- 文献传递
- 球等鞭金藻H29中△4-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及功能鉴定
- 球等鞭金藻是一种富含多种多不饱和脂肪酸的海洋微生物,是生产二十二碳六烯酸(DHA)的重要资源.在藻类微生物中,△4-脂肪酸脱氢酶是合成DHA的关键酶之一,也是由二十碳五烯酸(EPA)生成二十二碳六烯酸的限速酶.本文根据已...
- 石桐磊于爱群邢来君李明春
- 关键词：球等鞭金藻二十二碳六烯酸酿酒酵母
- 高山被孢霉脂肪酸脱氢酶基因启动子克隆及利用β-半乳糖苷酶报告基因进行功能鉴定
- 高山被孢霉是一种重要的多不饱和脂肪酸产生菌,目前已用于工业化生产γ-亚麻酸(GLA)和花生四烯酸(ARA),但其合成多不饱和脂肪酸相关基因的表达调控机制尚不明确。启动子是基因表达调控的重要元件,在基因转录调控环节中处于非...
- 于爱群邢来君李明春
- 关键词：高山被孢霉脱氢酶基因启动子克隆Β-半乳糖苷酶基因
- 低温和外源不饱和脂肪酸对毕赤酵母三种脂肪酸脱氢酶基因表达及油脂产生时间进程的影响
- 毕赤酵母(Pichia pastoris GS115)是甲醇营养型酵母的一种,目前已经发展成为表达外源蛋白的理想宿主。通过气相色谱法对其胞内脂肪酸组成进行分析后发现,毕赤酵母含有C16∶1、C17∶1、C18∶1三种单不...
- 于爱群邢来君李明春
- 关键词：不饱和脂肪酸脂肪酸脱氢酶
- 根癌农杆菌介导的日本曲霉转化体系的建立被引量：9
- 2011年
- 【目的】通过根癌农杆菌介导的方法构建日本曲霉转化子库,从而筛选出高产甘没氧化酶的日本曲霉突变菌株。【方法】本文通过三亲杂交的方法将双元载体pBI-hphII转移至根癌农杆菌EHA105中并作为侵染菌株,以日本曲霉As5999为受体菌株,建立了农杆菌介导的日本曲霉转化体系,构建了突变体库,并对影响转化效率的根癌农杆菌浓度,乙酰丁香酮(As)加入与否,共培养时间,共培养温度等因素进行了分析。【结果】对转化子的PCR检测和Southern杂交分析表明,T-DNA已整合进日本曲霉基因组中,随机挑选的9个转化子连续转接10代后均能稳定遗传。【结论】该转化体系的建立为筛选出高产甘油氧化酶的日本曲霉突变菌株奠定了基础。
- 郭慧杨哲邢来君李明春
- 关键词：日本曲霉根癌农杆菌
- 小眼虫藻Δ~8-脂肪酸脱氢酶基因的克隆及其在酿酒酵母中的表达被引量：2
- 2010年
- Δ8途径是合成多不饱和脂肪酸的替代途径,Δ8-脂肪酸脱氢酶是该途径的关键酶之一。根据已报道的Δ8-脂肪酸脱氢酶基因设计引物,分别从小眼虫藻基因组DNA和cDNA中扩增得到该基因片段,序列分析表明:结构基因长1266bp,编码421个氨基酸;该基因没有内含子,比已经报道的Δ8-脂肪酸脱氢酶基因长6bp,并且N末端序列也有所不同。利用酿酒酵母的载体pYES2.0构建Δ8-脂肪酸脱氢酶表达载体pYEFD,并转化到营养缺陷型酿酒酵母菌株INVSc1中,在选择培养基中筛选得到酿酒酵母转化菌株YD8。YD8在合适的培养条件下,添加外源底物二十碳二烯酸和二十碳三烯酸并诱导基因表达。脂肪酸甲酯气相色谱分析表明小眼虫藻Δ8-脂肪酸脱氢酶基因在酿酒酵母中获得了高效表达,将二十碳二烯酸和二十碳三烯酸分别转化成二高-γ-亚麻酸和二十碳四烯酸,其底物转化率分别达到了31.2%和46.3%。
- 黎明欧秀元杨向东郭东全钱雪艳邢来君魏东盛李明春
- 关键词：多不饱和脂肪酸
