国家科技重大专项(2009ZX08009-031B)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 相关作者：宋福平高继国高川张杰朱莉更多>>
- 相关机构：东北农业大学中国农业科学院植物保护研究所中国农业科学院生物技术研究所更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家重点基础研究发展计划国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 苏云金芽孢杆菌cry9Aa基因的克隆、表达及活性分析被引量：6
- 2010年
- 为了解决目前广泛使用的cry1A类基因的抗性问题,获得对鳞翅目害虫高效杀虫基因,从菌株SC5D2和T03C001中鉴定并克隆到了2个新型cry9Aa基因,被Bt国际命名委员会分别正式命名为cry9Aa3和cry9Aa4,并进一步对其编码的蛋白进行活性测定。结果显示,2个基因对小菜蛾、玉米螟均具有较高的杀虫活性,其中对小菜蛾的LC50分别为1.83μg/mL和1.90μg/mL,对玉米螟的LC50分别为6.93μg/mL和1.06μg/mL。同时,两种Cry9Aa蛋白对Cry1Ac抗性小菜蛾都具有较高的杀虫活性,LC50分别为1.74μg/mL和1.39μg/mL,与敏感小菜蛾杀虫活性测定数据相当,表明Cry9Aa与Cry1Ac没有交互抗性。
- 苏慧琴束长龙何康来张友军高继国宋福平
- 关键词：苏云金芽孢杆菌克隆生物活性
- 苏云金芽胞杆菌cry1Ib6基因的克隆、表达及活性的研究被引量：2
- 2011年
- 苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)能产生杀虫晶体蛋白(Insecticida Crystal Proteins,ICPs),对敏感昆虫有强烈毒性,而对高等动物和人无毒性。ICPs由cry或cyt基因编码,根据cry1I型基因设计引物,以Bt LB52菌株的质粒DNA为模板,扩增出了全长为2.1 kb的cry1I基因,其能通过表达载体pEB在大肠杆菌中高效表达为79.9 kDa的蛋白。经过AlginX软件分析该蛋白由712个氨基酸组成,分子量为79.9 kDa,等电点为6.54,为弱酸性蛋白质,NCBI Blast比对该蛋白的氨基酸序列与Cry1Ib3的相似性最高为98%,有12个氨基酸的差异。该基因已在GenBank中注册,登录号为ADK38579,并被国际基因命名委员会正式命名为cry1Ib6。它的表达产物对小菜蛾具有较高的毒力,LC50为1.196μg/mL,为抗虫转基因植物研究提供了新的基因。
- 张庆丽李海涛赵世源刘荣梅赵勇高继国
- 关键词：苏云金芽胞杆菌克隆生物活性
- 转cry2Ab4和vip3Aa11基因烟草对小地老虎杀虫效果研究被引量：7
- 2012年
- 小地老虎严重危害农业生产,通过转基因技术提高作物对小地老虎的杀虫效果是一条切实可行的途径。cry2Ab4和vip3Aa11是从苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis,Bt)中克隆到的两个杀虫基因。分别构建了pCS2Ab和pCSvip3A两种植物表达载体,利用农杆菌介导法转化烟草(Nicotiana tabacum L.)NC89,并得到32株和35株阳性转基因植株。通过对其进行RT-PCR分析、Western杂交分子检测证实两种外源基因在烟草植株中可以正常表达。人工饲喂初龄小地老虎幼虫,对两种转基因植株进行生物活性检测,结果显示饲喂转基因叶片的小地老虎幼虫死亡率在82%以上,抗虫能力比对照显著提高,转vip3A植株抗虫效果优于转cry2Ab植株。
- 高川郎志宏朱莉宋福平张永军张杰黄大昉
- 关键词：转基因烟草小地老虎
