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大黄鱼幼鱼肠道细菌分离培养: 肠道微生物是动物体的重要组成部分，对宿主的生长发育、生理和病理等方面均有重要作用.本研究采用传统分离培养手段，对大黄鱼二月龄鱼苗肠道细菌进行了计数和分离培养.结果表明，大黄鱼二月龄鱼苗每克肠道样品中的细菌个数约为1.3&...; 王程程黄伟卿鄢庆枇沈晓群马英; 关键词：大黄鱼 RDNA 分子鉴定

溶藻弧菌胁迫培养对粘附大黄鱼表皮粘液的影响: 从集美海湾采集海水,分离、纯化并质谱鉴定到5株溶藻弧菌株ND1001-1005,通过攻毒实验筛选到强毒株ND1001。为了解胁迫培养条件下溶藻弧菌对大黄鱼表皮粘液的粘附特性,对ND1001进行不同理化条件下的胁迫培养并玻...; 孔文迪鄢庆枇覃映雪王军苏永全; 关键词：溶藻弧菌大黄鱼粘附

大黄鱼网箱养殖水体的细菌群落结构被引量：8: 2014年; 以16S r DNA为分子标记,通过构建克隆文库、限制性片段长度多态性(Restriction Fragment Length Polymorphism,RFLP)分析等技术手段,研究大黄鱼(Larimichthys crocea)网箱养殖水体中细菌的群落结构。样品采自福建省宁德市三都湾富发养殖基地。随机选取5个不同养殖网箱水样混合,取3 L混合水样过滤富集细菌后提取总DNA,用细菌通用引物27F和1 492R扩增其16S r RNA基因,构建克隆文库。从文库中随机挑选154个克隆子进行分析,得到137个阳性克隆,92种RFLP带型。对部分代表性克隆子进行测序的结果表明,大黄鱼养殖水体中细菌多样性非常丰富。序列分析结果显示,γ-变形菌纲的假交替单胞菌属(Pseudoalteromonas)细菌为最优势菌(占γ-变形菌纲克隆子数的31.2%),海源菌属(Idiomarina)次之(占γ-变形菌纲克隆子数的15.1%)。此外还存在6.6%的厚壁菌门(Firmicutes)、5.9%的拟杆菌门(Bacteroidetes)、各0.7%的浮霉状菌门(Planctomycetes)、绿屈挠菌门(Chloroflexi)、绿菌门(Chlorobi)细菌和OP11类群。本研究结果阐明了网箱养殖大黄鱼水体细菌的群落结构,为大黄鱼养殖区病害防治、环境监测以及探讨大黄鱼健康养殖与养殖水体细菌间的关系奠定了基础。; 邓霏鄢庆枇黄伟卿熊何健王程程马英; 关键词：大黄鱼养殖水体细菌群落 RDNA 限制性片段长度多态性

大黄鱼(Pseudosciaena crocea)源美人鱼发光杆菌(Photobacterium damselae)的分离鉴定及致病性研究被引量：21: 2012年; 于2010年从宁德患病大黄鱼中分离得到一株优势菌NPL1006,经鉴定该菌株为美人鱼发光杆菌。人工感染实验结果显示该菌对大黄鱼的半致死浓度(LD50)为7.96×103CFU/g体重。药敏性实验结果显示NPL1006对头孢唑啉、头孢噻吩和诺氟沙星等9种药物高度敏感。采用纸片法检测得到NPL1006的胞外产物具有蛋白酶、明胶酶和淀粉酶活性。胞外产物感染斑马鱼研究结果显示其LD50为1.20mg蛋白/kg体重。以上结果表明大黄鱼源美人鱼发光杆菌NPL1006胞外产物含有多种毒力因子,与该菌对大黄鱼的致病性密切相关。; 张飞苏永全王军覃映雪马英鄢庆枇; 关键词：大黄鱼胞外产物

大黄鱼幼鱼肠道细菌分离培养: 肠道微生物是动物体的重要组成部分,对宿主的生长发育、生理和病理等方面均有重要作用。本研究采用传统分离培养手段,对大黄鱼二月龄鱼苗肠道细菌进行了计数和分离培养。结果表明,大黄鱼二月龄鱼苗每克肠道样品中的细菌个数约为1.3×...; 王程程黄伟卿鄢庆枇沈晓群马英; 关键词：大黄鱼分子鉴定

福建三沙湾养殖大黄鱼肠道菌群研究被引量：9: 2014年; 为研究大黄鱼(Pseudosciaena crocea)肠道细菌的群落结构,提取大黄鱼肠道内容物和肠壁样品总DNA,构建细菌16S rDNA克隆文库.分别从两个文库中随机挑选阳性克隆子测序,序列同源性分析和系统进化分析结果表明:在大黄鱼肠道中存在梭杆菌纲(Fusobacteria)细菌、拟杆菌纲细菌(Bacteroidetes)和γ-变形细菌纲(γ-Proteobacteria)细菌.肠壁样品细菌多样性高于肠道内容物样品.梭杆菌属细菌在肠道内容物样品中占据优势地位,而肠壁样品则以拟杆菌属细菌为最优势细菌类群,其次是梭杆菌属细菌.两个样品中均只检测到少量γ-变形细菌纲细菌.; 王程程鄢庆枇黄伟卿熊何健王勇忠马英; 关键词：大黄鱼肠道细菌 RDNA

溶藻弧菌胁迫培养对粘附大黄鱼表皮粘液的影响: 从集美海湾采集海水,分离、纯化并质谱鉴定到5株溶藻弧菌株ND1001-1005,通过攻毒实验筛选到强毒株ND1001.为了解胁迫培养条件下溶藻弧菌对大黄鱼表皮粘液的粘附特性,对ND1001进行不同理化条件下的胁迫培养并玻...; 孔文迪鄢庆枇覃映雪王军苏永全; 关键词：溶藻弧菌大黄鱼粘附

转座子mini-Tn10介导的运动突变对溶藻弧菌毒力的影响: 2012年; 采用转座子mini-Tn10/Km构建了致病性溶藻弧菌的突变库,采用半固体双层平板初筛到73株运动缺陷突变株,初筛的突变株纯化及重复筛选后获得运动性缺陷表型稳定的突变株ND-01MM,Southern鉴定确定其为单位点插入。野生型菌株ND-01和运动缺陷突变株ND-01MM对致病性溶藻弧菌的天然宿主大黄鱼粘液的趋化、粘附以及在大黄鱼吞噬细胞内存活能力等生理功能的比较研究发现,溶藻弧菌运动缺陷后趋化及粘附能力均极显著下降(P<0.01),但在吞噬细胞内的存活能力则与野生型菌株差异不显著(P>0.05)。采用腹腔注射和浸泡两种方式感染大黄鱼,结果发现运动缺陷对浸泡感染的影响较为明显,但对腹腔注射的感染方式影响不大。; 覃映雪徐晓津鄢庆枇苏永全刘力铭李学刚; 关键词：溶藻弧菌转座子毒力

绿色荧光蛋白标记的病原性河流弧菌在青石斑肠道的黏附定植研究: 2012年; 通过灌胃将绿色荧光蛋白标记的病原性河流弧菌导入青石斑鱼消化道内,追踪标记菌在青石斑肠道中的黏附和定植及对肠道消化酶活性的影响。结果表明,青石斑前肠和中肠在河流弧菌灌胃12h即可检出,前肠在24h达到峰值,大约为7.1×105 cfu/g,中肠则在36h达到峰值,约为5.39×105 cfu/g,而后肠则是在24h才开始检出,且检出时即达到峰值,但仅为2.44×104 cfu/g,说明青石斑鱼的前肠和中肠都是河流弧菌的主要黏附部位。灌胃96h后前肠和中肠仍有标记菌存在,但在后肠已检测不到标记菌,反映出标记菌已在前肠和中肠定植下来,但没有在后肠定植。此外,标记河流弧菌的定植能够显著降低前肠蛋白酶活性和淀粉酶活性以及后肠脂肪酶活性。研究结果说明,病原性河流弧菌可通过黏附定植于鱼类肠道影响鱼类肠道消化酶活力,这可能是病原性河流弧菌引发鱼类病害的原因之一。; 覃映雪赵敏慧苏永全王军张小东王晓露鄢庆枇; 关键词：河流弧菌定植

鳗鲡外周血白细胞体外吞噬嗜水气单胞菌数量模型的建立被引量：4: 2013年; 为建立鳗鲡外周血白细胞体外吞噬嗜水气单胞菌的数量模型,研究了感染时间一定、感染复数变化的情况下鳗鲡外周血白细胞吞噬的细菌数量和白细胞的存活率,同时还研究了感染复数一定、感染时间变化的情况下鳗鲡外周血白细胞吞噬的细菌数量和白细胞的存活率。结果发现,鳗鲡外周血白细胞对嗜水气单胞菌有较强的吞噬作用,在感染复数为100∶1、感染时间为30min时细胞吞噬的细菌量达到饱和,而细胞本身仍可维持较高活性。表明100∶1的感染复数及30min的感染时间,是研究鳗鲡外周血白细体外吞噬嗜水气单胞菌数量模型的最佳参数。本研究还通过检测吞噬速率和杀菌速率评估建立起来的数量模型发现,鳗鲡外周血白细胞吞噬嗜水气单胞菌的速率较吞噬大肠杆菌的速率快,但杀灭该菌的速率却均显著低于杀灭大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的速率,进一步证明建立的数量模型具有良好的可行性。; 邰光富鄢庆枇徐晓津李芊覃映雪; 关键词：外周血白细胞嗜水气单胞菌鳗鲡

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福建省杰出青年科学基金(2011J06014)

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