国家高技术研究发展计划(2008AA101006)
- 作品数：7 被引量：15H指数：2
- 相关作者：张涌李吉霞葛秀国王勇胜郭磊更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学天津农学院北京师范大学更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划天津市高等学校科技发展基金计划项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- TSA浓度及处理时间对猪体细胞核移植胚胎体外发育影响被引量：3
- 2011年
- 曲古抑菌素A(Trichostatin A,TSA)是一种组蛋白去乙酰化酶抑制剂。有研究表明TSA处理可以提高核移植胚胎的发育率。为探讨TSA对猪核移植胚胎发育的作用,试验重点研究了TSA浓度及处理时间对核移植胚胎体外发育的影响,同时也探索了TSA对不同供核细胞构建的重构胚体外发育的影响。结果表明,40nmo·lL-1的TSA处理核移植胚胎可以显著提高其体外囊胚发育率;40nmo·lL-1TSA处理重构胚12和24h,两组重构胚的卵裂率与囊胚发育率差异不显著;40nmo·lL-1TSA处理12h对不同供核细胞构建的重构胚均具有提高囊胚发育率的效果,不同供核细胞所构建的重构胚发育率无显著差异。由此可知,40nmo·lL-1TSA处理12或24h可以提高猪体细胞核移植胚胎体外发育能力。
- 黄波郇延军石永乾王峰何文腾张鑫淼刘仲凤朱江吕明刘忠华
- 关键词：曲古抑菌素A体细胞核移植体外发育
- DNA甲基化和组蛋白修饰在克隆动物发育过程中的作用被引量：10
- 2010年
- 体细胞核移植在农业应用、生产疾病模型动物、转基因家畜或产生人胚胎干细胞来治疗人类的疾病方面有巨大的应用潜力。虽然已经成功克隆出多种哺乳动物,但该技术仍存在一些未解决的问题,包括产生克隆动物的效率低和克隆动物的异常等。异常的表观遗传重编程是克隆胚胎发育失败的一个重要因素。文章重点论述了DNA甲基化、组蛋白修饰及其与克隆胚胎发育的关系。了解表观遗传调控机制有助于解决核移植技术中存在的问题,有利于更好地应用这项技术。
- 郭磊李慧韩之明
- 关键词：体细胞核移植表观遗传修饰DNA甲基化组蛋白修饰
- hTERT永生化牛乳腺上皮细胞核移植胚胎的早期发育
- 2013年
- 为了研究供核细胞端粒酶基因的激活是否影响核移植胚胎的早期发育,试验采用转染端粒酶基因的牛乳腺上皮细胞与正常乳腺上皮细胞分别作为供核细胞进行核移植,检测重构胚卵裂率、囊胚发育率和孵化胚发育率及囊胚细胞数的差异。结果表明:2种细胞都可被牛卵母细胞重编程,各项指标差异均不显著。说明供核细胞人端粒酶催化亚基水平的高低对植入前阶段的核移植胚胎发育无显著影响,推测牛早期核移植胚胎可以调节端粒酶基因的表达和端粒的延伸,无需外源人端粒酶催化亚基活性。
- 李吉霞王勇胜葛秀国郭宏张涌
- 关键词：端粒酶乳腺上皮细胞核移植
- 牛乳腺干细胞核移植
- 2010年
- 近些年来,体细胞核移植虽然取得了很大的进步,但核移植效率仍然很低,而供核细胞的选择对于核移植效率起着关键的作用。本研究针对牛乳腺干细胞(mammary stem cells,MSCs)和牛乳腺上皮细胞(mammary epithelial cells,MECs)作为核移植的供核细胞,比较了重构胚发育率和核移植胚胎干细胞分离率的差异,发现来源于MSCs的重构胚的卵裂率为69%(331/479),囊胚发育率为27%(130/479);来源于MECs的卵裂率为71%,囊胚发育率为17%(84/495)。囊胚发育率差异显著(P<0.05)。试验从176个核移植重构囊胚分离培养胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES cells),发现来源于MSCs的重构胚的NTES贴壁率为44%(39/88),来源于MECs的NTES贴壁率为28%(25/88),NTES的贴壁率差异显著(P<0.05)。以上数据表明,来源于MSCs的重构胚具有较高的发育潜能。
- 李吉霞张涌王勇胜闫晶
- 关键词：乳腺干细胞乳腺上皮细胞胚胎干细胞核移植
- 小鼠2细胞胚胎基因表达谱分析
- 2010年
- 2细胞胚胎是哺乳动物植入前胚胎发育的关键时期。采用Oligo小鼠全基因组芯片对昆白小鼠2细胞胚的前期与后期胚胎总RNA进行芯片杂交,并分析基因表达谱。结果显示,2细胞胚胎表达的基因有5 136个;晚期和早期胚胎差异表达的基因1 248个,其中上调基因847个,下调基因401个;差异表达基因通路分析,多数基因参与细胞周期调控相关通路;基因本体论(GO)分类结果显示,参与细胞组成、细胞加工、催化活性和分子结合的基因占多数,部分基因参与细胞器组成、代谢加工、生物学调控和细胞信号转导等。
- 吕志一孙健红徐薇苏峰权富生华松张涌
- 关键词：小鼠基因表达基因芯片
- 牛乳腺上皮细胞的分离培养被引量：1
- 2012年
- 为了对牛乳腺上皮细胞(MECs)进行分离、培养和鉴定,并研究细胞分泌功能,试验通过胶原酶消化法分离得到了牛乳腺上皮细胞,采用传代法对细胞进行纯化,对细胞标志蛋白进行免疫荧光染色鉴定,通过体外诱导和RT-PCR分析鉴定细胞的分泌功能。结果表明:分离到的牛乳腺上皮细胞具有典型乳腺上皮细胞的形态特征,表达广谱角蛋白,经诱导后可分泌β-酪蛋白。
- 李吉霞葛秀国王文秀张涌
- 关键词：牛乳腺上皮细胞
- 不同血清类型对水牛胚胎体外培养效果的影响被引量：1
- 2011年
- 从屠宰场收集水牛卵巢上抽取的卵母细胞,经体外成熟培养后分别进行孤雌激活(PA)和体外受精(IVF),将获得的PA或IVF胚胎分别培养于添加浓度均为5%的牛血清白蛋白(BSA)、胎牛血清(FBS)、发情水牛血清(OBS)、发情牛血清(OCS)和混合血清(OCS与FBS按1:1混合)的培养液中培养7～9 d,并观察胚胎的体外发育情况。结果,PA胚胎培养在OCS和混合血清组的卵裂率(73.52%,68.07%)和囊胚率(30.59%,27.73%)均显著高于BSA(38.37%,6.40%)、OBS(44.97%,10.05%)和FBS(52.02%,17.04%)组(P<0.05);IVF胚胎的卵裂率和囊胚率以OCS组最高(62.50%,22.62%),显著高于BSA(30.50%,6.38%)、OBS(35.48%,7.10%)和FBS组(40.11%,11.76%,P<0.05),但与混合血清组(60.42%,21.35%;P>0.05)差异不显著。结果表明,在水牛胚胎体外培养体系中添加5%的OCS或混合血清均能有效地促进水牛胚胎的体外发育。
- 蒋建荣凌泽继邹知明陆凤花向舒张顺李楠王建石德顺
- 关键词：血清孤雌激活体外受精胚胎
