国家自然科学基金(3017096330540062)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：朱晓峰唐文渊徐忠烨程远更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第一医院佳木斯大学重庆医科大学附属第二医院更多>>
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- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 携带IRES的hBDNF绿色荧光蛋白表达载体的构建和鉴定被引量：3
- 2008年
- 目的构建表达人脑源性神经生长因子(hBDNF)基因的真核细胞表达载体,并且观察重组质粒在真核细胞中的表达情况。方法采用PCR方法从健康人基因组中扩增出该基因,将hBDNF的PCR产物用XhoⅠ和SalⅠ双酶切后克隆到用XhoⅠ和SalⅠ双酶切的带有EGFP和内部核糖体转入位点(IRES)的真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中。对重组质粒进行双酶切和质粒测序鉴定后,采用阳离子脂质体Lipofectamine 2000将重组的质粒转染至真核细胞中,用RT-PCR和荧光显微镜检测基因在细胞中表达的情况。结果双酶切和质粒测序结果证明hBDNF已正确地克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,质粒能在细胞中正常表达。结论成功构建了EGFP/hBDNF表达载体,为应用hBDNF治疗中枢神经系统疾病奠定坚实的基础。
- 徐忠烨程远朱晓峰唐文渊
- 关键词：重组质粒转染
- 神经干细胞静脉移植对脑外伤大鼠神经功能的影响被引量：3
- 2006年
- 目的探讨经静脉移植的神经干细胞能否促进脑外伤大鼠神经功能的恢复。方法将脑外伤大鼠随机分为两组,A组大鼠尾静脉移植PBS,B组移植Brdu标记的神经干细胞,应用免疫组织化学方法检测移植细胞在体内的分布及迁移,应用RT-PCR方法分析两组局部损伤组织中神经营养因子表达情况,在移植后应用NSS评分评价两组大鼠的神经功能。结果①B组大鼠局部损伤组织内可见大量的Brdu+细胞;②移植7 d后,B组大鼠的NSS评分明显低于A组大鼠(P<0.05);③B组与A组相比局部损伤组织中神经营养因子的表达明显增高(P<0.05)。结论经尾静脉移植的神经干细胞可以到达损伤部位,并可以通过上调局部组织内神经营养因子浓度发挥保护作用。
- 徐忠烨唐文渊朱晓峰
- 关键词：神经干细胞创伤性脑损伤神经功能
