公益性行业科研专项(201303044)
- 作品数：6 被引量：43H指数：3
- 相关作者：陈素娟彭大新黄骏宋翠萍包世俊更多>>
- 相关机构：扬州大学中国农业科学院上海兽医研究所山西农业大学更多>>
- 发文基金：公益性行业科研专项国家自然科学基金江苏高校优势学科建设工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 鼠伤寒沙门氏菌生物被膜形成相关基因rpoN的鉴定
- 目的为了探索σ因子rpoN在鼠伤寒沙门氏菌生物被膜形成过程中的作用。方法对两株生物被膜形成能力较强的鼠伤寒沙门氏菌利用Red同源重组系统构建rpoN基因缺失株,利用原核表达载体构建回复株;比较野生株、缺失株和回复株的生物...
- 苏洋洋黄骏吴白印云聪刘珍陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：鼠伤寒沙门氏菌生物被膜环境应激
- 文献传递
- 禽沙门氏菌分离株耐药性及Ⅰ类整合子的检测
- 采用K-B纸片扩散法对61株禽沙门氏菌分离株进行了药敏试验,结果显示所分离的禽沙门氏菌对青霉素、苯唑西林、利福平和万古霉素的耐药率均达到了100%,但对美福仙、诺氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、氯霉素、氟苯尼考有较好的敏感性...
- 苏洋洋冯政付玉勤印云聪刘珍陈素娟彭大新
- 关键词：家禽沙门氏菌耐药性
- 文献传递
- 禽沙门菌分离株耐药性及Ⅰ类整合子的检测
- 2017年
- 为了分析禽沙门菌临床分禽株出现多重耐药的原因,采用Kirby-Bauer纸片扩散法对61株禽沙门菌分离株进行药敏试验筛选,通过PCR方法检测59株多重耐药沙门菌的Ⅰ类整合子的5’-CS端、3’-CS端和可变区基因并进行测序分析。药敏试验结果显示,所分离的禽沙门菌对青霉素、苯唑西林、利福平和万古霉素的耐药率均达到了100%,但对美福仙、诺氟沙星、阿米卡星、卡那霉素、氯霉素、氟苯尼考相对敏感;96.72%沙门菌能耐受6种及其以上抗菌药物,说明沙门菌的多重耐药性比例高。通过PCR及测序发现,5株禽沙门菌(8.5%)中检测到Ⅰ类整合子基因盒,包括4株雏沙门菌和1株肠炎沙门菌。序列分析结果显示,Ⅰ类整合子基因盒的核苷酸同源性达到100%;通过NCBI的BLAST分析发现,Ⅰ类整合子基因盒内含有dfr17和aad A5基因。因此,尽管禽沙门菌分离株的多重耐药性比例高,但是仅有少数菌株的耐药性与Ⅰ类整合子相关。
- 苏洋洋冯政付玉勤印云聪刘珍陈素娟彭大新
- 关键词：家禽沙门菌耐药性
- 鸡毒支原体检测方法的研究进展
- 2014年
- 鸡毒支原体感染给养禽业造成了非常严重的经济损失,对该病进行快速、准确检测,会为该病的预防和控制提供非常重要的措施。文章就目前对鸡毒支原体检测方法的研究进展进行了综述。
- 迟灵芝隋兆峰杨明彩王洪利徐斌
- 关键词：鸡毒支原体致病力
- 滑液支原体烯醇化酶基因的克隆表达及其表达产物活性的测定被引量：3
- 2013年
- 参照GenBank中滑液支原体P53株序列设计1对特异性引物,通过PCR扩增获得滑液支原体WVU1853菌株烯醇化酶基因并将其克隆至pGEM-T Easy,测序并完成点突变后构建重组表达质粒pET-28a-eno,转化大肠杆菌BL21(DE3),经IPTG诱导表达后纯化表达产物并测定其酶促活性。结果显示,表达产物具有水解酶活性,最适pH为7.5,最适温度为50℃,Mg2+可作为酶活性辅因子,相同浓度的Zn2+可提高酶活性,而Mn3+、Al 2+、Ni 2+、Ba2+和Li+对酶活性均有不同程度的抑制作用;其米氏常数(km)和最大反应速率(Vmax)分别为1.1×10-3 mol/L和0.739μmol/(L.min)。
- 郭小琴包世俊谭磊何随彬张凡庆仇旭升宋翠萍丁铲
- 关键词：滑液支原体克隆酶活性
- 鸡白痢沙门氏菌生物被膜形成相关基因rpoE的鉴定
- 引言鸡白痢沙门氏菌能引起各年龄鸡发病,既可水平传播,也可垂直传播,严重影响种蛋孵化率,给养殖业带来严重的经济损失。自然界中大多数的细菌是以生物被膜状态存在的,而沙门氏菌可以形成生物被膜。细菌处于生物被膜状态可增强细菌对外...
- 黄骏陈素娟黄凯杨林吴白彭大新
- 鼠伤寒沙门菌rpoN基因缺失株构建及生物学特性研究被引量：5
- 2016年
- 为了探索σ因子RpoN在鼠伤寒沙门菌生物被膜形成过程中的作用,对两株生物被膜形成能力较强的鼠伤寒沙门菌利用Red同源重组系统构建rpoN基因缺失株,利用原核表达载体构建回复株;比较野生株、缺失株和回复株的生物被膜形成能力和对环境应激抵抗力的差异,并通过建立的csgA和bcsA基因实时定量PCR方法检测编码生物被膜成分基因的表达差异。结果显示,与野生株相比,△rpoN缺失株生物被膜形成能力增强,主要由卷曲菌毛表达量显著增加引起。回复株生物被膜形成能力与野生株相似。△rpoN缺失株在酸性应激和碱性应激条件下对外界环境应激的抵抗力均显著增强。RpoN为鼠伤寒沙门菌中生物被膜形成相关σ因子之一,为进一步研究沙门菌生物被膜形成的调控机制提供理论基础。
- 苏洋洋黄骏吴白印云聪刘珍陈素娟彭大新刘秀梵
- 关键词：鼠伤寒沙门菌环境应激
- 鸡滑液支原体乳酸脱氢酶的克隆表达及其表达产物活性研究被引量：3
- 2014年
- 根据GenBank中鸡滑液支原体(Mycoplasma synoviae,MS)MS53株的乳酸脱氢酶序列设计一对特异性上下游引物,通过PCR扩增获得MS WVU1853菌株的乳酸脱氢酶基因并将其克隆至pGEM-T Easy载体,测序正确并成功完成点突变后连接表达菌pET-28a(+),将重组表达质粒pET-28a-ldh转化表达菌BL21(DE3)。经IPTG诱导成功表达蛋白rMSLDH并测定其酶促活性。结果显示,重组表达的rMSLDH具有较强酶活性;最适反应温度40℃,最适pH7.5;Al2+和Ba2+可增加酶活性;Cr3+作为该酶的辅因子,在一定浓度内能有效的促进酶促反应进行;Cu2+作用下酶几乎失活,Fe3+、Mn2+、Ni2+、Zn2+对酶产生不同程度的抑制作用;其米氏常数(Km)为0.365 mmol/L,最大反应速率(Vm)为0.98μmol(L●min)。本研究结果为更好地研究鸡滑液支原体乳酸脱氢酶的生物学功能提供了参考。
- 任峰谭磊包世俊张凡庆陆凤仇旭升宋翠萍孙英杰陈书明丁铲
- 关键词：滑液支原体乳酸脱氢酶原核表达酶活性
- 动物源性沙门氏菌的耐药性分析及氟苯尼考类耐药基因的鉴定被引量：32
- 2015年
- 为了解动物沙门氏菌的流行情况和药物敏感性及氟苯尼考耐药株的耐药基因分布,本试验对临床上疑似患沙门氏菌病的病料进行病原分离和细菌的多重PCR鉴定;采用K-B法测定分离株对23种抗菌药物的敏感性;选择氟苯尼考耐药菌株扩增floR、fexA、fexB、cfr和pexA基因。结果显示,共鉴定出61株沙门氏菌,其中肠炎沙门氏菌10株,鸡白痢沙门氏菌12株,鼠伤寒沙门氏菌39株。所有菌株对青霉素、红霉素、万古霉素耐药,90.16%对6种及6种以上抗菌药耐药。floR基因广泛存在于鼠伤寒沙门氏菌氟苯尼考耐药菌株中(8/12,66.67%),未发现其他耐药基因。研究结果表明鼠伤寒沙门氏菌是鹅源分离株中的优势血清型;floR基因主要介导沙门氏菌对氟苯尼考耐药性,但可能还存在其他机制。
- 黄凯陈素娟黄骏杨林鞠勇朱相儒孙志豪彭大新
- 关键词：沙门氏菌血清型耐药性
- 动物源性沙门菌的耐药性分析及氟苯尼考类耐药基因的鉴定
- 引言沙门菌（Salmonella）是一种在公共卫生学上具有重要意义的人畜共患病原菌,随着抗生素的普遍应用,抗生素的耐药正在迅速成为一种世界范围内的卫生问题[1]。氟苯尼考是氯霉素的氟化衍生物,为动物专用药[2],在兽医临...
- 黄凯陈素娟黄骏杨林鞠勇朱相儒孙志豪彭大新
