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国家自然科学基金(30130240)

作品数:9 被引量:80H指数:7
相关作者:桂建芳石耀华刘军尹隽徐德全更多>>
相关机构:中国科学院更多>>
发文基金:国家自然科学基金中国科学院知识创新工程重要方向项目国家高技术研究发展计划更多>>
相关领域:生物学农业科学更多>>

文献类型

  • 9篇中文期刊文章

领域

  • 8篇生物学
  • 2篇农业科学

主题

  • 6篇银鲫
  • 6篇基因
  • 4篇抑制性差减杂...
  • 4篇克隆
  • 3篇CDNA
  • 2篇蛋白
  • 2篇相关基因
  • 2篇基因克隆
  • 2篇雌核
  • 2篇雌核发育
  • 2篇雌核发育银鲫
  • 1篇蛋白合成
  • 1篇鱼类
  • 1篇鱼卵
  • 1篇鱼生长激素
  • 1篇原肠胚
  • 1篇石斑
  • 1篇石斑鱼
  • 1篇胚胎
  • 1篇轻链

机构

  • 8篇中国科学院

作者

  • 8篇桂建芳
  • 6篇石耀华
  • 5篇刘军
  • 3篇尹隽
  • 1篇胡成钰
  • 1篇张奇亚
  • 1篇贾海波
  • 1篇周莉
  • 1篇夏建红
  • 1篇郭葳
  • 1篇陈波
  • 1篇张义兵
  • 1篇徐德全

传媒

  • 3篇水生生物学报
  • 1篇科学通报
  • 1篇Curren...
  • 1篇Journa...
  • 1篇Zoolog...
  • 1篇高技术通讯
  • 1篇Cell R...

年份

  • 2篇2005
  • 1篇2004
  • 6篇2003
9 条 记 录,以下是 1-9
排序方式:
斜带石斑鱼生长激素/催乳素家族基因cDNAs的分子克隆及其进化意义被引量:7
2004年
从斜带石斑鱼垂体提取总RNA ,再取其 5 0ng合成SMARTcDNA。从所构建的垂体SMARTcDNA质粒文库中筛选到生长激素 /催乳素基因家族的 2个成员的全长cDNA片段 :生长激素 (GH )基因全长为 938bp ,编码 2 0 4个氨基酸 ;催乳素基因 (PRL)全长为 14 2 9bp ,编码 2 12个氨基酸。采用计算机软件Mega 2和CLUSTALW1 6 4b对 9种鱼的生长激素 /催乳素基因家族的 3个成员 (GH、PRL和生长催乳素SL)的氨基酸序列进行系统分析 ,构建NJ分支系统树 ,对于序列中的插入 /缺失位点则采用PairaiseDeletion ,10 0 0次自展(Bootstrap)分析计算各节点支持率。根据 3个基因的氨基酸序列构建的系统树表明 ,石斑鱼与金头鲷、金鲈和牙鲆聚成一类 ,虹鳟与大马哈鱼聚成一类 ,鲫鱼与鲶鱼聚成一类 ,鳗鲡成另外一类。根据石斑鱼全长cDNA推断的氨基酸序列比较表明 ,SL相对GH和PRL有较高的保守性。石斑鱼的GH、PRL和SL的氨基酸同源性在2 4 %~ 31% ,但其C -端的氨基酸同源性较高 ,尤其是C -端的 3个Cys是严格保守的。其中SL与GH的同源性 (30 8% )高于与PRL的同源性 (2 5 6 % ) ,GH和PRL的同源性最低 (2 4 1% )。
贾海波周莉石耀华桂建芳
关键词:斜带石斑鱼
银鲫3个肌球蛋白轻链基因cDNA的克隆与特征分析被引量:7
2003年
石耀华刘军桂建芳
关键词:银鲫肌球蛋白轻链克隆基因CDNA
Comparative studies on in vitro sperm decondensation and pronucleus formation in egg extracts between gynogenetic and bisexual fish被引量:8
2003年
A cell-free system based upon the egg extracts from gynogenetic gibel carp (Carassius auratus gibelio)or bisexual red common carp (Cyprinus carpio red variety) was developed to investigate developmentalbehaviors of the demembranated sperm nuclei. Both red common carp and gibel carp sperm nuclei coulddecondense fully and form pronuclei in the red common carp egg extracts. Gibel carp sperm nuclei couldalso decondense fully and form pronuclei in the gibel carp egg extracts, but red common carp sperm nucleicould not decondense sufficiently in the same extracts. The significant differences of morphological changeswere further confirmed by ultrastructural observation of transmission electron microscopy. The data furtheroffer cytological evidence for gonochoristic reproduction in the gynogenetically reproducing gibel carp. Inaddition, the sperm nuclei in vitro decondensation is dependent on the pH in the extracts, and the decon-densed efficiency is optimal at pH 7. However, no DNA replication was observed in the two kinds of eggextracts during the incubation period of the sperm nuclei. It is suggested that the egg extracts preparedfrom the gynogenetic gibel carp should be a valid in vitro system for studying molecular mechanism ongynogenesis and reproduction mode diversity in fish.
CHANG JIAN LI,JIAN FANG GUIState. Key Laboratory of Freshwater Ecology and Biotechnology,Wuhan Center for Developmental Biology,Institute of Hydrobiology,Chinese Academy of Sciences,Wuhan 430072,China
关键词:鱼卵雌性
雌核发育银鲫原肠期胚胎和尾芽期胚胎差异表达基因的呈现被引量:8
2005年
构建了雌核发育银鲫原肠期胚胎和尾芽期胚胎间的抑制性差减杂交cDNA质粒文库。对原肠期739个 和尾芽期816个PCR阳性克隆进行斑点杂交,得到72个原肠期和98个尾芽期斑点杂交阳性克隆。测序和基因 数据库比对结果表明:72个原肠期斑点杂交阳性克隆中,包括19个已知基因的cDNA片段和31个没有同源性的 cDNA片段;98个尾芽期斑点杂交阳性克隆中,包括52个已知基因的cDNA片段和37个没有同源性的cDNA片 段。采用虚拟Northern杂交和RT PCR证实了部分基因在银鲫胚胎发育过程中的差异表达。这些差异表达基因 的呈现为进一步研究银鲫胚胎发育的分子机制奠定了基础。
刘军石耀华尹隽桂建芳
关键词:银鲫抑制性差减杂交差异表达基因原肠胚
雌核发育银鲫四种孵化酶基因全长cDNA的克隆及其特征分析被引量:11
2003年
用抑制性差减杂交结合SMARTcDNA合成和RACE PCR技术 ,克隆得到雌核发育银鲫 (Carassiusauratusgibelio) 4种孵化酶基因的全长cDNA。 4种孵化酶基因分别被命名为GHE1、GHE2、GHE3、GHE4。序列分析表明 ,4种孵化酶基因cDNA的开放阅读框均为 795bp ,都编码 2 6 5个氨基酸。它们推断的编码氨基酸序列同源性在 79 6~95 1 %之间。种系分析表明 ,GHE1、GHE2、GHE3、GHE4的进化地位位于日本鳗鲡(Anguillajaponica)孵化酶和青 (Oryziaslatipes)孵化酶之间。不同发育时期胚胎的RT PCR分析表明 ,银鲫GHE1、GHE2、GHE3、GHE4 4种孵化酶基因从尾芽期到幼苗期都检测到表达 ,且GHE3和GHE4在神经胚期也检测到表达。各种组织的RT PCR表明 。
刘军石耀华尹隽桂建芳
关键词:银鲫雌核抑制性差减杂交RACE-PCR克隆
从灭活病毒诱导的培养细胞中鉴定鱼类抗病毒相关基因被引量:32
2003年
紫外线灭活的草鱼出血病病毒(GCHV)能诱导鲫鱼囊胚培养细胞(CAB)产生高滴度的干扰素并抵抗病毒入侵,其机制可能是通过诱导一组抗病毒相关基因的表达,而使寄主细胞建立起抗病毒状态.利用抑制性差减杂交技术,构建了灭活病毒诱导鱼类培养细胞基因差异表达的差减cDNA文库.从差减文库中筛选鉴定出272个差异cDNA片段,测序分析发现它们为69个基因,其中46个为已知基因的同源物,23个为未知的假定基因.已知基因包括I型干扰素信号通路的基因Statl和JakI,抗病毒基因Mx和Viperin,以及一系列干扰素激活基因或免疫相关基因.23个未知的假定基因多数具有富含Au成分的序列.虚拟Northern杂交和RT-PCR进一步证实这些基因在灭活病毒诱导的细胞中差异表达.意味着灭活GCHV不仅能诱导CAB细胞分泌干扰素,而且还导致一系列重要抗病毒相关基因或免疫相关基因的表达,揭示鱼类干扰素系统的信号转导途径和抗病毒机制与哺乳类基本相似.
张义兵张奇亚徐德全胡成钰桂建芳
关键词:灭活病毒鱼类免疫相关基因草鱼出血病病毒抑制性差减杂交
银鲫肌酸激酶M3-CK cDNA的克隆及其表达特征被引量:13
2003年
用抑制性差减杂交结合SMARTcDNA合成和RACE PCR技术克隆到雌核发育银鲫 (Carassiusauratusgibelio)肌酸激酶M 3 CK基因的全长cDNA。银鲫M 3 CKcDNA全长 15 5 1bp ,编码 380个氨基酸 ,与普通鲤鱼(Cyprinuscarpio)M3 CK的氨基酸序列同源性高达 95 %。种系分析表明 ,银鲫M3 CK与其它脊椎动物的肌肉型肌酸激酶聚为较近的一支 ,与鲤鱼的M 3 CK聚在一起 ,与脑特异型肌酸激酶及线粒体型肌酸激酶分歧较大。虚拟Northern杂交显示银鲫M 3 CK基因在胚胎发育中差异表达。RT PCR表明 ,银鲫M3 CK基因在成熟卵母细胞和胚胎发育早期可检测到少量的转录产物 ,在胚胎发育期间从肌肉效应期开始转录 ,并一直持续表达。组织RT PCR表明 ,银鲫M 3 CK基因只在心脏和肌肉表达 。
石耀华刘军夏建红桂建芳
关键词:银鲫肌酸激酶抑制性差减杂交
银鲫两个蛋白合成相关基因全长cDNA的克隆及其特征分析被引量:6
2003年
通过构建雌核发育银鲫心跳期SMARTcDNA质粒文库并从文库中随机挑选克隆测序 ,克隆得到银鲫翻译起始因子 3亚单位 2 (GTIF3 S2 )和翻译延伸因子 1亚单位α(GEF 1α)基因全长cDNA。银鲫翻译起始因子 3亚单位 2基因cDNA全长 12 80bp ,开放阅读框位于 117— 10 91bp之间 ,编码 32 5个氨基酸。其推断的氨基酸序列存在三个WD结构域。该基因在鱼类中为首次报道。银鲫翻译延伸因子 1亚单位alpha基因cDNA全长 1784bp ,开放阅读框位于82— 14 6 7bp之间 ,编码 4 6 2个氨基酸。RT PCR表明 ,这两个基因在成熟卵母细胞和胚胎发育早期可以检测到少量的转录产物 ,在胚胎发育期间从原肠期开始转录 ,并随着发育进程逐渐增强。成鱼组织中除精巢表达较弱外 ,其他组织都表达较强。同源分析比较表明 ,TIF3 S2和EF 1α在物种进化过程中具有高度的进化保守性 ,在物种间的同源性很高。因此 ,作者认为 ,这两个基因是研究物种间系统发育的优良对象。
刘军石耀华尹隽桂建芳
关键词:银鲫基因克隆CDNA
银鲫ZP3的表达特征和卵壳ZP3蛋白的分离被引量:2
2005年
克隆得到银鲫(Carassius auratus gibelio)ZP3基因全长cDNA,在体外表达出银鲫的ZP3融合蛋白,并制备出多抗血清;通过免疫印迹和RT-PCR分析,研究了银鲫ZP3在卵子发生过程中的表达特征和在早期发育胚胎中的状态变化。研究结果表明,银鲫ZP3的转录发生在卵黄发生以前,而ZP3蛋白的翻译起始于卵黄形成阶段,且随着卵母细胞进一步成熟,其含量不断增加。ZP3蛋白的存在状态在受精后和早期胚胎发育过程中发生了明显变化。在受精后5—30min期间,抽提液中原始的ZP3蛋白带迅速消失,取而代之的是分子量大约为90KD以及更高分子量的蛋白带;而在受精后80min和8—16胞期的胚胎抽提液中,二聚体和多聚体复合体蛋白带也相继消失。这种状态变化意味着ZP3蛋白在卵子受精后有可能与自身或其他蛋白共价结合转变成了二聚体和多聚体。接着,用获得的ZP3抗体作为检测指标,通过卵壳蛋白的凝胶分离,从卵壳中分离纯化出银鲫ZP3蛋白。
陈波郭葳桂建芳
关键词:银鲫纯化卵壳基因克隆基因表达
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