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上海市科委科研计划项目(05XD14029)
作品数:
2
被引量:13
H指数:2
相关作者:
任亚娜
高峰
杨洁
刘嬿
范华骅
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高跞
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树突状细胞外泌体免疫作用机制的初步研究
被引量:8
2008年
为了研究外泌体(exosome)作为肿瘤疫苗刺激免疫应答作用的机制,从正常人外周血单个核细胞诱导树突状细胞(DC)制备负载肿瘤抗原的DC外泌体(Dex),研究其在DC有无或DC成熟状态不同的情况下刺激T细胞增殖的能力;通过实验阻断DC外泌体上一些分子(CD11a、CD11b、CD11c、CD54、MFG-E8及CD83)后检测外泌体免疫学功能的改变;采用共聚焦显微镜检测DC对外泌体的吞噬作用,用流式细胞仪检测阻断外泌体表面分子对DC吞噬外泌体作用的影响。结果表明:在无DC存在或未成熟DC存在的情况下未成熟DC外泌体(imDex)和成熟DC外泌体(mDex)均不能有效地激活T细胞;不同的促成熟因子(LPS、TNF-α、CpG、CD40L)诱导成熟的DC所分泌的外泌体在数量上无明显差别,但在功能上有显著差异;Dex表面分子CD11a、CD11b、CD11c、CD54、MFG-E8及CD83与其功能有关,阻断这些分子均能不同程度地抑制Dex对T细胞刺激的作用;共聚焦显微镜和流式细胞仪检测表明阻断CD11a、CD54抑制了Dex靶向DC及被DC吞噬。结论:外泌体可以通过其表面分子靶向DC进而引起T细胞免疫应答。
任亚娜
范华骅
聂晓绚
高跞
杨洁
刘嬿
高峰
关键词:
树突状细胞
外泌体
肿瘤疫苗
分子机制
树突细胞分泌的exosomes生物学特性及功能的初步研究
被引量:6
2007年
目的建立树突细胞(DC)分泌的exosomes的制备方法,分析其生物学特性及其在抗肿瘤免疫中的功能。方法从正常人外周血单个核细胞中诱导未成熟DC(imDC),并使其负载K562细胞的抗原,然后用脂多糖(LPS)诱导DC成熟(mDC),通过超速离心结合膜超滤的方法分别提取imDC和mDC分泌的exosomes。检测exosomes的粒径并通过电子显微镜分析exosomes的形态,Western blot法检测exosomes的表面分子。比较mDC和imDC分泌的exosome8引起的针对K562抗原特异性T细胞的增殖、CD69的上调、细胞因子IFN.1的分泌及对肿瘤细胞的杀伤能力。结果制备的exosomes为碟状小囊泡,平均直径为72.3nm,表达CD80、CD86、HLA.DR、FasL、CD54和乳脂肪球-表皮生长因子-因子Ⅷ(MFG-E8)。与imDC相比,mDC分泌的exosomes CD80表达较高而MFG-E8的表达较低,并且在体外mDC分泌的exosomes能够更显著地引起特异性T细胞的增殖和免疫应答:在exosomes最适浓度下,T细胞增殖的吸光度值为O.50±0.01,激活T细胞的CD69上调,并且有(13.4±5.8)%T细胞扩增,(22.8±2.4)%的T细胞产生细胞因子IFN-1,对肿瘤细胞的杀伤率为(21.3±8.6)%。结论建立了简便、快速的exosomes分离纯化方法。
任亚娜
范华骅
高跞
聂晓绚
杨洁
刘嬿
高峰
关键词:
树突细胞
EXOSOMES
肿瘤免疫
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