国家自然科学基金(30171186) 作品数:7 被引量:86 H指数:6 相关作者: 张永清 黄高昇 王哲 冯骥良 郭英 更多>> 相关机构: 第四军医大学 第四军医大学西京医院 解放军第251医院 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 更多>> 相关领域: 医药卫生 更多>>
Cathepsin D及Fas ligand在苦参碱诱导急性T淋巴母细胞白血病JM细胞株凋亡中的表达研究 被引量:12 2003年 为了检测苦参碱诱导JM细胞发生凋亡过程中Cathepsin D、Fas-L的表达情况,应用光镜及电镜观察加药及未加药组细胞形态学变化。免疫细胞化学染色观察Cathepsin D在细胞内的表达及定位。半定量PCR检测Cathepsin D mRNA在转录水平的变化并用Western Blot检测Cathepsin D、Fas-L蛋白表达。结果显示0.6mg/ml加药组细胞培养72h,出现凋亡形态学改变。免疫细胞化学染色CathepsinD阳性信号主要位于呈凋亡形态学改变的胞浆和胞核内。其阳性细胞率在处理组明显高于对照组,处理组Cathepsin D的mRNA转录上调。处理组前体Cathepsin D(52kD)的条带亮度较对照组强,而切割后产物(32kD)亮度较对照组弱;Fas-L在处理组表达上调。提示:苦参碱诱导JM细胞的凋亡伴随Cathepsin D及Fas-L的表达改变。 冯骥良 黄高昇 郭英 梁蓉 王哲 王娟红 张晓晖 杨国荣 闫庆国关键词:CATHEPSIND 苦参碱 程序性细胞死亡 苦参碱诱导K562细胞分化方向的研究 被引量:21 2004年 [目的]体外研究苦参碱诱导白血病细胞株K562的分化方向。[方法]0.2mg/ml浓度苦参碱诱导K562细胞7天,观察苦参碱作用前后K562细胞形态学、细胞化学及细胞谱系特征性标记变化。[结果]K562细胞出现分化的形态特征,联苯胺染色及过碘酸—希夫反应(PAS)阳性细胞数分别由5%上升至31%,3%上升至35%,α鄄醋酸萘酚酯酶(α鄄NSE)、中性粒细胞碱性磷酸酶(NAP)阳性细胞数分别由36%下降至3%,22%下降至0,CD34、CD41表达阳性细胞数分别由1.1%上调至6.4%,23.8%上调至69.2%,CD68表达阳性细胞数由8.6%下调至1.1%,CD3、CD45RO、CD56及CD20表达阳性细胞数无明显变化。[结论]苦参碱是白血病细胞K562良好诱导分化剂,可诱导K562细胞向髓系非单核巨噬细胞方向分化。 张永清 黄高昇 刘红娟 曹云新 陈协群关键词:苦参碱 K562细胞 分化方向 基因芯片研究苦参碱诱导K562细胞基因表达谱变化 被引量:3 2004年 张永清 黄高昇 刘红娟 王哲关键词:苦参碱 K562细胞 基因芯片 苦参碱抑制JM细胞株增殖和诱导凋亡的研究 被引量:28 2003年 目的 :观察苦参碱对T细胞白血病细胞株JM的作用。方法 :Wright Giemsa染色及Hoechst 332 5 8荧光染色观察苦参碱作用JM细胞株前后形态学变化 ,电镜观察超微结构的改变 ;流式细胞仪分析不同剂量加药组第4天及 0 .8g·L-1加药组 1~ 4d细胞周期的改变 ;DNA琼脂糖凝胶电泳检测“梯状”DNA。结果 :第 3天起各加药组细胞形态学观察见典型凋亡特征改变 ,随时间延长更加明显 ;流式细胞仪检测第 4天各组均可见亚二倍体峰。0 .1,0 .2 ,0 .4 ,0 .6 ,0 .8g·L-1各处理组凋亡细胞比率分别为 3.1% ,2 .5 % ,13.3% ,4 0 .4 % ,4 8.6 % ,对照组为1.4 % ;各处理组S期细胞比率分别为 2 8.9% ,2 6 .1% ,2 7.7% ,2 0 .9% ,14 .2 % ,对照组为 30 .4 % ;各处理组G1期细胞比率分别为 6 3.2 % ,6 7.5 % ,6 8.1% ,75 .2 % ,83.6 % ,对照组为 4 1.8%。 0 .8g·L-1加药组 1~ 4d ,G1期细胞比率分别为 4 5 .5 % ,77.3% ,77.2 % ,83.6 % ;S期细胞比率分别为 2 8.6 % ,17.5 % ,19.1% ,14 .2 % ;凋亡细胞比率分别为 3.0 % ,3.7% ,9.1% ,4 8.6 %。DNA电泳 :0 .4 ,0 .6 ,0 .8g·L-1组见DNA“梯形”图谱 ,0 .1,0 .2g·L-1及对照组未见。结论 :苦参碱可以抑制JM细胞的DNA合成 ,造成G1期阻滞 ,从而抑制了细胞的增殖。同时 。 冯骥良 黄高昇 张永清 王哲 张晓晖 郭英 闫庆国关键词:白血病 苦参碱 药理学实验 棉酚对髓系白血病细胞凋亡的影响 被引量:9 2006年 目的:本实验拟通过棉酚对3种经典髓系白血病细胞系的研究,探索其治疗白血病的可能。方法:用细胞培养、四唑盐比色试验、形态学、DNA电泳等方法观察棉酚对白血病细胞的凋亡效应。结果:棉酚在浓度>6μmol/L时可选择地抑制白血病细胞的增殖、促进其凋亡,并表现出浓度依赖效应。结论:棉酚对髓系白血病细胞具有选择杀伤作用,表明其可能是一种高效低毒的抗白血病药物。 王文清 黄高昇 梁蓉 张伟平 王娟红 李袁飞 刘宇宏 白庆咸 陈协群关键词:棉酚 髓系白血病 增殖 凋亡 药物作用 cDNA表达点阵研究苦参碱诱导K562细胞凋亡基因表达的改变 被引量:11 2002年 K562 cells can be induced to apoptosis by matrine, but the mechanism remains unknown. cDNA expression array was applied to study genes’ expression change of K562 cells induced by matrine. Expression of 16 genes was decreased, 11 of them belonged to genes of cyclins or CDKs, 4 of them were anti apoptosis genes, and expression of 19 genes was increased, 11 of them were proapoptotic genes. 张永清 黄高升 冯骥良 王哲 杨国荣关键词:苦参碱 K562细胞 凋亡 基因变化 白血病 基因芯片方法研究苦参碱抗白血病细胞增殖机制 被引量:16 2003年 目的 探索苦参碱抗白血病细胞增殖的机制。方法 提取苦参碱诱导前后白血病细胞株K5 62总RNA ,经逆转录合成cDNA探针后与人的细胞周期相关基因芯片杂交 ,用ESTblot软件分析杂交结果。结果 经苦参碱诱导后K5 62细胞 111个周期相关基因中 ,有CCNB1,cyclinD1,PCNA ,TFDP1等 15个基因表达显著下调 ,CDKN2D ,E2F5等 5个基因表达上调 ,Westernblotting方法证实了PCNA基因表达改变。结论 苦参碱的抗白血病细胞增殖作用与PCNA ,P19 INK4D等多个细胞周期相关基因表达变化有关。 张永清 黄高升 王哲 冯骥良 郭英关键词:白血病 苦参碱 细胞增殖 基因芯片