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广东省科技计划工业攻关项目(20118050300007)
作品数:
1
被引量:2
H指数:1
相关作者:
刘路
韦曦
陈丽虹
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相关机构:
中山大学
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发文基金:
广东省科技计划工业攻关项目
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相关领域:
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2013
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干扰八聚体转录结合因子4A对人牙髓细胞增殖与多向分化能力的影响
被引量:2
2013年
目的研究八聚体转录结合因子4A(octamer—bindingtranscriptionfactor4A,Oct4A)在人牙髓细胞(humandentalpulpcells,DPC)的表达及对细胞增殖、成牙本质向和成脂向分化能力的影响。方法实时荧光定量PCR(reahimequantitativePCR,RT—qPCR)技术检测健康人DPC中Oct4A的表达;合成特异性针对Oct4A的siRNA(Oct4A干扰组),50nmol/LsiRNA经脂质体Lipofectamine。TMRNAiMAX转染DPC24、48、72、96和120h,以无义序列一siRNA转染的DPC作为阴性对照,细胞计数试剂盒法检测细胞增殖情况、RT—qPCR检测OctdA的mRNA水平以选取最佳转染时间;茜素红染色检测成牙本质诱导DPC14d后矿化结节形成情况,油红0染色检测成脂诱导DPC14d后脂滴形成情况,RT—qPCR技术检测成牙本质向分化标志物牙本质涎磷蛋白(dentinsial叩hosph叩rofein,DSPP)和成脂向分化标志物脂蛋白脂酶(1ipoproteinlipase,LPL)的mRNA表达变化;蛋白质印迹法检测DSPP和LPL的表达。结果Oct4A在第3代DPC中表达最高(2.10±0.10),为第1代DPC的2.10倍(与第1、7代相比P=0.000),之后随细胞传代表达下降;Oct4A—siRNA转染DPC72h,干扰效率达峰值(69.7%);与正常细胞组及阴性对照组相比Oct4A干扰组细胞增殖能力显著下降,矿化结节和脂滴形成显著减少(P=0.000),分化标志物DSPP和LPL表达量显著下降(P=0.000)。结论瞬时干扰牙髓细胞中Oct4A的表达可以降低细胞增殖和成牙本质向、成脂向分化能力。
伍丽静
刘路
陈丽虹
韦曦
关键词:
细胞增殖
细胞分化
牙髓细胞
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