兵团博士基金(2011BB018)
- 作品数：10 被引量：41H指数：4
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- 孵育时间对UV-C辐射处理离体葡萄叶片茋类物质含量和种类的影响被引量：4
- 2013年
- 【目的】茋类物质是一类重要的次生代谢产物,其在葡萄属植物中承担了重要的病理及生理作用。以往研究发现UV-C照射会引起茋类物质白藜芦醇含量升高,研究UV-C照射后离体叶茋类物质含量与时间的变化关系及与叶龄的关系。【方法】采用不同叶龄的红地球葡萄离体叶片为材料,应用HPLC检测UV-C处理后的不同孵育时间叶片茋类物质的变化规律,以及叶龄对诱导效果的影响特征,同时利用RT-PCR技术对其生物合成途径限速酶基因表达规律进行研究。【结果】UV-C处理后随暗孵育时间的增加,老叶中的茋类物质比率及种类变化较大。诱导后24 h时白藜芦醇苷达到376μg/g,白藜芦醇高达258μg/g,紫檀茋515μg/g,ε-viniferin达到22μg/g,分别是空白组的1.6、50、100以及62倍。【结论】在UV-C处理离体葡萄叶后,叶龄和暗孵育时间对叶片的茋类物质的积累有重要的影响。老叶在UV-C辐射后24 h茋类物质的种类最多,总含量较高。
- 颜欢张波赵文彬赵文彬杨晓燕黄方爱
- 关键词：UV-C叶龄
- 原头蚴及囊液促进小鼠脾细胞产生IL-2被引量：3
- 2016年
- 目的观察细粒棘球绦虫幼虫原头蚴及囊液对体外培养小鼠脾细胞产生IL-22的影响。方法取Balb/c小鼠脾细胞,分别加入不同浓度原头蚴或囊液共培养48 h,检测上清液IL-22表达量及细胞IL-22 m RNA的相对表达量。同浓度原头蚴或囊液分别在0、12、24、36和48 h收集细胞,流式细胞术检测CD4+IL-22+T细胞比例变化。RPMI 1640培养基与脾细胞共培养设为对照组。结果与对照组相比,ELISA和q RT-PCR检测显示在原头蚴为1 000/ml和囊液蛋白质量浓度为2.05 mg/ml时脾细胞产生IL-22增加;流式细胞术检测原头蚴组及囊液组CD4+IL-22+T细胞比例逐渐增加。结论原头蚴及囊液均可促进小鼠脾细胞产生IL-22增加,提示IL-22可能参与宿主防御细粒棘球蚴感染。
- 蒋红群方海瑞陈聪哲董丹陈雪玲
- 关键词：原头蚴囊液脾细胞IL-22
- 原头蚴体外刺激巨噬细胞高表达PPARα/γ并调节其极化被引量：2
- 2017年
- 目的:探讨原头蚴与RAW264.7共培养后PPARα/γ的表达水平以及对巨噬细胞极化的作用。方法:原头蚴与RAW264.7共培养12、24、36、48、72 h取细胞。用qRT-PCR的方法检测RAW264.7细胞PPARα/γ的表达水平,用qRTPCR的方法检测巨噬细胞M1型相关因子TNF-α、MCP-1、IL-1β和M2型相关因子Arg-1、TGF-β、Fizz-1的水平,ELISA的方法检测Arg-1和MR的表达量。结果:RAW264.7细胞PPARα/γ的表达水平和M2型相关因子Arg-1、TGF-β、Fizz-1和MR均逐渐升高,72 h表达最高(P<0.05);巨噬细胞M1型相关因子TNF-α、MCP-1、IL-1β先升高后降低(P<0.05),Arg-1和MR的蛋白水平也逐渐增高。结论:原头蚴与RAW264.7共培养后PPARα/γ的表达逐渐升高,可能促进巨噬细胞由M1型向M2型极化,从而在虫体免疫逃逸中发挥一定作用。
- 陈聪哲董丹方海瑞蒋红群侯隽杨琨郭峰陈雪玲
- 关键词：原头蚴巨噬细胞极化
- 葡萄芪类物质的研究进展被引量：4
- 2012年
- 芪类物质(stilbenes),属于植保素(Phytoalexin),因其具有抑菌、抗氧化、抗肿瘤等多种生物活性,越来越受到人们的重视。而作为天然芪类化合物的代表的白藜芦醇也成为最近研究的热点。本文就芪类化合物的最新研究进展情况进行综述,以期为进一步研究该类成分提供科学依据。
- 黄方爱张波杨晓燕颜欢陈韩英郑秋生
- 关键词：白藜芦醇葡萄
- H_2O_2对葡萄离体叶片白藜芦醇的诱导作用被引量：7
- 2012年
- 【目的】葡萄叶片白藜芦醇含量较虎杖根含量低,难以作为药用提取用途,研究采用诱导剂升高葡萄离体叶片中白藜芦醇的含量。【方法】实验采用H_2O_2对离体红地球葡萄叶片进行诱导,采用薄层及高效液相色谱法分析白藜芦醇的含量变化,并使用RT-PCR方法分析芪合酶基因(STS)的表达量变化。【结果】H_2O_2对离体叶片芪类物质具有显著的诱导作用,诱导白藜芦醇的积累呈现显著的量时依赖性;5%H_2O_2处理48 h后叶片白藜芦醇含量可提高15倍以上,鲜重达到263μg/g。【结论】H_2O_2可以作为葡萄离体叶片白藜芦醇的有效诱导剂。
- 黄方爱张波杨晓燕颜欢陈韩英郑秋生
- 关键词：白藜芦醇过氧化氢葡萄叶片
- 适合转录组测序的葡萄叶片总RNA试剂盒提取法的改进被引量：13
- 2013年
- RNA试剂盒法是获取植物高质量RNA样品的常用技术,针对3种常见RNA提取试剂盒在红地球葡萄叶样品RNA提取效果进行评估和优化,以期找到适合红地球葡萄叶片RNA表达谱测序需求的高质量RNA提取策略。试验依据3种试剂盒推荐时间和条件进行RNA提取,并对时间等条件进行优化,比对了优化前后RNA质量。结果显示,试剂盒经优化后的方法提取的RNA收率高,完整性好,OD260/OD280在1.8-2.2之间,OD260/OD230大于2,28S与18S条带清晰完整,RNA-Seq测序质量及基因覆盖度符合要求。在红地球葡萄叶片上的RNA提取结果表明,延长提取试剂与样品的接触时间操作可以显著提高RNA提取质量(纯度/完整性)。
- 杨晓燕张波黄方爱黄方爱颜欢李月荣
- 关键词：红地球葡萄RNA提取
- 表面活性剂对H_2O_2诱导葡萄叶白藜芦醇含量升高的增效作用被引量：2
- 2015年
- 【目的】H2O2水溶液可以诱导葡萄叶片中白藜芦醇含量升高,前期研究发现喷洒法诱导效果有限,与叶表面与诱导剂接触不充分有关。研究使用H2O2与表面活性剂SDS、TX-100混合以喷洒的方式诱导葡萄离体叶片,以期改善并提升诱导效果。【方法】以红地球葡萄叶片为试验材料,以表面活性剂SDS、TX-100与H2O2溶液为供试材料。采用H2O2处理离体葡萄叶片,宏观荧光法定性检测白藜芦醇,HPLC法检测白藜芦醇含量的变化,DAB染色法检测氧化胁迫程度。【结果】H2O2溶液处理离体葡萄叶片,可使离体叶片中H2O2含量升高并造成氧化损伤,同时使叶片中白藜芦醇含量升高。表面活性剂SDS、TX-100显著增加了H2O2的诱导作用,也带来了氧化损伤程度加重。以TX-100诱导组含量最高,达到(85.88±0.34)μg/g。【结论】表面活性剂TX-100、SDS对H2O2诱导葡萄叶中白藜芦醇含量有增效作用。
- 龚徐张波王晓琴王晓琴陈韩英
- 关键词：表面活性剂白藜芦醇H2O2诱导高效液相
- 原头蚴通过刺激巨噬细胞分泌KLF4促使其向M2分化被引量：6
- 2016年
- 目的探讨原头蚴可能通过刺激巨噬细胞分泌KLF4而促使其向M2分化。方法原头蚴与RAW264.7细胞共培养,分别在12、36、48、84 h收集细胞和培养上清液,q RT-PCR检测KLF4、M1(Arg-1,Fizz-1,MR)、M2(TNF-α、IL-6、MCP-1)巨噬细胞因子的表达;ELISA检测相关因子分泌的含量。结果实验组(84 h)的KLF4 m RNA水平较对照组明显升高。随着感染时间延长,M2巨噬细胞的m RNA表达量及分泌含量呈上升趋势,M1巨噬细胞的m RNA表达量及分泌含量呈先升后降趋势。结论原头蚴刺激RAW264.7细胞,可能通过分泌某些抗原、蛋白,诱导巨噬细胞KLF4高表达而促使其向M2分化,抑制巨噬细胞的功能,从而逃逸宿主的免疫杀伤。
- 董丹陈聪哲方海瑞蒋红群侯隽郭峰陈雪玲
- 关键词：原头蚴KLF4巨噬细胞
- 葡萄叶片中提取总RNA的三种方法比较被引量：9
- 2013年
- 采用试剂盒法、热酚法和LiCl沉淀法3种方法提取葡萄叶片总RNA,通过琼脂糖凝胶电泳和Agilent 2100计检测总RNA的完整性和提取纯度。对红地球葡萄叶片总RNA提取方法做比较,以得到完整的、高质量的葡萄RNA。结果表明:LiCl沉淀法提取的RNA收率高,完整性好,OD260/OD280均在1.80～2.00,纯度高,28S、18S条带清晰完整。可以满足后续分子生物学的研究。
- 杨晓燕张波黄方爱黄方爱颜欢
- 关键词：总RNA
- ε-葡萄素抑制bFGF诱导血管新生作用分析被引量：2
- 2014年
- 目的：葡萄素（viniferin）是一类寡聚芪类物质,存在于葡萄等植物中,本文探讨ε-葡萄素（ε-viniferin）对血管新生是否具有抑制作用.方法：MTT比色法测定ECV304细胞密度5×104/mL条件下ε-viniferin浓度分别为0,10,20,30,40,50 μmol·L^-1时24 h和48 h的增殖抑制率;体外模型以0.5,1,5,10 mol·L^-1ε-葡萄素的含药血清组和空白血清组培养碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）诱导的人脐静脉内皮细胞系ECV304,用细胞划痕法和重建基底膜法测定药物对细胞迁移作用和内皮细胞拟管腔形成的影响;体内模型,用含5,10 mol· L^-1ε-葡萄素的基质胶,Matrigel plug法测定药物对bFGF诱导体内新生血管的影响;通过酶联反应法（ELISA法）检测5,10,20 mol·L^-1药物处理24 h的黑色素瘤细胞系（B16F10）培养上清液中血管内皮生长因子（VEGF）和bFGF浓度.结果：20 μmol· L^-1以上的ε-葡萄素能有效抑制ECV304细胞的增殖,0.5 ～10μmol· L^-1的ε-葡萄素能抑制bFGF诱导的ECV304细胞迁移,在1～ 10 μmol· L^-1ε-葡萄素的作用下均可抑制bFGF诱导的ECV304细胞管腔形成,5 ～ 10 μmol· L^-1ε-葡萄素在体内Matrigel Plus模型也表现出抑制血管新生的活性.5～20 μmol·L^-1的ε-葡萄素能抑制黑色素瘤细胞B16F10细胞分泌bFGF和VEGF,其抑制能力强于紫檀芪.结论：ε-葡萄素可以抑制血管的新生.
- 刘景磊陈韩英王晓琴陈虹龚福恺张波
- 关键词：血管新生碱性成纤维细胞生长因子
