重庆市卫生局医学科研项目(2009-2-122)
- 作品数：2 被引量：5H指数：1
- 相关作者：徐发良肖觉徐发良张海伟周琦更多>>
- 相关机构：重庆市肿瘤研究所重庆市肿瘤医院解放军第452医院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局医学科研项目重庆市科技攻关计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 利用细胞-指数式富集的配体系统进化技术筛选肿瘤细胞DNA适配子
- 2013年
- 目的建立一种通用的细胞-指数式富集的配体系统进化(Cell-SELEX)技术平台,用于筛选特异性结合于肿瘤细胞的DNA适配子。方法采用PCR法建立随机双链DNA(dsDNA)寡核苷酸文库,用卵白素包被的琼脂糖珠从dsDNA库分离单链DNA(ssDNA)文库;以体外培养的肿瘤细胞作为正筛选的靶标,以相同组织来源的正常对照细胞作为负筛选的靶标,消减法进行Cell-SELEX筛选和PCR扩增以获取DNA适配子;流式细胞仪监测适配子的富集效率(亲和力);采用常规分子生物学技术进行适配子的克隆、测序和序列分析。结果成功建立了ssDNA库,经过12轮Cell-SELEX筛选,获得了特异性结合于肿瘤细胞的DNA适配子;挑选120个阳性克隆送测序,鉴定出21个适配子,采用NCBI网站提供的Blastn程序进行精确比对未发现相似序列。结论本实验建立的技术平台可在较短时间内获取特异性结合于特定肿瘤细胞的DNA适配子。
- 徐发良周琦匡毅陈小乐张海伟顾长国
- 关键词：适配子肿瘤靶向治疗
- SELEX技术的靶标范围拓展被引量：5
- 2012年
- 靶标范围的不断拓展是指数式富集的配体系统进化(SELEX)技术和其他随机文库技术(如噬菌体表面展示技术等)的显著特征之一。经过20多年的发展,SELEX的靶标已经拓展到包括金属离子、各种有机小分子、药物、蛋白质等生物大分子、致病微生物、活细胞和组织等在内的多种形式,以细胞和组织为靶标的SELEX筛选策略在肿瘤靶向诊断和治疗的研究中也得到了初步应用,本文综述了SELEX技术的靶标拓展情况。
- 徐发良肖觉
- 关键词：靶标适配体
