家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金(microRNA)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
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- 发文基金：家畜疫病病原生物学国家重点实验室开放基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 表达miR-150shRNA细胞株的初步建立被引量：1
- 2009年
- 为了探讨融合microRNA重组干扰载体构建的方法,为今后mi R-150对猪瘟病毒(CSFV)潜在的调控进行研究,利用生物信息学技术筛选出mi R-150,设计并合成了表达mi R-150的两条shRNA序列的DNA单链,将其退火后与干扰载体pGenesil-1连接,构建了含有mi R-150shRNA和绿色荧光蛋白基因的重组干扰质粒pGene-mi R-150shRNA,提取并纯化质粒后,采用脂质体法将重组质粒转染PK-15细胞,用G418抗性筛选。经过酶切鉴定和测序鉴定,表明成功构建了重组干扰质粒pGene-mi R-150shRNA,并在转染24 h后即可检测到绿色荧光。本研究成功得到稳定表达mi R-150的细胞株,所建的方法可以应用于各种microRNA的构建。
- 代晨邓文张彦明
- 关键词：猪瘟病毒发夹RNA转染
