重庆市卫生局科研项目(01-1-018)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：龚建平刘长安简华刚梅英丁雄更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院四川大学华西医院泸州医学院更多>>
- 发文基金：重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 感染性胆汁中内毒素的变化及意义被引量：6
- 2006年
- 目的通过检测胆管结石病人胆汁中内毒素、内皮素(ET-1)和降钙素基因相关肽(CGRP)的浓度及血浆 ALT、AST、TB 含量,探讨内毒素在胆管结石胆道感染病人肝脏损伤中的作用。方法选择胆管结石病人50例,按临床感染程度分成择期手术组和急症手术组。另选择单纯性胆囊结石病人20例为对照组。术中采取胆总管胆汁,检测胆汁内毒素、ET-1、CGRP 和血浆 ALT、AST、TB 的含量。结果急症手术组胆汁中内毒素、ET-1、CGRP 含量和血浆 ALT、AST、TB 的含量明显高于择期手术组和对照组。伴随胆道感染程度加重,胆汁中内毒素含量升高,胆汁中 ET-1、CGRP 含量也升高,肝功能损害加重。结论胆道感染时,胆管结石病人胆汁中内毒素对肝胆系统合成和释放 ET-1、CGRP 有强烈的刺激作用。胆汁中 ET-1和 CGRP 的生理平衡失调,在胆管结石胆道感染病人肝脏损伤中可能起重要作用。
- 李波夏先明刘长安龚建平
- 关键词：内毒素胆汁肝脏损害
- 携多药耐药基因1反义RNA重组腺病毒逆转肝癌多药耐药细胞的实验研究被引量：3
- 2007年
- 目的探讨携带多药耐药基因1（multidrug resistance gene 1，MDRI）反义RNA重组腺病毒载体在裸鼠体内逆转肝癌多药耐药细胞HepG2／阿霉素（adriamycin，ADM）的疗效及作用机制。方法构建携带AFP和asmdrl的重组腺病毒载体Adeno-asmdrl，ADM分级诱导肝癌细胞HepG2为多药耐药细胞HepG2／ADM，建立HepG2／ADM裸鼠皮下移植瘤模型，Adeno-asmdrl局部注射，观察移植瘤的体积、透射电镜检测移植瘤组织细胞凋亡、RT-PCR检测MDRI转录水平，评价Adeno-asmdrl的抗肿瘤活性。结果在Adeno—asmdrl＋ADM组，移植瘤体积无增大，而PBS组、ADM组体积明显增大;RT-PCR检测移植瘤细胞1周和4周MDRImRNA水平，ADM组无明显变化，Adeno-amdrl＋ADM组在4周时MDRI转录水平仅为单纯ADM组的20％，经ADM＋Adeno-asmdrl处理组，可见凋亡增加，ADM组和PBS处理组的裸鼠移植瘤组织中出现少量或没有凋亡。结论携带MDRI反义RNA重组腺病毒部分逆转HepG2／ADM的多药耐药，阻止肿瘤生长，下调MDR1转录水平，导致肿瘤细胞凋亡。
- 梅英石毓君丁雄吴传新简华刚龚建平刘长安
- 关键词：基因MDR腺病毒反义
- 靶向重组腺病毒载体逆转肝癌细胞多药耐药的实验研究被引量：1
- 2009年
- 目的探讨携带多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,mdr1)反义RNA重组腺病毒载体靶向逆转甲胎蛋白阳性(AFP+)的肝癌多药耐药细胞HepG2R的疗效及作用机制。方法将携带AFP启动子和EGFP基因的重组腺病毒载体Adeno-EGFP转染人正常肝细胞LO2(AFP-)、人宫颈癌细胞HeLa(AFP-)及HepG2(AFP+)细胞,检测EGFP基因在各细胞的转录水平,证实重组腺病毒载体的靶向性;将携带AFP启动子和mdr1基因反义核苷酸片段的重组腺病毒载体Adeno-asmdr转染HepG2R细胞和HepG2R裸鼠皮下移植瘤模型,检测Adeno-asmdr在体外和体内逆转HepG2R的活性。结果EGFP基因在AFP阳性的HepG2细胞可得到显著的转录,而在LO2细胞和HeLa细胞,其转录和表达量极少,显示了该载体的良好转录活性以及靶向特异性;Adeno-asmdr转染HepG2R细胞后,mdr1转录水平下降;Rhodamine123在细胞内聚集量有所下降;在裸鼠皮下移植瘤实验中,经Adeno-asmdr+ADM处理组,移植瘤体积无增大,TUNEL法检测移植瘤内凋亡细胞增加,而经PBS和ADM处理组移植瘤体积明显增大(P<0.05),ADM处理组移植瘤中出现少量的凋亡细胞,而PBS处理组移植瘤未见凋亡细胞。结论实验构建的Adneo-asmdr重组腺病毒载体可在AFP阳性HepG2R细胞内特异靶向性表达目的基因,有效降低mdr1基因产物P-gp170的表达,从而达到对HepG2R细胞MDR的逆转作用;结合化疗药物的作用,可以导致裸鼠皮下移植瘤细胞凋亡增加,阻止瘤体生长。
- 梅英杜伟丁雄陈晓光简华刚龚建平刘长安
- 关键词：肝癌多药耐药腺病毒反义技术多药耐药基因1
- 重组腺病毒载体携带多药耐药基因1反义RNA靶向逆转肝癌细胞多药耐药被引量：2
- 2009年
- 目的探讨携带多药耐药基因1（multidrug resistance gene 1，mdr1）反义RNA的重组腺病毒载体靶向逆转甲胎蛋白阳性（AFP＋）的肝癌多药耐药细胞HepG2R的疗效及作用机制。方法分别构建携带AFP启动子和mdr1基因反义核苷酸片段的重组腺病毒载体Adeno-asmdr及携带AFP启动子和增强绿色荧光蛋白基因的重组腺病毒载体Adeno-EGFP，将Adeno—EGFP转染人正常肝细胞L02（AFP-）、人宫颈癌细胞HeLa（AFP-）及HepG2（AFP＋）细胞，检测增强绿色荧光蛋白基因在各细胞的转录水平；将Adeno-asmdr转染HepG2R细胞，Western blot检测不同时间P—gp170的表达，末端脱氧核苷酸转移酶介导的脱氧三磷酸尿苷缺口末端标记法检测HepG2R细胞凋亡，流式细胞术检测HepG2R细胞在不同药物作用下细胞周期、凋亡率。结果增强绿色荧光蛋白基因在AFP阳性的HepG2细胞可得到显著转录，而在L02细胞和HeLa细胞，其转录减少，显示了该载体的良好转录活性以及靶向特异性。Adeno—asmdr转染HepG2R细胞后，HepG2R细胞P—gp170表达明显减弱，HepG2R细胞凋亡增加，HepG2R细胞对多种化疗药物的耐受能力明显下降，细胞出现显著的周期阻滞，大量细胞被阻滞于S期和G0／M期，凋亡细胞比例增加。结论实验构建的Adneo—asmdr重组腺病毒载体可在AFP阳性HepG2R细胞内特异靶向性表达目的基因，并可有效降低mdr1基因产物P—gp170的表达，从而达到对HepG2R细胞多药耐药的逆转作用。
- 梅英石毓君丁雄简华刚龚建平刘长安陈晓光
- 关键词：腺病毒反义技术多药耐药基因1
