浙江省自然科学基金(Y506132)
- 作品数：2 被引量：12H指数：1
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- λ-卡拉胶寡糖对人脐静脉内皮细胞的增殖抑制作用及凋亡相关基因表达被引量：1
- 2008年
- 为了探讨λ-卡拉胶寡糖(λ-carrageenan oligosaccharides,λ-CO)在体外抑制人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖作用及其分子机制,采用MTT法检测λ-CO对HUVEC存活率的影响,通过流式细胞技术检测λ-CO对HUVEC增殖周期的影响,测定细胞凋亡率,检测用药前后活性半胱氨酸蛋白酶-3(caspase-3)的变化。同时采用半定量RT-PCR方法检测凋亡相关基因mRNA的表达情况。MTT检测结果显示,λ-CO在高浓度(1 mg.mL-1)能明显抑制细胞增殖。流式细胞仪检测到λ-CO作用HUVEC后,出现早期凋亡细胞,且凋亡呈浓度和时间依赖性;对细胞增殖周期的检测结果显示,与对照组相比,λ-CO作用后G1期细胞比例减少,S期比例增加,并出现凋亡峰;活化的caspase-3比例亦随用药浓度的加大而增加。RT-PCR检测发现0.3 mg.mL-1λ-CO作用人脐静脉内皮细胞12、24和36 h后,细胞TNFα、p53、caspase-8、caspase-3的mRNA表达上调。表明λ-CO能剂量依赖性地诱导HUVEC细胞凋亡,并引起HUVEC的S期阻滞,其机制可能与促进TNFα、p53、caspase-8、caspase-3等基因的转录,使细胞内活化的caspase-3水平增加有关。
- 宓婷艳严小军陈海敏林晶王峰徐炜烽
- 关键词：脐静脉内皮细胞TNFCASPASE-8CASPASE-3
- λ-卡拉胶寡糖体外对血管生成的抑制作用被引量：11
- 2007年
- 为探讨λ-卡拉胶寡糖体外对血管生成的抑制作用,采用鸡胚尿囊膜模型(CAM)观察λ-卡拉胶寡糖对CAM血管发育的抑制,发现该寡糖可明显抑制CAM微血管生成,在200μg.egg-1时,抑制率达54.90%。随后采用MTT法测定λ-卡拉胶寡糖对人脐静脉内皮细胞(HUVEC)增殖的影响,发现该寡糖的细胞毒作用在不同的细胞间具有选择性,对HUVEC的抑制最强,高浓度时(1 mg.mL-1)能明显抑制其增殖,但低浓度(<250μg.mL-1)对细胞几乎无毒。对寡糖的细胞迁移和侵袭抑制作用进行检测,并测定其对HUVEC表达基质金属蛋白酶-2(MMP-2)的影响。结果表明,λ-卡拉胶寡糖能有效减缓HUVEC的迁移、侵袭能力,并具有抑制HUVEC中MMP-2表达的作用。该研究说明λ-卡拉胶寡糖通过抑制内皮细胞的增殖、细胞侵袭和迁移达到血管生成抑制的作用。
- 陈海敏严小军王峰林晶徐炜烽
- 关键词：Λ-卡拉胶寡糖血管生成鸡胚尿囊膜脐静脉内皮细胞
