国家自然科学基金(30270060)
- 作品数：7 被引量：154H指数：6
- 相关作者：崔治中姜世金张志王增福周蛟更多>>
- 相关机构：山东农业大学北京市农林科学院扬州大学更多>>
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- 在抗体免疫选择压作用下鸡J亚群白血病病毒gp85基因的变异被引量：18
- 2006年
- 将鸡J亚群白血病病毒(ALV—J)中国分离株NX0101接种到已长成单层鸡胚成纤维细胞(CEF)的六孔细胞培养板上,分为A组(培养基中无抗体)和B组(培养基中含抗体),每组设3个独立的传代系列,分别对第10代、20代和30代病毒的囊膜糖蛋白基因(env)进行了克隆和测序,序列比较结果表明:原始病毒与无抗体A组不同传代系列的不同代次之间gp85氨基酸序列同源性为97.7%-99.7%;而原始病毒与有抗体B组不同传代系列的不同代次之间gP85的氨基酸序列同源性为93.8%-96.1%.对gp85高变区上有义突变(NS)与沉默突变(S)的比例计算分析表明,无抗体A组三个传代系列在110-120,141-151和189-194aa这3个高变区域上NS/S的值分别为2(8/4),1(3/3)和1.3(4/3);有抗体B组三个传代系列在110—120,140—150和188—193aa这3个高变区域上NS/S的值分别为4.1(13/3),4.7(14/3)和3.3(11/3).该结果是在严格实验条件下显示特异性抗体这一免疫选择压对gp85基因变异的影响.
- 王增福崔治中
- 关键词：特异性抗体GP85基因
- 我国1999-2003年间ALV-J野毒株gp85基因变异趋势被引量：6
- 2005年
- 通过接种鸡胚成纤维细胞(CEF)、间接免疫荧光试验(IFA)和聚合酶链式反应(PCR),连续五年从全国各地的送检病料中分离到14株J亚群白血病病毒(ALV-J).为了动态观察ALV-J囊膜表面结构蛋白(GP85)的变异情况,对这14株野毒株的囊膜糖蛋白基因(env)进行了克隆和测序,将它们与HPRS-103株的GP85的氨基酸序列进行了比较,结果表明:ALV-J的囊膜表面结构蛋白发生了很大的变异,而且这些变异主要集中在高变区hr1、hr2和vr3;这些野毒株GP85的氨基酸序列的同源性在86.6%～100%之间(从同一鸡场中分离到的两株ALV-J即BJ00302与BJ0303的同源性为100%,其它毒株之间的同源性均小于100%);有义突变与沉默突变的比例显示这3个高变区极有可能是免疫选择压作用的位点.
- 王增福崔治中张志吴永平
- 关键词：J亚群白血病病毒GP85基因
- 网状内皮组织增生症病毒中国分离株HA9901全基因组核苷酸序列的测定与分析被引量：11
- 2005年
- 以网状内皮组织增生症病毒(REV)中国分离株HA9901感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)基因组DNA作为其前病毒基因组模板,根据已发表序列设计合成6对引物,经PCR扩增出6段连续的、相互部分重叠的DNA片段和闭合环形前病毒两末端LTR的连接区段,并分别连入T载体进行克隆、测序.用DNAstar软件对测序结果进行剪辑和拼接,完成了REV第一个中国分离株HA9901前病毒全基因组核苷酸序列.在从截然不同的地区、不同年份、不同禽类分离到的毒株中,将该序列与另两个毒株已完成的全基因组序列的比较表明,REV的整个基因组相对保守,各毒株间对应基因的同源性都在92%以上.其中,从我国鸡体分离到的野毒株HA9901与美国鸡源分离株FA在整个基因组上的同源性均显著高于美国的鸭源SNV株.
- 王玉崔治中姜世金
- 关键词：网状内皮组织增生症病毒同源性比较网状内皮组织增生症中国分离株病毒基因组鸡胚成纤维细胞
- 从J亚群禽白血病肿瘤中检测出禽网状内皮组织增生症病毒被引量：78
- 2004年
- 将表现为典型 J亚群禽白血病肿瘤的病料分别接种于鸡胚成纤维细胞和 DF1细胞 ,采用间接荧光抗体试验(IFA)和 PCR方法 ,从这些肿瘤病料中分离和鉴定出 8株 J亚群禽白血病病毒 (AL V- J)。对证明感染了 AL V- J的细胞继续培养 ,并用禽网状内皮组织增生症病毒 (REV)的特异性单抗及引物做 IFA和 PCR,在 8株 AL V- J中 ,有 3株AL V- J的感染细胞中同时有 REV感染。由此表明 ,发生肿瘤的肉鸡中 ,AL V- J和 REV的共感染已相当普遍。将这 3株 REV- SD0 0 0 3、SD0 0 0 4和 SD0 10 2的 3′- L TR用 PCR扩增、克隆和序列比较 ,发现分离的 SD0 0 0 3、SD0 0 0 4和SD0 10 2与国内的另外 2株 REV- SD990 1和 HA990 1的同源性为 96 .7%和 96 .1% ;而与另 1株 REV参考株鸭脾坏死性病毒 (SNV)的同源性高达 99%。
- 张志崔治中姜世金
- 关键词：J亚群禽白血病病毒禽网状内皮组织增生症病毒共感染
- J亚群白血病病毒NXO101株感染性克隆化病毒的构建及其致病性
- 采用PCR方法分3段扩增出J亚群白血病病毒NX0101株的前病毒cDNA,PCR产物经克隆后顺次连接,获得一个含有完整ALV-J前病毒cDNA的重组质粒,命名为pALV-J-NX。将此质粒DNA纯化后转染鸡胚成纤维细胞,...
- 张纪元崔治中丁家波姜世金
- 关键词：J亚群白血病病毒感染性克隆
- 文献传递
- 鸡肿瘤病料中马立克氏病病毒和禽网状内皮组织增生症病毒共感染的研究被引量：52
- 2003年
- 采用细胞培养、间接荧光抗体试验(IFA)、聚合酶链式反应 (PCR)和斑点杂交 (Dotblot)的方法从我国不同地区发生肿瘤的病料中同时进行MDV和REV的分离和鉴定。在分离到的 1 3株MDV野毒株中 ,有 4株培养物既能在IFA中与REV的单抗反应 ,又可以用PCR扩增出REV的LTR ;另有 4株培养物能扩增出REV的LTR ,但在IFA中却不与REV的单抗反应。结果表明我国MD肿瘤中存在着REV的共感染 ,且我国MDV某些野毒株的基因组中有可能已经整合进了REV的LTR序列。
- 张志崔治中姜世金周蛟
- 关键词：马立克氏病病毒共感染
- J亚群白血病病毒NX0101株感染性克隆化病毒的构建及其致病性被引量：22
- 2005年
- 采用PCR方法分3段扩增出J亚群白血病病毒NX0 10 1株的前病毒cDNA ,PCR产物经克隆后顺次连接,获得一个含有完整ALV J前病毒cDNA的重组质粒,命名为pALV J NX。将此质粒DNA纯化后转染鸡胚成纤维细胞,以针对ALV J的单克隆抗体JE9对转染后的细胞作间接免疫荧光反应,证明获得了具有感染性的病毒。测定原始野毒和分子克隆化病毒的半数组织感染量(TCID50 ) ,分别人工接种1日龄商品代肉鸡并隔离饲养17周。接种野毒组死亡率为2 6 % ,髓细胞瘤发病率为2 4 %。接种分子克隆化病毒组死亡率为2 2 % ,髓细胞瘤发病率为2 2 %。结果表明。
- 张纪元崔治中丁家波姜世金
- 关键词：J亚群白血病病毒感染性克隆
- 网状内皮组织增生病病毒中国分离株REV/HA9901全基因组核苷酸序列的测定与分析
- 以网状内皮组织增生病病毒(REV)中国分离株REV/HA9901感染的鸡胚成纤维细胞(CEF)提取的基因组DNA作为REV/HA9901前病毒基因组模板(cDNA),参照已发表序列,设计合成了6对引物,经PCR成功扩增出...
- 王玉崔治中姜世金
- 关键词：PCR同源性分析
- 文献传递
- REV分离株囊膜糖蛋白基因的克隆及序列分析被引量：9
- 2003年
- 根据网状内皮组织增生症病毒 ( REV) SNV株 env基因的序列 ,设计并合成了 2对引物 ,利用该引物 ,以中国地方分离株 SD990 1、HA990 1前病毒基因组 c DNA为模板 ,通过 PCR技术 ,成功地从国内分离的 2株 REV毒株中扩增出env基因 ,并将其克隆到 p UCm-T载体中测序。将所得序列与 SNV株进行比较 ,分析其同源性。结果表明 :在核苷酸水平上 ,参考株 SNV株的 env基因与 2株中国分离株的同源性分别为 97.7%和 95 .0 % ;在氨基酸水平上 ,其同源性分别为 96.9%和 92 .7%。分析进化关系 ,HA990
- 吉荣赵文明钱莉李余慰崔治中
- 关键词：禽网状内皮组织增生症病毒囊膜糖蛋白基因克隆REV
