山东省自然科学基金(Z2003D01)
- 作品数：22 被引量：154H指数：9
- 相关作者：温建新王金宝安利国杨桂文周顺更多>>
- 相关机构：山东省农业科学院山东师范大学山东农业大学更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学医药卫生轻工技术与工程更多>>
- 含CpG序列PRRSV ORF5基因真核表达质粒在小鼠的细胞免疫应答被引量：1
- 2009年
- 为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因免疫的效果,构建含CpG基序和PRRSV ORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。经酶切鉴定和序列测定,将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSV GP5蛋白。免疫SPF小鼠,检测鼠的脾T淋巴细胞亚群数量(CD4+和CD8+)以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平。结果表明本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的细胞免疫。
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒ORF5基因细胞免疫应答
- 含CpG序列PRRSV SD2 E基因真核表达载体质粒构建及表达被引量：1
- 2008年
- 为了提高猪生殖与呼吸综合征病毒山东株(PRRSV SD2株)基因免疫的效果,将PRRSV SD2 E基因插入哺乳动物表达载体PVAX1中,构建出PVAX1-E质粒。再将已筛选出的CpG-ODN序列通过在其两端的粘性酶切末端定向插入含PVAX 1-E的真核表达载体,构建含CpG基因序列真核重组表达质粒CpG-pVAX 1-E。将重组质粒转染COS-7细胞,经RT-PCR检测E基因mRNA的转录和间接免疫荧光试验(IFA)证实:CpG-pVAX 1-E可表达PRRSV GP5蛋白。试验结果为进一步研究PRRSV SD2 ORF5动物免疫反应奠定基础。
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝
- 关键词：E基因真核表达载体
- 含CpG序列PRRSV ORF5重组质粒在小鼠细胞中的免疫
- 2009年
- 为了提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因免疫的效果,将成功构建含CpG序列PRRSVORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5免疫SPF小鼠,检测小鼠的脾T淋巴细胞亚群数量(CD4+和CD8+)以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平。结果表明,构建的含CpG序列真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的细胞免疫。
- 温建新王金宝
- 关键词：ORF5基因细胞免疫应答
- 壳聚糖对巨噬细胞的双向免疫调节作用被引量：3
- 2009年
- 壳聚糖(chitosan)具有多种生物活性,如增强机体免疫力、激活免疫细胞等。近年来更多研究发现壳聚糖在炎症性疾病的治疗中起着重要作用,表明壳聚糖能弱化炎症处激活的免疫细胞,减轻免疫细胞浸润。本文将论述壳聚糖对一种重要的免疫细胞—巨噬细胞的双向免疫调节作用,以期为新型免疫调节药物的开发利用提供新的思路。
- 王大山安利国杨桂文
- 关键词：壳聚糖巨噬细胞
- 含CpG序列PRRSV ORF5基因真核质粒对猪体免疫作用研究被引量：2
- 2008年
- 目的:为了增强猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)DNA疫苗免疫效力,以pVAX1为真核表达载体,以PRRSV ORF5基因为目的基因,构建了含有CpG和PRRSV ORF5的真核表达质粒CpG-pVAX1-ORF5,并在猪体进行了免疫试验。方法:检测猪PRRSV的特异性抗体滴度、IL-2水平以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平,并做了攻毒保护试验。结果:试验结果表明本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫(显著的淋巴细胞增殖反应水平)。攻毒结果表明CpG-pVAX1-ORF5组能够有效地抵抗经鼻攻毒,可以保护猪轻微病毒血症,比对照组减少80%,也不表现临床症状,对肺的损害能提供部分保护。结论:CpG的加入可使免疫猪的病变减轻或消失。从而表明含有CpG-ODN能作为PRRSVDNA疫苗的有效佐剂。
- 温建新王金宝
- 关键词：ORF5基因CPGDNA免疫
- 水溶性壳聚糖的降血糖作用研究被引量：12
- 2007年
- 将60只雄性昆明种小鼠分为正常对照组、正常给药组、糖尿病(DM)组和治疗A、B、C组六组,DM组及治疗组均腹腔低剂量注射链脲佐菌素诱导DM模型,治疗A、B、C组分别给予水溶性壳聚糖10、20、30mg/ml,每周取尾静脉血检测非禁食血糖,治疗结束后检测各组肝糖原含量。结果与DM组比较,治疗C组血糖明显下降,肝糖原含量明显增加(P<0.05,<0.01),治疗B、A组无统计学差异(P>0.05)。提示水溶性壳聚糖有明显降血糖、增加肝糖原作用,其作用可能与调节糖代谢、促进肝糖原合成、减少肝糖原分解有关,且呈剂量依赖性。
- 孙萍朱立华杨桂文安利国
- 关键词：水溶性壳聚糖糖尿病血糖肝糖原
- 不同序列的CpG-ODN对猪体外免疫细胞免疫刺激作用的研究
- 为了筛选出对猪体有免疫刺激活性的 CpG 寡聚脱氧核苷酸(CpG-ODN),人工设计合成了 9种未甲基化 CoG-ODN 不同序列,分别作用于健康猪外周血淋巴细胞和脾脏免疫细胞,进行体外转化试验。用四甲基偶氮唑盐(MTT...
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝
- 关键词：免疫刺激作用MTT
- 文献传递
- 桔梗皂苷对高脂大鼠血清指标的调节被引量：18
- 2010年
- 为研究桔梗皂甙对高脂大鼠血清指标的调节作用,将桔梗粉末以10倍量蒸馏水,浸泡2 h,超声振动处理30 min,滤除药渣,得提取液。同法再次提取一次,合并提取液,减压蒸干,以甲醇溶解,乙醚沉淀,得到皂甙。Wistar大鼠以高脂饲料饲喂,建立高血脂大鼠模型,分组灌胃生理盐水、阳性药物和桔梗皂甙溶液。尾静脉取血测定血清甘油三酯(TG)水平、总胆固醇(TC)水平、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平、载脂蛋白AI(ApoAI)水平和载脂蛋白B(ApoB)水平等指标。结果表明:该法制备桔梗皂甙的方法简便、快速,得率高。桔梗皂甙对血清指标的调节作用显著,提示桔梗皂甙具有降血脂作用,是改善心血管生理功能的良好天然产物来源。
- 吴敬涛王建军汤卫东安利国
- 关键词：血清指标APOAIAPOB
- 高产酵母菌株(Rhodotorula bacarum)产普鲁兰多糖过程中搅拌和通气条件的优化被引量：10
- 2005年
- 在过去的研究中发现普鲁兰多糖高产酵母菌株摇瓶发酵的最佳条件是 180r/min ,2 8℃ ,6 0h ,在此条件下该菌株可以产生质量体积分数为 5 9%的普鲁兰多糖。本文研究发现在 5L发酵罐中通气量和搅拌速度对该酵母菌株的普鲁兰多糖产量有很明显的影响。研究结果表明产普鲁兰多糖的最适通气量和搅拌速度分别是6 . 5L/min和 30 .0r/min。相应的 ,用每升含 80g的葡萄糖做发酵培养基 ,在 2 8℃条件下培养 72h ,其普鲁兰多糖的产量质量体积分数为达到 7. 5 % ,这是迄今为止所报道的产普鲁兰多糖酵母中产量最高的菌株。作者发现这株酵母菌产普鲁兰多糖高效合成过程的原因是其有很高的葡萄糖转化率。
- 池振明叶芳赵双枝
- 关键词：酵母菌株搅拌速度摇瓶发酵
- 含CpG序列PRRSV ORF5基因真核质粒构建及其免疫原性的研究被引量：2
- 2008年
- 【目的】提高猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)基因免疫的效果,构建含CpG基序和PRRSVORF5的真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5。【方法】经酶切鉴定和序列测定,将重组质粒转染COS-7细胞,经间接免疫荧光试验证实CpG-pVAX1-ORF5可表达PRRSVGP5蛋白。免疫SPF小鼠,检测鼠的特异性抗体滴度、脾T淋巴细胞亚群数量(CD4+和CD8+)以及淋巴细胞增殖反应(MTT法)水平。【结果】本试验构建的含CpG基序真核重组表达质粒CpG-pVAX1-ORF5能诱导小鼠产生针对PRRSV的体液免疫与细胞免疫。【结论】CpG-ODN可提高PRRSV基因疫苗的免疫效果。
- 温建新李俊周顺任慧英刘文华邹玲徐文牛钟相王金宝吴家强
- 关键词：ORF5基因DNA免疫
