湖北省教育厅科学技术研究项目(Q20121808)
- 作品数：6 被引量：12H指数：2
- 相关作者：方成陈卓刘立丁洪波瞿永华更多>>
- 相关机构：武汉轻工大学武汉工业学院更多>>
- 发文基金：湖北省教育厅科学技术研究项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 基于酶促反应动力学的无标准品ELISA抗体滴度定量方法
- 2015年
- 目的建立无标准品的酶联免疫吸附测定(ELISA)抗体滴度定量方法。方法对血清抗体ELISA检测设置非特异、阴性对照、特异和总抗体检测组。显色早期的时间-吸光度数据经线性拟合的斜率即吸光度变化速度,分别记为ν0、νC、νS、νT。基于底物过量时ν值与待测抗体浓度(C)呈直线关系,设计ν值函数计算待测样本与阴性对照样本的抗体浓度倍比。以鱼胶原蛋白免疫昆明小鼠的血清特异IgG抗体检测进行实例分析。结果函数C/CC=(ν-ν0)/(νC-ν0)可计算待测样本与阴性对照样本的特异抗体浓度倍比(滴度)。结论该动力学ELISA抗体滴度检测方法适用于无标准品半定量分析。
- 方成陈卓刘立梅志强
- 关键词：酶联免疫吸附测定抗体滴度
- 以SRY为靶基因建立免疫耐受嵌合的定量检测方法
- 2012年
- 建立免疫耐受嵌合的定量检测方法。以性别决定因子(SRY)作为检测靶基因,利用实时荧光定量聚合酶链反应(Real-time quantitative Polymerase Chain Reaction,RT-PCR)技术,建立大鼠的同种异体移植血细胞嵌合率的检测方法。获得严格的直线型标准曲线,线性相关系数r>0.99,准确反映了血细胞嵌合率的数量关系,敏感度可达4μg/L(0.1%)。
- 瞿永华方成
- 关键词：免疫耐受嵌合聚合酶链反应
- 波形蛋白在细胞内外的不同功能与相关病理被引量：7
- 2016年
- 真核细胞骨架是由微管、微丝、中间丝（Intermediate filaments,IFs）构成的蛋白纤维网状支架系统。IFs根据基因序列分为六种类型,不同类型中间丝的表达具有明显的组织细胞特异性。波形蛋白（Vimentin,Vim）为Ⅲ型中间丝蛋白,主要表达于中胚层起源的间充质细胞中,如成纤维细胞、内皮细胞、中性粒细胞、巨噬细胞等。
- 陈卓方成
- 关键词：波形蛋白中间丝蛋白固有免疫间充质细胞细胞特异性
- 肾移植继发自身免疫病理具有组织损伤依赖性被引量：4
- 2014年
- 目的:甄别、测量与评估大鼠肾移植继发自身免疫反应的致病性。方法:使用保留受体自体肾的F344-Lewis大鼠肾移植模型(AI组)、Lewis大鼠自体肾单纯缺血再灌注模型(IR组)、同系移植肾病大鼠脾细胞过继并Lewis大鼠自体肾缺血再灌注模型(AR组),以Lewis大鼠自体肾移植作为对照(Syn组)。术后第10周检测大鼠受体血清vimentin抗体水平,动态监测蛋白尿水平,术后第40周检测自体肾肾小球硬化指数、肾脏IgG沉积。结果:术后第10周AI组和AR组血清vimentin抗体水平比Syn组显著升高(0.312±0.036,0.310±0.017 vs.0.061±0.012),IR组则无明显改变,显示AI组和AR组有自身免疫反应发生。AI及IR组蛋白尿水平至40周维持正常(Proteinuria<0.05 g/mmol)。AR组在第18周出现蛋白尿水平异常(0.18±0.03 g/mmol),其后持续缓慢上升至40周为(0.23±0.04)g/mmol,肾功能变化具有显著性。AR组自体肾在第40周病理检查肾小球硬化指数为(1.24±0.16),并且肾组织IgG沉积呈强阳性。AI组与IR组则未发现自体肾病理损害。结论:大鼠同种肾移植继发的自身免疫基于肾脏缺血再灌注损伤可发展出致病性,对于长期存活的移植肾其损害强度不能忽略。
- 方成肖显杰万卉丁洪波刘立陈卓杨清陈慧敏梅智强
- 关键词：肾移植自身免疫病理缺血再灌注损伤
- 两条量效曲线差值的五参数Weibull分布拟合
- 2014年
- 目的:研究两条S型剂量效应曲线差值(ΔE)的五参数Weibull分布拟合,建立药效特异性分析模型。方法:构建五参数Weibull分布概率密度函数,以最小二乘法对右侧偏态、左侧偏态及对称分布的剂量效应差值进行拟合,以决定系数(R2)、剩余标准差(Sy.x)、拟合优度检验(χ2)评价拟合结果。以三氧化二砷(As2O3)影响人恶性纤维母细胞株MG-63及人正常纤维母细胞株MRC-5增殖的浓度效应数据进行实例分析。结果:五参数Weibull分布可以不预设条件对偏态或对称分布的剂量效应差值拟合,克服了四参数Weibull分布、对数正态(LogG)分布、正态(Gaussian)分布只能部分适用的弱点,拟合效果均通过拟合优度检验。拟合结果可获得起点位置、尺度、形状(偏态)、高度修正及水平修正参数,计算ΔE峰值。尺度参数反映量效差异分布的剂量范围大小,形状参数反映量效差异分布的偏态情况。结论:五参数Weibull分布对各种分布形态的剂量效应差值拟合具有通用性。
- 方成刘立陈卓
- 慢性移植肾肾病大鼠体内自身蛋白vimentin与megalin的免疫原性迥异被引量：1
- 2015年
- 目的:研究自身组织蛋白vimentin(Vim)和megalin(Meg)在慢性移植肾肾病(CAN)大鼠体内的免疫原性。方法:Lewis大鼠接受F344大鼠供肾移植,每2周检测受体蛋白尿水平观察CAN进程。肾移植后第14、49、98天收获受体脾细胞,检测Vim及Meg特异性IFN-γ分泌细胞的数量;收获受体血清检测Vim及Meg特异性抗体水平。结果:受体肾移植6周后肾功能逐渐衰退,处于CAN病程中。Vim特异性IFN-γ分泌细胞数量逐渐增加,至98 d时其数量比对照孔差异有极显著性(126.0±10.4 vs.24.7±4.3,P<0.001)。Vim特异性抗体水平肾移植后14 d即显著升高(0.230±0.018 vs.0.063±0.008,P<0.01),其后缓慢持续升高。CAN大鼠Meg特异性IFN-γ分泌细胞数量无显著性变化。Meg抗体水平直至98 d时比正常大鼠略有上升(0.054±0.006 vs.0.022±0.003,P<0.05),但远低于同期Vim抗体水平(P<0.01)。结论:在同种肾移植大鼠CAN病程中,自身蛋白Vim表现强免疫原性而Meg免疫原性极弱。
- 陈卓方成夏昶丁洪波刘立瞿永华于兰
- 关键词：慢性移植肾肾病自身抗原免疫原性
