国家高技术研究发展计划(2002BA711A01-03)
- 作品数：16 被引量：24H指数：4
- 相关作者：范明范文红吴燕靳雁斌刘淑红更多>>
- 相关机构：军事医学科学院空军总医院中国人民解放军海军总医院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 参与小鼠神经发育的mCcd1基因的组织表达
- 2006年
- 介绍了一种可能在神经发育过程中起重要调节作用的基因mCcd1在小鼠发育过程中的mRNA和蛋白质水平的表达变化。通过对新生和成年小鼠多组织免疫杂交(Western Blot)和反转录PCR(RT-PCR)检测发现:该基因在多种组织中广泛表达,但脑部显示高表达,并且新生鼠各组织表达均高于成体。小鼠11.5 d胚胎切片免疫组化实验也支持这一结果。mCcd1在神经系统发育早期的表达暗示它可能参与了神经系统的发育过程。
- 马鑫景孝堂刘淑红吴燕范文红王子仁范明
- 关键词：神经发育基因表达小鼠
- 小鼠RTN3基因mRNA和蛋白在小鼠中枢神经系统的分布模式
- 2003年
- 根据与人RTN3基因同源的小鼠EST AA237377设计筛库引物,克隆得到小鼠RTN3 cDNA,该cDNA长2814 bp,含1个714 bp的可读框,编码1个具237个氨基酸的蛋白.Northern杂交检测该基因在小鼠不同组织中的表达谱,发现它有3个转录本,分别为1.8,2.8和4.2 kb,其中1.8和 2.8 kb的转录本存在于多种组织中,2.8 kb的转录本在脑中的表达量最高,4.2 kb的转录本仅在脑中存在.用成年小鼠脑和脊髓切片进行原位杂交和免疫组织化学反应,发现该基因在中枢神经系统的非胶质细胞中广泛表达,且在某些区域表达较高,如海马、大脑皮层、下丘脑及一些神经核团.
- 刘瑾黄晓玮彭小忠阳洪波阴彬谈昕煜范明范文红刘炳岩强伯勤袁建刚
- 关键词：蛋白中枢神经系统克隆内质网膜RTN
- Slitrk基因家族的研究进展被引量：5
- 2006年
- Slitrk基因家族是一类调节神经突生长的结构相关的跨膜蛋白,有6个成员。Slitrk蛋白有氨基末端的亮氨酸重复序列(LRR s)和羧基末端的酪氨酸残基2个保守结构域,它们分别与轴突导向因子Slit和神经营养因子受体TrkA的相应结构同源,且功能有相近之处。人与鼠Slitrk家族各成员的氨基酸序列高度同源。除Slitrk6外Slitrk其他成员的表达都局限于神经组织,Slitrk1,Slitrk2的分布具有互补性。Slitrk基因还在多种神经上皮肿瘤中有不同程度的表达。
- 靳雁斌范文红范明
- 关键词：SLITTRKALRR
- 脑胶质瘤相关新基因表达的微阵列基因芯片分析被引量：3
- 2007年
- 目的用基因芯片技术获取人脑胶质瘤组织和人正常脑组织中差异表达的相关基因，并对部分基因在不同级别胶质瘤中的表达进行初步研究。方法用含有218个与人类神经系统发育相关基因的表达谱芯片，提取正常脑组织及胶质瘤组织总RNA制备探针并杂交芯片，用ScanArray4000扫描芯片，对其中差异表达基因进行生物信息学分析，并用实时定量PCR方法验证smad1、Hmp19和TRIP3的mRNA在不同级别胶质瘤中的表达改变。结果与正常脑组织相比，胶质瘤中明显差异表达基因10个，包括细胞周期相关基因、转录和细胞转导相关基因、增殖和分化相关基因。其中表达下调基因5个，表达上调基因5个，经实时定量PCR验证smad1、Hmp19和TRIP3的表达结果与芯片检测结果相符，且随胶质瘤恶性级别的不同而变化。结论胶质瘤发生发展中存在多类基因表达的改变，表达谱基因芯片技术能快速有效地反映肿瘤发展过程中的基因改变，为胶质瘤的侵袭性和预后判断提供依据以及为导向治疗和基因治疗提供更多的靶基因。
- 刘爽田增民郑国强吴海涛靳燕彬马鑫范文红范明
- 关键词：脑胶质瘤基因芯片
- Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及荧光共定位研究被引量：2
- 2008年
- 目的:观察脑信号蛋白Sema4C及其相互作用蛋白GIPC的亚细胞定位及两者的荧光共定位情况,为明确Sema4C和GIPC在亚细胞水平的相互作用提供佐证。方法:将Sema4C的基因编码区全长、胞外段和胞内段分别构建到pEGFPN1和pEGFPC1表达载体中,将GIPC编码区基因构建到pDsRed-C1表达载体中,分别转染HEK293细胞,观察亚细胞定位;将pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC分别共转染HEK293和COS7细胞,观察两者的荧光共定位情况。结果:酶切鉴定及测序结果表明重组载体构建正确,Sema4C蛋白全长和胞外段呈跨膜分布,而胞内段在全细胞中呈弥散样分布;GIPC在胞浆内呈斑块状聚集分布;pEGFPN1-Sema4C和pDsRed-GIPC存在荧光共定位区域。结论:Sema4C主要在胞膜和胞浆内表达,GIPC主要在胞浆内呈斑块样聚集分布;Sema4C和GIPC之间存在荧光共定位。
- 吴燕吴海涛刘淑红范文红范明
- 关键词：HEK293细胞COS7细胞激光共聚焦显微镜
- 外源过表达CPNE5基因增强HEK293细胞对Zeocin的敏感性
- 2008年
- 目的:探讨Zeocin处理是否能增强CPNE5基因诱导细胞凋亡的作用。方法:分别构建CPNE5基因稳定过表达和抑表达载体,转染HEK293细胞,形成克隆后,用RT-PCR、MTT法分析CPNE5基因过表达和抑表达的HEK293单克隆细胞对Zeocin作用的敏感性。结果:CPNE5基因过表达的HEK293单克隆细胞对Zeocin反应敏感性增加。结论:Zeocin能增强CPNE5基因诱导细胞凋亡的作用。
- 王晓文吴彦瑞吴燕靳雁斌刘淑红范文红范明
- 关键词：过表达
- CPNE5对NF-κB转录调控活性的影响被引量：4
- 2009年
- 目的:研究CPNE5对TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性的影响,并探讨其作用机制。方法:用10 ng/mlTNF-α处理转染了pcDNA3.1或pcDNA3.1-CPNE5的HEK293细胞,用双荧光素酶报告基因实验检测不同转染组NF-κB的转录激活活性;Western印迹和细胞免疫荧光技术检测CPNE5表达上调对NF-κB入核的影响;凝胶阻滞实验研究CPNE5表达上调对NF-κB DNA结合能力的影响。结果:CPNE5可以显著抑制TNF-α对NF-κB的转录激活活性(P<0.0001);CPNE5不影响TNF-α诱导的NF-κB(P65)入核;CPEN5过表达降低了TNF-α诱导的NF-κB与DNA结合的能力。结论:CPNE5通过抑制NF-κB的DNA结合活性抑制TNF-α诱导的NF-κB转录激活活性。
- 吴彦瑞王晓文靳雁斌丁学峰刘淑红吴燕范文红范明
- 关键词：NF-ΚBDNA结合活性
- CPNE5 inhibit transcriptional activity of NF-κB through interaction with P65
- ＜正＞Introduction:Copines are highly conserved,calcium-dependent membrane binding proteins found in a variety of...
- WU Yan-Rui~1,WANG Xiao-Wen~2,FAN Wen-Hong~1,FAN Ming~1 1 Beijing Institution of Basic Medical Sciences,Beijing 100850,China
- 关键词：NF-ΚBP65
- 文献传递
- 人copineⅤ蛋白多克隆抗体的制备被引量：1
- 2008年
- 目的:制备兔抗人copineⅤ多克隆抗体。方法:将copineⅤN端423 bp(626～1 048 bp)构建到原核表达载体pET28a(+),转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG诱导下进行蛋白表达;以镍柱纯化后的蛋白为抗原,与等体积佐剂混合后免疫家兔3次;用ELISA和Western印迹检测抗血清,用(NH4)2SO4沉淀法初步纯化抗体。结果:表达并纯化了copineⅤN端蛋白,ELISA检测表明抗血清具有高亲和性,Western印迹检测表明抗体能特异性识别内源性和过表达的copineⅤ。结论:制备了具有高亲和性和特异性的抗人copineⅤ多克隆抗体。
- 丁学锋靳雁斌王晓文吴燕刘淑红宋小国范文红范明
- 关键词：原核表达多克隆抗体
- 人Sema4C重组腺病毒载体的构建及其在小鼠成肌细胞系C2C12中的表达
- 2007年
- 利用Ad5腺病毒载体系统构建人Sema4C基因重组腺病毒表达载体并在成肌细胞系C2C12中表达,并初步探讨Sema4C基因在成肌发育过程中的可能作用。利用脂质体介导重组腺病毒载体转染HEK293细胞,包装出完整的腺病毒;将重组腺病毒载体感染C2C12成肌细胞后,利用激光共聚焦显微镜观察发现12h即有绿色荧光表达,24h后绿色荧光蛋白表达最强;流式细胞仪检测病毒的感染效率几乎达100%。WB检测结果表明感染重组腺病毒载体组C2C12细胞Sema4C蛋白的表达量明显高于空载体对照组(P<0.01)。为了进一步观察Sema4C基因对C2C12细胞增殖分化的影响,流式细胞仪检测了病毒感染48h后C2C12细胞的增殖指数,并对感染后诱导分化的C2C12细胞的分化情况进行了观察。结果首次表明,过表达外源性人Sema4C基因不仅能使C2C12细胞的G0/G1期比例增加,细胞的增殖指数下降,同时在分化培养条件下还能促进C2C12细胞肌管的形成。
- 吴海涛刘淑红吴燕樊俊蝶范文红范明
- 关键词：腺病毒载体成肌细胞C2C12增殖指数
