国家自然科学基金(30871003)
- 作品数：4 被引量：43H指数：3
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- 肾血管性高血压大鼠肠系膜血管内皮型一氧化氮合酶磷酸化改变及意义
- 2012年
- 目的:观察大鼠肾血管性高血压发病过程中肠系膜血管内皮型一氧化氮合酶(eNOS)总蛋白表达及其Ser1179位点磷酸化水平的变化,探讨高血压时内皮功能紊乱的分子机制。方法:将72只成年雄性SD大鼠随机分为假手术组和高血压组,每组36只,用双肾双夹(2K2C)法狭窄双肾动脉复制肾血管性高血压(RHR)模型,用无创血压仪测量大鼠尾动脉收缩压,术后2、4、8周处死大鼠,留取肠系膜血管组织;Western blot法检测组织eNOS总蛋白、eNOS Ser1179磷酸化水平,及蛋白磷酸酶PP1、PP2A的表达;化学比色法检测组织一氧化氮(NO)的含量。结果:与假手术组相比,2K2C术后2周收缩压明显增高(P<0.05),8周时可高达(170.1±11.5)mmHg;与同时间点假手术组相比,2K2C术后2周和4周时肠系膜血管组织eNOS Ser1179水平无明显变化,8周时明显降低(P<0.05),各时间点假手术组和2K2C组之间eNOS总蛋白及PP1、PP2A的表达水平均无统计学差异(P>0.05);与同时间点相比,2K2C组的组织NO含量2周、4周无明显变化,8周发生降低(P<0.05)。结论:血管组织eNOS Ser1179磷酸化降低、NO生成减少可能是肾血管性高血压发病中内皮细胞功能紊乱的原因之一,eNOS Ser1179磷酸化水平下调与PP1、PP2A蛋白表达无关。
- 杨小慢陆德琴李茜陈胜枝李贤玉张菊李保罗
- 关键词：一氧化氮合酶
- 葛根素预处理上调内皮型一氧化氮合酶磷酸化的心肌保护作用
- 目的:从内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达及其磷酸化变化的角度探讨葛根素(PUE)预处理保护心肌缺血再灌注损伤(ischemia-reperfusion injury,I-R)的机制。方法:随机分90只成年SD雄鼠为5组...
- 林安晓乔东方丁菁李茜陆德琴
- 关键词：内皮型一氧化氮合酶磷酸化磷酸化水平预处理心肌保护作用
- 双肾双夹大鼠肾血管性高血压模型的制作被引量：17
- 2009年
- 目的:探讨用自制铝夹狭窄双肾动脉(2K2C)复制大鼠肾血管性高血压模型的方法。方法:选用SD大鼠64只,随机分为假手术(sham)4周(4w)组和8周(8w)组及手术(2K2C)4w组和8w组。用无创动物血压测试仪测量各组大鼠尾动脉血压值。术后4w或8w时处死动物,称左心室重(LVW)和体重(BW),计算左室重量指数(LVW/BW)。结果:2K2C术后2w血压即明显升高,显著高于sham组(P<0.01),术后4w血压继续上升,血压值稳定在(157.63±14.13)mmHg,术后8w血压值高达(177.98±18.03)mmHg。sham组手术前后血压值无明显变化。2K2C-4w组和2K2C-8w组LVW、LVW/BW较同时间sham组显著增加(P<0.01)。结论:采用自制铝夹能成功复制肾血管性高血压,血压升高显著且稳定,成功率高,重复性好,方法简便易行。
- 杨小慢陆德琴李贤玉张菊陈胜枝李茜李保罗
- 关键词：肾血管性高血压高血压模型HYPERTENSION继发性高血压双肾
- 依普利酮对高盐诱导的高血压大鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶表达及活性的影响被引量：12
- 2015年
- 目的：探讨依普利酮对高盐诱导的高血压大鼠主动脉内皮型一氧化氮合酶（e NOS）的表达及活性的影响。方法：50~60 g 4周龄雄性Wistar大鼠随机分为3组：对照（control,C）组用普通饲料饲养16周,高盐饮食（high salt diet,HS）组及依普利酮（eplerenone,Epl）组用5%高盐饲料饲养16周,C组和HS组于末4周给予同等剂量生理盐水灌胃,而Epl组于末4周给予依普利酮40 mg·kg-1·d-1灌胃。每2周检测各组大鼠尾动脉收缩压,16周后处死大鼠,留取主动脉。ELISA法检测醛固酮含量,蛋白免疫印迹法检测盐皮质激素受体（MR）及e NOS蛋白表达水平,化学比色法测定一氧化氮合酶活性,免疫组化染色法观察主动脉e NOS、神经型一氧化氮合酶（n NOS）及MR蛋白表达与定位。结果：（1）高盐饲料饲养8周后,大鼠收缩压即明显升高,并逐渐上升,16周时HS组收缩压较同时点C组明显升高（P〈0.05）;依普利酮灌胃4周后,收缩压比灌胃前明显下降（P〈0.05）。（2）与C组比较,HS组、Epl组主动脉醛固酮含量明显增加（P〈0.05）,且MR表达明显增加（P〈0.05）。（3）HS组较C组e NOS蛋白表达减少（P〈0.05）、结构型一氧化氮合酶（c NOS）活性也降低（P〈0.05）;Epl组较HS组e NOS蛋白表达增加（P〈0.05）、c NOS活性增高（P〈0.05）。结论：（1）高盐诱导高血压大鼠的主动脉醛固酮含量明显增加,醛固酮可能通过激动MR降低主动脉e NOS蛋白表达及酶活性。（2）选择性MR拮抗剂依普利酮可恢复e NOS蛋白表达及活性,改善e NOS功能。
- 张倩丁菁杨飞王胜男粟凤陆德琴
- 关键词：高血压高盐饮食内皮型一氧化氮合酶盐皮质激素受体
- 一套系统培养鼠主动脉血管壁细胞简单可靠的方法被引量：14
- 2011年
- 目的探讨一套系统培养鼠主动脉血管壁成分细胞的简单、可重复的方法。方法分别采用植块贴壁法进行主动脉血管平滑肌细胞和血管外膜成纤维细胞、结扎贴壁法进行血管内皮细胞的原代培养,胰酶消化传代;差速贴壁法及自然纯化法进行细胞纯化;转化生长因子β1诱导血管外膜成纤维细胞转化为肌成纤维细胞;相差显微镜及α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）、血小板/内皮细胞黏附分子（CD31）、波形蛋白（Vimentin）抗体两两联合的方式分别进行形态学和免疫细胞化学鉴定。结果组织及细胞活性良好,血管平滑肌细胞及血管外膜成纤维细胞原代培养周期为10-12天,血管内皮细胞为12-14天。传代培养周期为7-10天。经纯化传代后的细胞纯度达95%-100%。血管平滑肌细胞呈典型的＂峰-谷＂状生长,α-SMA（＋）/Vimentin（-）;血管内皮细胞呈＂铺路石＂样外观,CD31（＋）/α-SMA（-）;血管外膜成纤维细胞形态和血管平滑肌细胞不易区分,Vimentin（＋）/α-SMA（-）,诱导的肌成纤维细胞Vimentin（＋）/α-SMA（＋）。原代细胞传至10代以上仍未见生长活力减退。结论我们建立了一套系统培养纯度高、生长状态良好的大鼠主动脉血管内皮细胞、血管平滑肌细胞、血管外膜成纤维细胞及肌成纤维细胞的简单可靠、重复性好的方法。该法对培养小鼠主动脉壁成分细胞仍然适用。
- 宋方吴强陆德琴袁军杨永耀谭洪文
- 关键词：主动脉原代细胞培养外膜成纤维细胞肌成纤维细胞
