广东省自然科学基金(A101689)
- 作品数：4 被引量：16H指数：3
- 相关作者：邓宇斌郭小荑原清涛李树浓陆才生更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第三医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓间充质干细胞降低大鼠移植物抗宿主病的研究被引量：5
- 2004年
- 郭小荑邓宇斌原清涛梁海翔
- 关键词：CTLA4IG基因骨髓间充质干细胞移植物抗宿主病GVHD
- CTLA4Ig重组腺病毒载体的构建与体外表达被引量：5
- 2003年
- 目的 :构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体 ,为下一步在动物模型体内表达和基因治疗提供基础。方法 :自行设计一对分别含有BglⅡ及HindⅢ酶切位点的CTLA4Ig基因上下游引物 ,以质粒PCDNA3 0 /CTLA4Ig为模板 ,通过PCR扩增获得CTLA4Ig基因全部序列。片段回收以后经BglⅡ及HindⅢ双酶切 ,定向插入到腺病毒穿梭质粒pAdTrack -CMV的启动子下游BglⅡ及HindⅢ位点之间 ,获得重组质粒pAdTrack -CTLA4Ig。通过BglⅡ /HindⅢ双酶切、PCR及插入片段测序鉴定后 ,将正确重组体pAdTrack -CTLA4Ig与腺病毒骨架质粒pAdEasy - 1共转化BJ5 183细菌。同源重组后用选择性培养基筛选阳性克隆 ,提取质粒用脂质体介导转染 2 93细胞 ,通过观察绿色荧光蛋白(GFP)的表达及PCR扩增目的基因等方法鉴定重组的腺病毒。结果 :成功构建了含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒 ,病毒滴度为 1 6 5× 10 12 PFU/L。结论 :该重组腺病毒的构建为下一步研究其在哺乳动物细胞内表达、研究CTLA4Ig的生物学活性及移植排斥、自身免疫病的基因治疗提供了一定的基础。
- 郭小荑邓宇斌陆才生李树浓
- 关键词：体外表达T淋巴细胞免疫球蛋白基因治疗移植排斥
- 腺病毒介导CTLA4Ig基因修饰骨髓间质干细胞体外抑制免疫应答的研究被引量：5
- 2004年
- 目的:通过腺病毒载体介导CTLA4Ig在大鼠骨髓间质干细胞(MSC)中的表达,探讨MSC作为基因转移靶细胞的可行性和转染效率,研究其在体外对免疫应答的抑制作用。方法:构建含有CTLA4Ig基因的重组腺病毒载体pad-CTLA4Ig,按照不同的感染倍率(MOI)转染大鼠MSC,用荧光显微镜和流式细胞仪分析转染效率,流式细胞术、Western blotting等方法检测目的蛋白CTLA4Ig在MSC中的表达。将转基因MSC加入混合淋巴细胞反应(MLR)体系,观察其抑制淋巴细胞增殖的生物学效应。结果:重组腺病毒载体pAd-CTLA4Ig对MSC的最大转染率为80.7％±4.7％,转基因MSC可检测到目的蛋白的表达。基因修饰的MSC能有效抑制MLR体系中淋巴细胞的增殖,4d达到最大抑制效率51.46％;再次MLR证实这种抑制作用是供者特异性的。结论:MSC是一种较理想的基因转移靶细胞,其表达的转基因产物CTLA4Ig可在体外特异性地抑制免疫应答。
- 邓宇斌郭小荑梁海翔原清涛
- 关键词：CTLA4IG腺病毒载体间质干细胞免疫应答
- 关于阻断共刺激通路诱导移植免疫耐受的实验动物研究进展被引量：1
- 2004年
- 应用能够使T细胞活化的协同刺激分子的相应单克隆抗体或重组基因表达产物阻断某些共刺激信号通路如CD28/B7、CD154/CD40、LFA-1/ICAM、ICOS/ICOSL等可以抑制T细胞活化、分化以及产生效应细胞。这些共刺激信号通路彼此独立但又可能存在潜在的协同效应。本文综述在有关诱导受体对供体移植物特异性的免疫耐受以此延长移植物存活时间的实验动物研究,以期深入探讨免疫耐受机制以及某些处理因素对结果的影响,从而为此类实验的进一步开展甚至临床应用提供理论依据和实验支持。
- 王颖邓宇斌
- 关键词：共刺激通路免疫耐受复合组织移植CTLA4ICOSLFA-1
