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应用生物发光成像技术示踪植入的骨髓间充质干细胞被引量：4: 2009年; 以间充质干细胞(MSC)为基础的细胞治疗已进入临床试验阶段,用于多种组织修复,而移植细胞体内存活是影响疗效的重要因素。为了体内示踪MSC,构建了萤火虫荧光素酶基因(fluc)逆转录病毒表达载体pL(fluc)SN,并筛选出稳定表达fluc的GPE+86细胞克隆。将逆转录病毒上清转染C57小鼠来源的MSC,经G418筛选后得到稳定表达fluc的MSC。将2×106个标记好的细胞注射正常骨骼肌,应用生物发光技术检测移植后不同时间细胞的存活情况。结果表明,随着时间的延长,细胞存活数目逐渐减少;移植后1天细胞死亡率高达(43.2±11.7)%,3天后细胞存活(8.6±2.5)%,6天后仅为(5.4±3.1)%,10天时未检测到荧光信号。结论:生物发光成像技术可用于移植的MSC体内示踪,但是即使将MSC植入正常的骨骼肌组织,大部分注入的MSC也将在短期内死亡。; 边素艳盖鲁粤叶平杨月峰王华郭子宽王立生; 关键词：骨髓间充质干细胞细胞标记细胞移植

肿瘤坏死因子对间充质干细胞体内外免疫调节作用的影响被引量：3: 2012年; 间充质干细胞(MSC)具有特征性的免疫调节作用;然而MSC对胶原诱导性关节炎(CIA)无治疗作用。肿瘤坏死因子-α(TNF-α)是类风湿性关节炎发生发展中的关键因素,因此本研究利用人脐带MSC为研究对象,观察TNF-α处理后MSC细胞内炎性反应相关转录因子NF-κB核转移情况;利用MTT法检测TNF-α对MSC增殖的影响;以SD大鼠脾脏为刺激细胞,Wistar大鼠脾脏单个核细胞为反应细胞,观察MSC对混合淋巴细胞反应的抑制作用;以Wistar大鼠CIA模型为研究对象,探讨MSC或TNF-α处理的MSC的治疗作用,用膝关节病理评分记录治疗效果。结果表明:TNF-α处理后NF-κB迅速从胞浆内转移至细胞核,但这种作用不影响MSC体外增殖。在不同细胞浓度条件下,无论用TNF-α处理与否,MSC均可显著抑制淋巴细胞增殖(均P<0.001);TNF-α处理的MSC有更强的抑制作用,在低细胞密度条件下尤为显著。然而,病理分析显示,MSC治疗组关节炎性浸润显著加重,病理评分明显高于未治疗组(P<0.05)。结论:TNF-α对体内外MSC的免疫调节作用具有不同的影响,其机制尚需进一步阐明。; 王勇奇李志勇曹小芳王恒湘郭子宽; 关键词：肿瘤坏死因子Α 间充质干细胞胶原诱导关节炎免疫调节

自骨密质中分离、培养大鼠骨髓间充质干细胞被引量：3: 2010年; 目的介绍一种自Wistar大鼠骨密质中分离培养间充质干细胞(Mesenchymal stem cells,MSC)的方法。方法应用骨髓密度梯度离心、酶消化骨密质两种方法分离、培养Wistar大鼠MSC,比较其形态学、体外增殖能力差异;并用碱性磷酸酶染色和油红O染色分别鉴定MSC的成骨和成脂分化潜能。结果采用密度梯度离心骨髓或用酶消化后的骨密质,经贴壁培养后均能够成功分离和培养大鼠的MSC,两者在形态学和体外增殖能力方面无明显差异;且两种方法培养的MSC经特异性诱导剂诱导后,均可向脂肪及成骨细胞分化,油红O染色及碱性磷酸酶染色均阳性。结论自骨髓和骨密质中均能够分离培养出较为纯化的大鼠MSC,两种方法培养的MSC体外生物学性能无明显差异。; 边素艳盖鲁粤叶平郭子宽王华王立生; 关键词：骨髓间充质干细胞细胞培养

血小板裂解物支持人骨髓基质细胞的扩增被引量：2: 2009年; 目的探讨血小板裂解物体外培养、扩增人骨髓基质干细胞的可行性。方法将富含血小板血浆以冻融裂解法处理,培养人骨髓基质干细胞;体系中加入不同浓度的裂解物,MTT法检测细胞体外增殖情况;流式细胞仪分析细胞表型特征,并应用细胞化学染色法观察细胞体外成骨和成脂肪能力。结果血小板裂解物培养的骨髓基质干细胞呈典型的成纤维细胞形态,均一呈现CD14、CD31、CD34、CD45及HLA-DR阴性和CD73、CD90、CD105、CD166阳性,具备体外成骨、成脂分化能力。此外,与经筛选的胎牛血清比较,低浓度血小板裂解物即具有支持骨髓基质干细胞扩增的能力。结论血小板裂解物可替代胎牛血清,用于骨髓基质干细胞的体外扩增。; 楼晓汪劲松靳继德何梓铭吴祖泽郭子宽; 关键词：骨髓基质细胞血小板细胞培养扩增

新型干细胞治疗:科学和政策被引量：7: 2011年; 以胚胎干细胞、诱导多能干细胞、间充质干细胞和神经干细胞为代表的新型干细胞治疗,已经进入临床试验阶段。然而,对干细胞本身的了解,干细胞治疗机制的阐明,干细胞安全性和有效性的保障,伦理规范的制定和干细胞治疗实施的管理政策等,亟待深入研究探讨。本文就新型干细胞治疗的上述问题进行了综述。; 王东梅郭子宽; 关键词：干细胞治疗胚胎干细胞成体干细胞伦理

骨髓间充质干细胞为载体的基因增强组织工程——缺血性心脏病的新希望: 2009年; 缺血性心脏病因其发病率和死亡率高严重威胁着人类健康。不可逆性功能心肌细胞数量的减少最终造成心肌收缩功能降低，发展成为心力衰竭。目前常规的药物治疗、介入治疗及冠脉旁路移植术虽然可以在一定程度上改善症状、提高生活质量，但不能修复死亡或濒死的心肌。以细胞移植为基础的组织工程学的兴起，为缺血性心脏病的治疗带来了新曙光。; 边素艳郭子宽叶平; 关键词：缺血性心脏病骨髓间充质干细胞基因增强冠脉旁路移植术收缩功能降低

骨髓间充质干细胞为载体的基因增强组织工程缺血性心脏病的新希望: 2012年; 缺血性心脏病因其发病率和死亡率高严重威胁着人类健康。不可逆性功能心肌细胞数量的减少最终造成心肌收缩功能降低,发展成为心力衰竭。目前常规的药物治疗、介入治疗及冠脉旁路移植术虽然可以在一定程度上改善症状,提高生活质量,但不能修复死亡或濒死的心肌。以细胞移植为基础的组织工程学的兴起,为缺血性心脏病的治疗带来了新曙光[1]。; 边素艳郭子宽叶平; 关键词：缺血性心脏病骨髓间充质干细胞基因增强冠脉旁路移植术收缩功能降低

脐带间充质干细胞输注治疗顽固性溃疡性结肠炎被引量：15: 2011年; 目的探讨脐带间充质干细胞输注治疗顽固性溃疡性结肠炎的疗效。方法对1例顽固性溃疡性结肠炎患者采用脐带来源的间充质干细胞静脉输注,每周1次,剂量为(1.5-1.8)×10~6cells/Kg,4周为一个疗程,共两个疗程。流式细胞仪分别检测治疗前后外周血免疫细胞的比例变化。结果两个疗程后,患者腹痛及顽固性腹泻消失,外周血中CD4^+/CD8^+细胞比例略有增加。结论间充质干细胞输注治疗溃疡性结肠炎是安全的,这种新型疗法可能是治疗顽固性溃疡性结肠炎的一个合适选择。; 刘静韩冬梅薛梅朱玲王志东闫洪敏郭子宽王恒湘; 关键词：间充质干细胞溃疡性结肠炎输注

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国家自然科学基金(30871018)