公共文化服务平台

共 6 条记录，以下是 1-6

全选清除导出

排序方式：

SARS冠状病毒spike基因DNA疫苗的初步研究: 2005年; 目的　构建SARS病毒spike基因片段真核表达质粒DNA疫苗;检测spike基因片段的免疫原性;筛选SARS病毒疫苗构建的理想靶抗原。方法　采用RT PCR从SARS冠状病毒北京0 1(BJ0 1)株cDNA获取了spike基因cDNA的全长D12、编码N末端氨基酸的cDNA片段D14和编码C末端氨基酸的cDNA片段D2 3;构建重组真核表达质粒pcDNA3 /D12、pcDNA3 D14、pcDNA3 D2 /3;用3种重组质粒和pcDNA3空质粒载体(对照)DNA皮下注射免疫Wistar大鼠;ELISA检测免疫后大鼠血清S蛋白特异性抗体IgG的产生;同位素51 Cr实验检测特异性CTL应答;ELISPOT检测单细胞水平IFN -γ分泌。结果　pcDNA3 /D2 3疫苗免疫组大鼠血清有S蛋白阳性抗体IgG产生、抗体滴度>10 0 0 ;脾淋巴细胞可诱导特异的CTL应答和IFN γ分泌,pcDNA3 /D2 3疫苗组与其它组之间统计分析P <0 .0 5。结论SARS冠状病毒S蛋白的C末端具有较强的免疫原性,是疫苗构建的理想候选靶抗原,本研究结果为SARS病毒的疫苗研究提供了资料。; 李疆覃海德刘鹏张经纬冯炳健冯启胜陈丽珍潘志刚黄丽惜张如华余杏娟曾益新; 关键词：SARS冠状病毒S蛋白 PCDNA3 ELISPOT 抗体IGG CTL应答疫苗构建

携带SARS-CoV刺突蛋白N端片段重组腺病毒的构建被引量：2: 2005年; 【目的】构建携带 SARS 冠状病毒刺突蛋白 N 端基因片段的重组腺病毒。【方法】从 SARS 病毒 cDNA 扩增刺突蛋白 N 端基因片段(-45～1469nt,截短的 S1区,S_N),插入腺病毒穿梭质粒 pShuttle,通过体外连接法构建重组腺病毒Ad-S_N。用 Ad-S_N 感染 Vero-E6细胞,通过 RT-PCR 和 Western blot 法检测 S_N 的表达。【结果】克隆的 S_N 基因序列与文献报道基本一致;Ad-S_N 基因组结构与预期一致。在 Ad-S_N 感染的 Vero-E6细胞中存在 S_N 基因的转录和分泌型 S_N 蛋白的表达。【结论】体外连接法是一种简便易行的重组腺病毒载体构建方法;重组腺病毒 Ad-S_N 能正确表达分泌型 S_N 蛋白,可用于诱导抗 SARS 免疫的动物实验研究。; 刘然义黄必军黄嘉凌吴立志张如华陈汉奎曾益新黄文林; 关键词：SARS病毒刺突蛋白

严重急性呼吸道综合征冠状病毒Spike蛋白抗原特异性的临床应用研究: 2005年; 目的探讨严重急性呼吸道综合征(SARS)患者的SARS冠状病毒(SARSCoV)抗体产生情况以及SARSCoVSpike蛋白抗原的特异性。方法运用酶联免疫法(ELISA)和蛋白质印迹法(WesternBlotting)检测95例SARS患者体内抗体的产生情况和验证病毒Spike蛋白抗原的特异性。结果95例SARS患者血清抗体结果中,大部分患者出现抗体阳性,抗SARSCoVIgM总阳性率为91.6%(87/95),抗SARSCoVIgG总阳性率为97.9%(93/95);高暴露人群组和正常对照组的抗SARSCoVIgM和抗SARSCoVIgG阳性率为0%。经过携带Spikeprotein基因的重组病毒AdSn感染COS1细胞后表达的S蛋白抗原,使用SARS患者抗血清能够检测出特异性蛋白条带;重组病毒感染CNE2细胞后,表达的S蛋白抗原,能够通过不同患者抗血清同时检测到相应的特异性抗原蛋白。结论SARS患者感染SARSCoV后,体内可产生相应抗体;利用SARS患者所产生特异性抗血清,可以检测出克隆SARSCoV的Spike基因所表达的Spike蛋白。; 段朝晖罗晓红刘然义邵静黄嘉凌朱振宇黄健黄文林; 关键词：抗原抗原特异性 E蛋白 SARS患者

SARS冠状病毒蛋白酶3CL^(pro) N-finger多肽是酶活性所必需(英文)被引量：1: 2005年; 构建了 SARS冠状病毒主要蛋白酶3CLpro 及其缺失N 端七肽即N-finger的突变体3CLpro(?1–7)融合表达质粒,并于大肠杆菌表达系统中表达。得到的融合蛋白经肠激酶酶切,亲和层析,最终得到纯化的3CLpro及其突变体 3CLpro(?1–7)。酶活性实验显示,去除 N-finger多肽的突变体3CLpro(?1–7)丧失了3CLpro所具有的对含有其自动水解位点的荧光底物的水解活性,表明处于非酶活性中心的N-finger 多肽是酶活性所必需的。利用固相合成法,进一步合成了N-finger七肽。酶抑制实验表明N-finger七肽表现了对3CLpro 部分竞争抑制活性。; 张笋华姬明放邵晓霞; 关键词：SARS冠状病毒

95例SARS患者的Th2细胞因子反应及其临床意义被引量：2: 2005年; 本研究共收集95例罹患严重急性呼吸综合征(SARS)的医护人员的急性期和恢复期血清,用ELISA方法测定血清中白细胞介素2(IL-2)、白细胞介素4(IL-4)、白细胞介素10(IL-10)、干扰素γ(IFN-γ)、肿瘤坏死因子β(TNF β)以及转化生长因子β(TGF-β)水平,用流式细胞仪测定急性期患者外周血CD4+和CD8+T细胞比例.结果显示,SARS患者病程初、中期血清IFN-γ无明显改变;IL-2在起病2月内无显著变化,但在病程3～5个月时降低;IL-4在健康对照和患者均未能测出;TNF-β在SARS感染的1周内和病程第2个月内下降.与上述细胞因子形成对比,患者IL-10以及TGF-β均在发病起即持续升高直至整个病程.这些细胞因子的变化均与激素的使用无关(P＞0.05).SARS患者急性期CD4+T细胞和CD8+T细胞急剧减少.可见,SARS相关冠状病毒感染可引起Th2细胞因子反应,可能损害患者的细胞免疫功能而促进体液免疫,IL-10和TGF-β可能在SARS的发病中起作用.; 黄嘉凌段朝晖罗小红吴立志檀卫平闽军黄健刘然义黄必军李焱曾益新黄文林; 关键词：SARS 免疫分析激素

95例SARS患者细胞免疫功能抑制的特点及其原因被引量：4: 2005年; 用ELISA方法测定95例SARS患者急性期、恢复期血清细胞因子水平,用流式细胞仪检测该组患者急性期、恢复期淋巴细胞亚群,并分析细胞因子水平和淋巴细胞亚群变化的关系。结果发现,IL-10和TGF-β在观察期(急性期和恢复期)持续升高,急性期CD4+和CD8+T细胞显著减少,恢复期患者外周血CD8+记忆T细胞减少36.78%。IL-10和TGF-β升高与淋巴细胞变化具有统计学相关。结果提示,SARS病毒感染抑制宿主的细胞免疫功能,引起急性期CD4+和CD8+T细胞显著降低和恢复期的免疫记忆细胞减少。而IL-10和TGF-β过表达可能在SARS免疫病理中起重要作用。; 黄嘉凌卫菁段朝晖闽军黄健罗小红吴立志刘然义黄必军李焱曾益新黄文林; 关键词：SARS 细胞免疫激素细胞因子

全选清除导出

共1页<1>

国家重点基础研究发展计划(2003CB514107)