国家自然科学基金(30871015)
- 作品数：5 被引量：9H指数：2
- 相关作者：冷静张海白小明张丽马娟更多>>
- 相关机构：南京医科大学南京医科大学附属口腔医院江苏省肿瘤医院更多>>
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- PGE_2通过Wnt/β-catenin信号通路促进子宫内膜癌细胞生长的研究被引量：4
- 2011年
- 目的:探讨PGE2对子宫内膜癌细胞生长的促进作用及分子机制。方法:免疫组织化学(EnVision)法检测正常子宫内膜与子宫内膜癌组织中β-catenin的表达;用PGE2、EP2受体激动剂Butaprost、EP2受体拮抗剂AH6809处理子宫内膜癌Ishikawa细胞株,以WST-8细胞增殖实验检测各实验组细胞的增殖率;用Western blot方法分别检测β-catenin、p-β-catenin、GSK-3β、p-GSK-3β在未处理组、PGE2处理组、EP2受体激动剂处理组和EP2受体拮抗剂处理组中的表达;免疫荧光技术检测β-catenin在未处理组和PGE2处理组中表达定位的情况。结果:免疫组织化学法结果显示β-catenin在正常子宫内膜组织中仅存在膜表达,而子宫内膜癌组织中为胞浆和胞核的表达。WST-8实验结果显示:经PGE2、Butaprost和AH6809处理后,细胞的增殖率相对于对照组分别为183.9%、151.9%、72.1%。Western blot实验结果显示:PGE2处理后,β-catenin蛋白表达上升至235.7%而p-β-catenin水平下降至76.8%,p-GSK-3β水平升高至204.3%;EP2受体激动剂+PGE2处理组显示β-catenin蛋白表达上升至279.7%而p-β-catenin水平下降至33.6%,p-GSK-3β水平升高至236.7%;EP2受体拮抗剂+PGE2处理组显示β-catenin蛋白表达上升至185.2%而p-β-catenin水平下降至73.9%,p-GSK-3β水平升高至116.2%。免疫荧光技术探测结果表明:PGE2处理子宫内膜癌细胞后,β-catenin蛋白在癌细胞胞浆中的表达信号明显强于未处理组,并出现明显核内表达信号。结论:PGE2能促进子宫内膜癌细胞的增殖,并伴有β-catenin蛋白的过表达和入核,其机制可能涉及到EP2受体激活和Wnt/β-catenin信号转导通路。
- 张静渊白小明张丽张海马娟冷静
- 关键词：PGE2子宫内膜癌细胞WNT/Β-CATENIN信号转导通路
- PGE2通过EP2受体激活cAMP-PKA-CREB信号通路上调SnoN的表达而促进CCLP1细胞的增殖被引量：3
- 2011年
- 目的:探讨前列腺素E2(prostaglandin E2,PGE2)对人胆管上皮癌细胞CCLP1增殖能力影响的作用机制。方法:用PGE2、EP1～4 4种受体激动剂、AC激动剂Forskolin、PKA抑制剂H89、cAMP拟似物db-cAMP处理CCLP1细胞,通过RT-PCR、Western blot、WST等实验检测SnoN mRNA、SnoN蛋白等表达水平、CREB蛋白磷酸化水平以及CCLP1细胞增殖能力的变化。结果:10μmol/L PGE2处理CCLP1细胞24 h后,SnoN mRNA的表达水平与对照组相比上升了22.5%(P<0.01),SnoN蛋白的表达水平上升了35.6%(P<0.05);10μmol/L EP受体激动剂处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平与对照组相比明显增高,其中以EP2受体激动剂的作用最明显,上升了64.9%(P<0.05),细胞增殖能力上升了26.5%;10μmol/L AC激动剂Forskolin处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平及CREB蛋白的磷酸化水平较对照组分别上升了25.1%、71.3%(P<0.05),细胞增殖能力也上升了4.4%(P<0.05);用500μmol/L cAMP拟似物dbcAMP处理CCLP1细胞24 h后,SnoN蛋白的表达水平较对照组上升了90.1%(P<0.05);而PKA抑制剂H89阻断Forskolin的作用后,SnoN蛋白的表达水平和CREB蛋白的磷酸化水平较Forskolin处理组分别下降了9.1%、14.1%,20μmol/L H89处理CCLP1细胞后,细胞增殖能力较对照组下降了45.7%(P<0.05)。结论:PGE2可通过EP2受体激活cAMP-PKA-CREB信号转导通路上调CCLP1细胞SnoN的表达,从而促进CCLP1细胞的增殖。
- 黄文勇张丽束为彭韬张海马娟白小明冷静
- 关键词：胆管上皮癌PGE2SNON
- PGE2对HuH7细胞Survivin表达影响的研究
- 2009年
- 目的:研究前列腺素E2(PGE2)对人肝癌细胞HuH7Survivin表达的影响及其与PI3K/AKT信号转导通路的相关性。方法:用PGE2、EP受体激动剂、EP受体抑制剂、PI3K抑制剂(LY294002)处理HuH7细胞,用Westernblot检测Survivin蛋白表达。结果:5μmol/LPGE2处理HuH7细胞8h后,Survivin的表达水平与对照组相比上升了63.59%(P<0.01);5μmol/LEP1、5μmol/LEP3、5μmol/LEP4受体激动剂分别处理HuH7细胞8h后,Survivin的表达水平与对照组相比分别上升了114.76%(P<0.01),76.68%(P<0.01),70.01%(P<0.01),而5μmol/LEP2受体激动剂处理HuH7细胞8h后,Survivin的表达水平与对照组相比无明显改变(P>0.05);10μmol/LEP1,10μmol/LEP4受体抑制剂分别处理HuH7细胞8h后,Survivin的表达水平与PGE2组相比分别下降了32.95%(P<0.01),28.36%(P<0.05),而10μmol/LEP2受体抑制剂处理HuH7细胞8h后,Survivin的表达水平与PGE2组相比无明显改变(P>0.05);10μmol/LPI3K抑制剂(LY294002)处理HuH7细胞8h后,Survivin的表达水平与PGE2组相比下降了28.05%(P<0.01)。结论:PGE2可能通过EP1、EP3、EP4这3种受体影响HuH7细胞中Survivin的表达,且这种调节作用可能与PI3K/Akt信号转导通路有关。
- 蒋慧白小明冷静
- 关键词：肝细胞癌PGE2SURVIVINPI3K/AKT
- 前列腺素E2对人肝细胞癌HepG2细胞E-cadherin表达的影响及其分子机制被引量：1
- 2009年
- 目的:研究前列腺素E2(PGE2)对人肝细胞癌HepG2细胞E-cadherin表达的调节作用及其分子机制,探讨其与肝癌侵袭转移的关系,为肝癌的治疗提供新的研究思路。方法:COX-2瞬时转染人肝细胞癌HepG2细胞,Westernblot实验检测其E-cadherin表达的变化;PGE2及PI-3K抑制剂LY294002处理人肝细胞癌HepG2细胞,应用Westernblot和RT-PCR分别测定肝癌细胞内E-cadherin蛋白水平和mRNA水平的变化,并观察60min内Akt磷酸化水平的变化。结果:COX-2过表达转染HepG2细胞后,E-cadherin的表达明显降低;5、10、20μmol/LPGE2处理HepG2细胞24h后,E-cadherin表达水平与对照组比较分别下降了22.31%、36.3%、47.83%(P<0.05);20μmol/LPGE2处理HepG2细胞24、48、72h,E-cadherin蛋白和mRNA的表达与对照组比均明显降低(P<0.01)。PI-3K抑制剂LY294002能部分阻断PGE2对E-cadherin表达的调节作用;经PGE2处理的HepG2细胞Akt磷酸化水平显著升高,并且在15min时达到最高。结论:PGE2可以抑制人肝细胞癌HepG2细胞中E-cadherin的表达,并很可能通过激活Akt信号转导通路而发挥作用。
- 杨洪宝张海冷静
- 关键词：前列腺素E2E-CADHERINAKT
- EP1受体介导PGE2对胆管细胞癌HuCCT1细胞MMP2表达和活性的影响被引量：1
- 2011年
- 目的:探讨前列腺素E2(PGE2)对人胆管细胞癌HuCCT1细胞基质金属蛋白酶2(MMP2)的表达与酶活性的影响及与EP1受体的关系。方法:分别用PGE2、EP1受体激动剂或抑制剂、蛋白激酶C(PKC)抑制剂和钙离子螯合剂处理HuCCT1细胞,通过RT-PCR、明胶酶谱法检测MMP2的mRNA水平以及MMP2酶活性。结果:5μmol/L PGE2和5μmol/L EP1受体激动剂17-PT-PGE2处理组MMP2 mRNA的表达水平与对照组相比分别上升了89.14%(P<0.01)和163.89%(P<0.01);MMP2酶活性与对照组相比分别增强了69.11%(P<0.05)和117.65%(P<0.01);10μmol/L EP1受体抑制剂sc-51322处理后,MMP2 mRNA水平以及MMP2酶活性较PGE2处理组分别下降了47.74%(P<0.05)、84.58%(P<0.01);5μmol/L PGE2或5μmol/L 17-PT-PGE2处理稳定转染EP1R-pcDNA3的人胚肾细胞株HEK293细胞,MMP2的酶活性较对照组分别增强了36.07%(P<0.05)、61.59%(P<0.05)。5μmol/L PKC抑制剂BIS-1、10μmol/L钙离子螯合剂BAPTA-AM处理后,MMP2 mRNA水平较17-PT-PGE2处理组分别下降了44.17%(P<0.05)、34.42%(P<0.05);MMP2酶活性较17-PT-PGE2处理组分别下降了70.95%(P<0.05)、71.82%(P<0.05)。结论:PGE2可以通过EP1受体上调胆管细胞癌HuCCT细胞MMP2 mRNA的表达以及MMP2的酶活性,此调节作用可能与Ca2+/PKC信号转导通路有关。
- 汪亦品张丽束为孙波张海白小明彭韬冷静
- 关键词：胆管细胞癌PGE2PKCCA2+MMP2
