国家质检总局科技计划项目(2011IK011)
- 作品数:2 被引量:7H指数:2
- 相关作者:龚方孙敏刘彩霞高宏伟孙敏更多>>
- 相关机构:山东出入境检验检疫局中国检验检疫科学研究院中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金:国家质检总局科技计划项目转基因生物新品种培育专项更多>>
- 相关领域:农业科学生物学更多>>
- 肌肉生成抑制素基因敲除猪多重PCR检测方法的建立被引量:2
- 2015年
- [目的]本试验旨在建立肌肉生成抑制素基因(myostatin,MSTN)敲除猪的快速检测方法,为该品系转基因猪及其产品的检测提供技术支持。[方法]根据猪β2-微球蛋白基因(β2-microglobulin,B2M)设计猪内源性基因引物,标记基因新霉素磷酸转移酶基因(neomycin phosphotransferaseⅡ,NPTⅡ)和测定的边界序列设计特异性引物,对引物的量进行调整,优化反应条件。对PCR的敏感性和特异性进行检测,并应用建立的方法对随机选取的32份猪肺和脾脏组织样品进行检测,均仅扩增出B2M条带。[结果]该方法的最佳退火温度为56℃,最低能检测出含1%MSTN基因敲除基因组成分的样本,对32份组织样本仅扩增出B2M条带。[结论]建立的多重PCR方法敏感、特异,在一个反应中能检测多个基因片段,可用于MSTN基因敲除猪的检测,为此品系转基因动物检测标准的建立提供依据。
- 李晓琳王勤朱振营吴绍强仇松寅刘晓飞孙敏潘登科林祥梅
- 关键词:转基因检测多重PCR
- 利用线粒体COⅠ序列快速检测狐源性成分被引量:5
- 2013年
- 狐狸是一种重要的经济皮毛动物,养殖业十分发达。选择狐狸线粒体COⅠ基因序列,设计特异性引物和探针,经条件优化和验证,建立狐狸成分的实时荧光PCR检测方法。该方法灵敏度高,检测限可达12 fg DNA,而且与常见的猪、牛、羊、犬以及大豆、玉米等其他物种无交叉反应。该方法可作为食品和饲料中狐狸源性成分鉴别检测的有效方法,也可作为狐狸皮毛真伪鉴别的方法。
- 孙敏高宏伟龚方刘彩霞
- 关键词:狐狸实时荧光PCR