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维生素D受体基因Fok Ⅰ多态对CYP3A4转录调控的影响: 2009年; 目的:研究人维生素D受体(human vitaminDreceptor,hVDR)基因翻译起始密码子Fok Ⅰ突变介导CYP3A4诱导表达的调控能力与野生型比较有无统计学差异。方法:从肝脏组织标本中提取总RNA,RT-PCR法扩增获得野生型hVDR基因cDNA序列,并用定点诱变的方法获得含Fok Ⅰ突变的hVDRcDNA序列,构建野生型和突变型的真核表达载体;同时构建含CYP3A4近端ER6元件的荧光素酶报告基因载体。将hVDR真核表达载体、CYP3A4报告基因载体和内对照载体共同瞬时转染COS-7细胞,转染24 h后用1、10、100 nmol/L的1,25(OH)2D3孵育48 h,最后裂解细胞分析荧光素酶活性。结果:Fok Ⅰ突变型和野生型hVDR真核表达载体以及CYP3A4荧光素酶报告载体均构建成功。瞬转后胞内荧光素酶活性检测显示,各浓度1,25(OH)2D3孵育后hVDR基因Fok Ⅰ突变型组与野生型组均可激活CYP3A4的转录;但各维生素D3(vitamin D3,VD3)浓度下,突变型组与野生型组的荧光素酶比活性值没有统计学差异。结论:与VD3结合后,hVDRFokI突变型与野生型均能激活CYP3A4的诱导表达,但与野生型比较。; 王果谢海棠李宝群范岚钱荣华胡东莉李智; 关键词：维生素D受体 CYP3A4 FOK 转录调控

人类UGT2B17基因缺失的多重PCR分型方法被引量：1: 2009年; 目的建立一种快速有效的人类UGT2B17基因缺失型的PCR分型方法。方法针对人类基因组UGT2B17基因缺失型和外显子序列设计引物,采用多重PCR法进行分型。结果成功建立了一种多重PCR基因分型方法,并以普通PCR法和测序法验证。对安徽皖南地区健康人群UGT2B17基因分布进行了初步分析。结论所建立的多重PCR方法为一种有效便捷的UGT2B17基因缺失分型方法。; 沈杰谢海棠张伟王果贾元威钟民; 关键词：基因分型多重PCR 基因频率

黄芩苷对Chang Liver细胞CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响被引量：7: 2009年; 目的在Chang Liver细胞中观察黄芩苷处理对CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达的影响。方法在Chang Liver细胞中分别加入DMSO0.1%(v/v)(溶剂对照)和不同浓度的黄芩苷(0.01、0.1和1μM)24、36和48h后,用半定量RT-PCR的方法分别检测CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19表达量的改变。结果用不同浓度黄芩苷分别处理Chang Liver细胞24和36h,CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达均呈现出增强的趋势;但是黄芩苷处理48h后各浓度对CYP3A4和CYP2C9的表达产生显著的抑制效应(P<0.01)。结论黄芩苷对细胞中CYP3A4、CYP2C9和CYP2C19的表达具有影响作用,这种影响作用随药物处理时间不同而表现出双向效应。; 范岚谢海棠李智胡冬莉郭栋王果; 关键词：黄芩苷 CYP3A4 CYP2C9 CYP2C19

豆腐果苷在大鼠体内代谢的初步研究被引量：7: 2011年; 豆腐果苷（helicid,对苯甲醛-O-β-D-阿洛吡喃糖苷）是从我国西南少数民族植物药物豆腐渣果中提取的有效成分。基于药效学实验的基础,我们对豆腐果苷进行了动物体内的药动学研究,发现如下问题：（1）物料不平衡：豆腐果苷原药在大鼠尿、粪和胆汁中24 h的总排泄量约为给药量的5%,提示约有95％豆腐果苷在体内代谢消除。; 贾元威谢海棠王广基孙建国王玮许美娟黄青童九翠; 关键词：豆腐果苷

“药品安全登记”——它确实有用吗?: 2009年; 药物不良事件(adverse drug events,ADE)为合格药品的固有属性之一。认识药物的安全性问题,评价影响ADE的因素,并据此制定相应防范措施,可使用药风险减少到最低限度。笔者参考一些最新资料,介绍药品安全登记(drug safety reg-istries)这一概念及其相关法规。; 谢海棠Barton Cobert孙瑞元; 关键词：药物安全性登记药物不良事件

豆腐果苷对人孕烷X受体介导的CYP3A4和MDR1的转录调节作用被引量：8: 2008年; 目的:建立和验证人孕烷X受体(human pregnant X receptor,hPXR)介导的CYP3A4、MDR1药物诱导剂的体外筛选体系,考察豆腐果苷对hPXR介导的CYP3A4、MDR1的转录调节作用。方法:利用构建的双荧光素酶报告基因系统,将表达载体和报告载体共转染HepG2细胞,以10μmol/L利福平为阳性对照,用不同浓度(0.004、0.04、0.4μmol/L)豆腐果苷处理48h后裂解细胞进行双荧光素酶活性检测。结果:不同浓度的豆腐果苷均不能通过激活hPXR来介导CYP3A4和MDR1表达上调,各浓度处理组的双荧光素酶比活性值与DMSO溶媒组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:成功构建了hPXR介导的CYP3A4和MDR1药物诱导剂的体外筛选体系,并发现豆腐果苷不能通过激活hPXR介导CYP3A4和MDR1的表达上调。; 谢海棠王果范岚张利生戴晓畅周宏灏; 关键词：豆腐果苷 CYP3A4

Seminar教学法在遗传药理学课程中的应用研究被引量：12: 2009年; 遗传药理学(Pharmacogenetics)是研究临床药物治疗中个体反应差异的遗传学因素的一门新兴学科。在遗传药理教学中合理应用Seminar教学法,能够改变传统的"传授-接受"单向教学模式,充分调动学生的主观能动性,真正促进遗传药理学课程教学中的"教学相长"。; 范岚谢海棠张伟曹丹周宏灏; 关键词：遗传药理学 SEMINAR教学法课程

豆腐果苷对人肝微粒体CYP450酶体外抑制作用研究被引量：4: 2011年; 目的:通过评价豆腐果苷在体外对人肝微粒体CYP450酶的7种亚型酶活性的影响,预测服用豆腐果苷可能出现的食物-药物及药物-药物代谢的影响。方法:将豆腐果苷与CYP450酶7种亚型的特异性探针底物咖啡因(CYP1A2)、右美沙芬(CYP2D6)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、S-美芬妥因(CYP2C19)、氯唑沙宗(CYP2E1)、香豆素(CYP2A6)及咪达唑仑(CYP3A4)与人肝微粒体进行孵育反应,采用HPLC和LC-MS/MS法测定对应的7种代谢产物(1,7-二甲基黄嘌呤、去甲右美沙芬、4-羟基甲苯磺丁脲、4-羟基美芬妥因、6-羟基氯唑沙宗、7-羟基香豆素和1-羟基咪达唑仑)的浓度,与对照组比较,确定豆腐果苷对以上7种亚酶活性的影响。结果:豆腐果苷在1～100μmol.L-1时对7种酶的抑制作用均无明显统计学意义(P>0.05)。结论:豆腐果苷可能不会引起有临床意义的CYP450酶抑制现象的发生。; 谢海棠贾元威谭志荣王果贺福元曹秀珍沈杰张伟周宏灏; 关键词：豆腐果苷人肝微粒体 CYP450酶

HPLC-ESI-MS法测定Beagle犬血浆中豆腐果苷浓度被引量：7: 2009年; 目的:建立灵敏、准确的测定Beagle犬血浆中豆腐果苷浓度的液相色谱-电喷雾离子化-质谱联用(HPLC-ESI-MS)的分析方法,并将其应用于Beagle犬的药动学研究。方法:应用正丁醇作为提取剂的液-液萃取方法。色谱柱为Luna C_(18)(150mm×2.00mm,3.5μm),流动相为乙腈和500μmol·L_1的氯化铵,梯度洗脱程序。四极杆质谱,负离子选择性离子检测方式,检测离子豆腐果苷和内标岩白菜素[M+Cl]^-m/z分别为319.00和363.05。结果:豆腐果苷的最低定量限为5ng·mL_1,本方法在5～2500ng·mL_1浓度范围内线性关系良好。被分析物的批内及批间变异在10.0%以内。豆腐果苷血浆样品在存储、制备和分析过程中稳定性良好。结论:本方法可以准确用来进行豆腐果苷临床前药动学的定性、定量研究,并已经成功地应用于Beagle犬的药动学研究。; 贾元威谢海棠孙建国王广基王玮杨昊黄青; 关键词：豆腐果苷岩白菜素 HPLC-ESI-MS

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中国博士后科学基金(20070410314)

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