国家质检总局科技计划项目(2005J0013)
- 作品数：4 被引量：29H指数：3
- 相关作者：杜爱芳曲道峰孔得翔赵现锋李肖梁更多>>
- 相关机构：浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省科技厅重点资助项目国家质检总局科技计划项目公益性行业(农业)科研专项更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 减毒沙门氏菌为载体在Vero细胞中表达弓形虫SAG1基因被引量：3
- 2009年
- 将PCR扩增获得的弓形虫SAG1基因,与真核表达载体pcDNA3.1连接,构建成pcDNA3-SAG1真核表达质粒,高压电转化入dam和phoP基因双突变的减毒沙门氏菌(ZJ111株)中,并直接转染Vero细胞,胰酶消化、收集细胞,SDS-PAGE和western blot可检测到30ku左右的蛋白条带和印迹带。结果表明减毒沙门氏菌能将外源基因呈递给Vero细胞并进行表达。
- 曲道峰王素华蔡渭明杜爱芳
- 关键词：SAG1基因PCDNA3.1真核表达VERO细胞
- 猪附红细胞体快速诊断方法的研究被引量：6
- 2006年
- 根据GenBank上已报道的猪附红细胞体16S rRNA的序列设计一对特异性引物,进行PCR扩增并将产物克隆到T-vector后测序.结果表明扩增到的目的基因片段为404 bp,与GenBank上Mycoplasma suis序列同源性为97%.试验建立的PCR诊断方法特异性强,与健康猪血液、猪链球菌、副猪嗜血杆菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌、弓形虫、猪圆环病毒DNA无交叉反应,能检测出的最低DNA浓度是8.6 fg?μL-1.该方法具有快速、准确、敏感等特点,为浙江地区猪附红细胞体病的诊断及分子流行病学的调查提供了新的手段.
- 侯玉慧李肖梁杜爱芳蔡渭明赵现锋
- 关键词：猪附红细胞体PCR克隆
- 弓形虫半巢式PCR检测方法的建立被引量：18
- 2009年
- 根据GenBank上公布的弓形虫RH株的P30基因(X14080)设计了3条特异性引物P1、P2和P3,建立了半巢式PCR检测体系,并将P1和P3的扩增产物克隆到pUCm-T载体上进行测序。结果表明,该体系能够扩增出约250 bp的片段,P1和P3能扩增出约500 bp的片段,克隆到pUCm-T载体上的504 bp片段与P30基因(X14080)的序列同源性为99.8%。该PCR检测体系特异性强,在健康猪血液、猪链球菌、多杀性巴氏杆菌、胸膜肺炎放线杆菌和猪圆环病毒DNA上未扩增出条带;敏感性高,最低检测为18 fg。该检测体系的成功构建为猪弓形虫的检测和流行病学调查提供了有力的技术支持。
- 孔得翔王素华曲道峰蔡渭明杜爱芳
- 关键词：猪弓形虫病P30基因半巢式PCR克隆
- 弓形虫速殖子表膜蛋白的研究进展被引量：2
- 2007年
- 王素华孔得翔曲道峰杜爱芳
- 关键词：膜蛋白弓形虫无性生殖有性生殖生殖阶段生活史
