天津市自然科学基金(13JCYBJC23500)
- 作品数：12 被引量：11H指数：2
- 相关作者：刘强徐畅王彦杜利清王芹更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院北京协和医学院中国医学科学院放射医学研究所更多>>
- 发文基金：天津市自然科学基金国家自然科学基金中央高校基本科研业务费专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Sirt3介导的SOD2在电离辐射中的作用研究
- 2014年
- 目的 观察293T细胞经不同剂量137Cs γ射线照射后,细胞中沉默信息调节因子3（sirt3）及相关抗氧化因子的变化,研究sirt3基因在辐射防护中的抗氧化活性机理.方法 采用137Cs对293T细胞分别进行2、4、8和16 Gy照射,采用Real-Time PCR的方法,检测照后6、12、24和48 h,细胞中sirt3和超氧化物歧化酶2（SOD2） mRNA的表达水平变化;采用免疫印迹法,检测细胞中sirt3和SOD2蛋白水平随时间的变化;采用siRNA干扰和抑制剂处理的方法,检测sirt3与SOD2的作用关系;采用SOD Assay Kit-WST试剂盒检测细胞中SOD2酶活力的变化;流式细胞术检测细胞中活性氧（ROS）随时间的变化.结果 各组细胞中sirt3和SOD2的mRNA水平和蛋白质水平均表现出不同程度的上升,与0 Gy组比较,分别在12 h（t =6.75、13.59、6.59、10.13,P＜0.05）和24 h（t=6.80、8.73、11.09,P＜0.05）达到最大值;sirt3 siRNA干扰和抑制剂处理结果显示sirt3是SOD2的上游调控因子;照射24 h后细胞中SOD2的活性显著增加,与0 Gy组比较,差异有统计学意义（t =46.04、23.19、26.28、14.70,P＜0.05）,细胞中ROS水平也发生相应变化.结论 sirt3可能通过对细胞中SOD2的表达量及活性的调控加强抗氧化保护系统,为临床辐射防护和治疗提供实验依据.
- 林凯丽徐畅杜利清王彦李德冠刘建香苏旭樊赛军樊飞跃刘强
- 关键词：活性氧293T细胞电离辐射
- siRNA干扰SIRT1对辐射后IL-6表达的影响
- 2015年
- 目的 研究siRNA干扰沉默信息调节因子2相关酶1（SIRT1）对间充质干细胞（MSCs）电离辐射后诱导的炎性因子白细胞介素6（IL-6）的影响,探究SIRT1的辐射防护作用.方法 使用0、2、4、8 Gy照射MSCs,分别在照后3、6、12、24 h提取总RNA和总蛋白,检测IL-6表达水平;将MSCs分为空白对照组、单纯照射组和SIRT1干扰联合照射组,使用Western blot、RT-PCR检测SIRT1和IL-6胞内表达.结果 MSCs在电离照射后,IL-6的表达水平先升高后降低;在照后12h达到最高,24 h恢复基准水平;而联合SIRT1干扰会引起IL-6水平进一步升高,加重MSCs电离辐射后的炎症反应.结论 SIRT1可能通过抑制电离辐射诱导的炎性因子IL-6的表达,发挥辐射防护作用.
- 王璐李晴徐畅王彦杜利清王芹杨福军孙元明刘强
- 关键词：白细胞介素6INTERLEUKIN-6
- Learning From Biomarkers in Victims Accidentally Exposed to Ionizing Radiation被引量：1
- 2016年
- Yan WangLiqing DuChang XuQin WangZhiyi SongJianxiang LiuXu SuQiang Liu
- 新型Smac模拟物Tat-Smac N7的肿瘤细胞辐射增敏作用被引量：2
- 2015年
- 目的 观察Tat-Smac N7融合肽对人肺癌细胞系H460和人食管癌细胞系EC109的辐射增敏作用,探讨其辐射增敏机制.方法 取对数生长期H460和EC109细胞,分为DAPI对照组、FITC-Smac N7和FITC-Tat-Smac N7组,荧光显微镜观察两种细胞不同时间药物入核情况.取对数生长期H460和EC109细胞,分为单纯照射组、照射联合Tat-Smac N7组,单纯照射组给予0、2、4、6 Gy照射,照射联合Tat-Smac N7组中Tat-Smac N7的浓度为20 μmol/L,WST-1测定Tat-Smac N7的辐射增敏作用.取对数生长期H460和EC109细胞,分为对照组、Tat-Smac N7组、单纯照射组和照射联合Tat-Smac N7组,吸收剂量为4 Gy,Tat-Smac N7浓度为20 μmol/L,细胞流式分析仪测定细胞不同时间的细胞凋亡率.结果 Tat-Smac N7融合蛋白进入2种细胞系后2h可以有蓄积,且这种蓄积可延续到24 h,而Smac N7则不能进入细胞.Tat-Smac N7能够增强H460和EC109细胞的辐射敏感性（F=22.2、13.2,P＜0.05）,照射联合Tat-Smac N7可明显增加辐射诱导的细胞凋亡率（24 h：F=9.32、5.86,P＜0.05;48 h：F =7.09、8.25,P＜0.05）.Tat-Smac N7联合照射后凋亡诱导效应具有时间依赖性.结论 Tat-Smac N7融合肽可促进肿瘤细胞的辐射敏感性,作为一种新的Smac蛋白类似物,有望用于肿瘤的辐射增敏治疗.
- 王彦杜利清徐畅王芹陈凤华付岳郭艳婷刘强樊飞跃
- 关键词：SMAC蛋白EC109H460EC109H460
- 沉默BLAP75基因对电离辐射诱导DNA损伤的影响
- 2016年
- 目的：研究BLM结合蛋白75（BLAP75）在电离辐射诱导DNA损伤反应中的生物学效应。方法运用RNA干扰技术，在细胞中特异性沉默BLAP75基因，然后通过单细胞凝胶电泳技术来研究电离辐射诱导DNA损伤程度的变化，并且通过再次表达BLAP75来拯救沉默BLAP75所致的实验表型，以及应用Western blot方法研究DNA损伤反应中的磷酸化修饰。结果与未转染的293T对照组细胞相比，电离辐射在沉默了BLAP75基因的细胞中会诱导更多的DNA断裂，并且在此细胞中重新表达BLAP75则能降低DNA断裂数量至对照组细胞水平；γ射线照射后，细胞周期检查点激酶2（Chk2）的磷酸化程度比阴性对照组细胞增强。结论 BLAP75能减少电离辐射诱导的DNA损伤，在电离辐射损伤修复中可能具有重要作用。
- 徐畅方连英孔阳阳王璐杜利清王彦王芹刘强
- 关键词：基因沉默RNA干扰
- ANTP-SmacN7融合肽对H460细胞的辐射增敏作用被引量：2
- 2016年
- 背景与目的肿瘤的辐射耐受制约了放疗疗效,第二个线粒体衍生的半胱氨酸蛋白酶激活剂（Second mitochondria-derived activator of caspase,Smac）蛋白类似物可明显提高辐射诱导的肿瘤细胞凋亡,有望成为新型肿瘤辐射增敏药物。本研究旨在探讨新型Smac蛋白类似物ANTP-SmacN7融合肽对肺癌细胞系H460的辐射增敏作用。方法合成ANTP-SmacN7融合肽,连接荧光素FITC以观察融合肽能否进入细胞。对数生长期H460细胞分为空白对照组、单纯照射组、ANTP-SmacN7组和照射联合ANTP-SmacN7组,单纯照射组给予0 Gy、2 Gy、4 Gy、6 Gy照射,照射联合ANTP-SmacN7组中ANTP-SmacN7的浓度为20μmol/L,WST-1测定H460细胞的增殖。流式细胞仪测定细胞处理后24h和48 h的细胞凋亡率。Western blot实验检测caspase3和cleaved caspase3的表达水平。结果 ANTP-SmacN7融合能够顺利进入细胞,且能够增强H460细胞的辐射敏感性（F=25.1,P〈0.01,增敏比为1.86）,照射联合ANTP-SmacN7可明显降低H460细胞的克隆形成率（χ^2=45.2,P〈0.01;χ^2=40.3,P〈0.01）,提高cleaved caspase3的表达量,促进caspase3的活化,增加辐射诱导的细胞凋亡率。结论 ANTP-SmacN7融合肽可明显提高H460细胞的辐射敏感性,作为一种新的Smac蛋白类似物有望用于肿瘤的辐射增敏治疗。
- 刘宝娜杜利清徐畅王彦王芹宋志仪孙晓辉王津晗刘强
- 关键词：SMAC蛋白肿瘤细胞
- Smac与肿瘤放射治疗被引量：4
- 2013年
- 放射治疗是肿瘤治疗的一个重要手段,肿瘤的辐射敏感性与凋亡蛋白抑制家族（IAPs）和促凋亡蛋白第二线粒体来源的Caspase激活因子（Smac）密切相关.IAPs能够通过结合Caspase-3、7、9抑制凋亡,IAPs的高表达是肿瘤细胞出现辐射抵抗的重要机制之一.当细胞接收到凋亡刺激信号后,Smac即从线粒体释放至胞质内与IAPs结合从而释放Caspase,发挥其促凋亡活性.以IAPs为靶点的治疗可能会为肿瘤细胞克服放射抵抗打开新的视角.临床前的体内体外研究证明,这种联合治疗值得更进一步的临床研究.使用IAPs拮抗剂联合放射治疗可能会为更有效的放射治疗肿瘤患者铺平道路.
- 郭艳婷张鹏飞刘强
- 关键词：细胞凋亡肿瘤SMAC半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶凋亡抑制蛋白类辐射耐受性
- 核因子E2相关因子2及其在肿瘤防治中的作用被引量：1
- 2015年
- 核因子E2相关因子2（Nrf2）可以保护正常细胞免受氧化剂和亲电子试剂的伤害，从而预防肿瘤的发生与转移。但Nrf2在肿瘤细胞中的异常持续活化会导致肿瘤的发生发展。作用于Nrf2通路的化学药物包括激活剂和抑制剂，Nrf2抑制剂可以提高肿瘤的化疗敏感性，为设计高效低毒的联合用药提供了新思路。
- 李晴徐畅刘强
- 关键词：肿瘤核因子E2相关因子2
- 白藜芦醇抑制辐射诱导的NLRP3蛋白复合体激活的机理研究
- 目的研究白藜芦醇对间充质干细胞(MSCs)和小鼠受照后产生的炎症因子IL~(-1)β的影响,探讨白藜芦醇在体内体外的辐射防护作用及其机理。方法体外实验分为空白对照组,单纯照射组和不同剂量白藜芦醇组采用ELISA、West...
- 付岳王彦杜利清徐畅刘建香刘强樊飞跃苏旭
- 文献传递
- ANTP-SmacN7对肿瘤细胞的辐射增敏作用及其机制
- 2013年
- 目的 探讨ANTP-SmacN7融合蛋白对肿瘤细胞的辐射增敏作用及其机制。方法 合成ANTP-SmacN7融合蛋白并观察其细胞渗透能力，Western blot法检测辐射对XIAP表达量的影响，克隆形成实验观察ANTP-SmacN7融合蛋白的辐射增敏作用。Annexin V-FITC/PI双染法测定药物及射线对肿瘤细胞凋亡的影响，Western blot法检测ANTP-SmacN7阻断XIAP前后Caspase-8、Caspase-9和Caspase-3的变化。结果 ANTP-SmacN7融合蛋白可以进入细胞内，并在细胞内蓄积；辐射诱导肿瘤细胞体外XIAP表达量与肿瘤辐射敏感性呈负相关（r=0.82）；ANTP-SmacN7对肿瘤细胞有辐射增敏作用，增敏比为1.41；ANTP-SmacN7融合蛋白可促进4、8和10 Gy γ射线诱导的XIAP高表达肿瘤细胞的凋亡（t=-14.924、-7.294和-15.866，P〈0.05）。辐射可诱导Caspase-3表达水平的升高，ANTP-SmacN7对Caspase-3蛋白表达水平不产生影响，但可增加活化Caspase-3的裂解片段的数量。结论 ANTP-SmacN7融合蛋白可通过诱导Caspase-3的活化降低肿瘤细胞的辐射抗性。
- 杜利清王彦徐畅曹嘉付岳陈凤华郭艳婷刘强樊飞跃樊赛军
- 关键词：细胞凋亡肿瘤细胞
