许龙岩
作品数: 57被引量:215H指数:10
  • 所属机构:广东检验检疫技术中心
  • 所在地区:广东省 广州市
  • 研究方向:医药卫生
  • 发文基金:广东省科技计划工业攻关项目

相关作者

袁慕云
作品数:39被引量:135H指数:9
供职机构:广东检验检疫技术中心
研究主题:食品 TAQMAN探针 实时荧光PCR 副溶血性弧菌 焦磷酸
陈碧玲
作品数:18被引量:37H指数:5
供职机构:广东出入境检验检疫局
研究主题:TAQMAN探针 食品 毒力基因 实时荧光 大肠杆菌O157
曹际娟
作品数:211被引量:1,141H指数:19
供职机构:大连工业大学食品学院
研究主题:食品 实时荧光PCR PCR DHPLC 变性高效液相色谱
焦红
作品数:66被引量:244H指数:11
供职机构:广东出入境检验检疫局
研究主题:化妆品 分子分型 食品 脉冲场凝胶电泳 进出口食品
阳静
作品数:15被引量:30H指数:3
供职机构:广东出入境检验检疫局
研究主题:焦磷酸 焦磷酸测序 碱基序列 检测试剂盒 特异性检测
实时荧光定量PCR技术在食品致病菌等领域中的快速检测应用
焦红何蕴韶翁文川王方金徐海聂高东微朱道中林志雄许龙岩钟国强程钢邓中平黄捷王伟毅谢钧宪陈胤瑜
该项目针对进口试剂盒的昂贵及国内基因检测试剂市场几乎空白的特点,在具有我国自主知识产权的合成平台上,使用国产原材料,将国际先进的实时荧光定量PCR技术引入国内食品致病菌、动物禽流感、植物松材线虫、人类乙型肝炎病毒的检测领...
关键词:
关键词:荧光定量PCR食品致病菌
食品中伤寒沙门氏菌TaqMan探针实时PCR检测方法被引量:6
2014年
建立实时荧光PCR快速鉴定伤寒沙门氏菌(Salmonella Typhi)的方法。根据GenBank公布的伤寒沙门氏菌基因序列,设计引物和Taqman探针,采用实时荧光PCR进行特异性、灵敏性及模拟样品的检测实验。结果表明,特异性引物和探针可从31株伤寒沙门氏菌菌株、27株其他血清型沙门氏菌和7株非沙门氏菌菌株中鉴定出全部的31株伤寒沙门氏菌。以伤寒沙门氏菌梯度稀释菌液DNA为模板进行实时荧光PCR扩增,菌株模板浓度与Ct值呈良好线性关系,线性系数为0.994,扩增效率为94.5%,最低检测浓度为4cfu/mL的添加浓度。实时荧光PCR检测与传统方法相比较,两者结果一致。该方法特异性好、灵敏度高,可以快速鉴定伤寒沙门氏菌。
曹冬梅袁慕云史媛媛刘洋许龙岩曹际娟
关键词:实时荧光PCR伤寒沙门氏菌
奶粉与保健食品中坂崎肠杆菌检验方法研究被引量:6
2005年
王志强谢钧宪李志勇许龙岩凌莉易敏英高东傲
关键词:保健食品小肠结肠炎革兰阴性肠杆菌属婴儿健康败血病
发酵山梨醇的EHECO_(157):H_7的分离被引量:1
2003年
许龙岩王志强翁文川胡科锋黄美婵谢均宪
关键词:肠出血性大肠杆菌生化实验血清学实验
基于TaqMan探针三重荧光PCR检测MRSA被引量:6
2014年
目的建立基于TaqMan探针三重荧光PCR检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)方法。方法根据nuc(GenBank:EF529607.1)、mecA(GenBank:JN108029.1)和femA gene(GenBank:DQ352463.1)基因序列,分别设计特异性引物和Taqman探针,nuc探针5、端标记TET、mecA探针5、端标记HEX、femA探针5、端标记FAM,建立基于Taqman探针三重荧光PCR检测MRSA的方法,并对69株金黄色葡萄球菌分离株进行基因检测与耐药表型比较。结果 MRSA出现femA、mecA、nuc基因扩增曲线,而表皮葡萄球菌等14株对照菌株扩增结果呈阴性;femA、mecA、nuc基因的扩增效率分别为104%、90.3%、98%,线性系数R2分别为0.999、0.994、0.998;69株分离株中femA、nuc基因阳性率为100%,mecA基因阳性率为13.04%,mecA与耐甲氧西林表型符合率为100%。结论建立的方法特异性强、准确,为金黄色葡萄球菌鉴定和耐药基因分析提供参考依据。
袁慕云张旺卓锦雪谢力陈碧玲许龙岩
关键词:MRSATAQMAN探针耐药基因
Caco-2细胞与肠道菌共培养初建体外肠道共生模型被引量:5
2012年
【目的】构建体外模拟肠道共生系统,用于评价食源性抗菌药及其耐药菌作用于肠道菌群时对人体健康造成的危害风险。【方法】21 d体外培养构建Caco-2细胞三维肠上皮,分成无菌对照组、混合的正常菌群组、沙门菌组、混合菌群-沙门菌组4组,制备混悬液,各组分别单独和混合培养4 h,荧光定量PCR法测试共培养前后各菌16SrDNA菌量变化,电阻仪测试跨膜上皮电阻(TEER)数量;免疫荧光染色观察紧密连接蛋白ZO-1变化,评价三维肠上皮屏障功能的改变。【结果】在体外共培养模型内,4种肠道菌混合培养4 h后同单独培养组间比较,细菌量增长无统计学差异(P>0.05));需氧菌的增长速度明显高于厌氧菌(P<0.01),厌氧菌:需氧菌浓度比接近100∶1,厌氧菌仍为优势菌。TEER和ZO-1免疫荧光染色结果均提示混合肠道菌群对Caco-2细胞三维肠上皮无明显破坏,侵入性沙门氏菌可显著降低TEER值,并观察到模型的ZO-1结构受到破坏。这种破坏作用在混合肠道菌群加沙门菌群组较轻。【结论】Caco-2细胞三维肠上皮同乳双歧杆菌、植物乳酸杆菌、大肠杆菌和粪肠球菌组成的混合菌群体外共培养能建立稳定的体外肠上皮模型,并具有生物学活性;正常肠道菌群对侵入性沙门菌有拮抗作用。该模型可进一步完善作为食源性抗菌药、耐药菌与肠道系统相互作用研究模型的基础。
陈晓清焦红程树军易敏英刘静宇许龙岩刘超
关键词:CACO-2细胞RDNA
免疫磁分离-荧光PCR应用在肉类单增李斯特氏菌的检测被引量:18
2006年
目的建立适用于肉类产品中单核增生李斯特氏菌的荧光PCR检测方法。方法根据单增李斯特氏菌溶血素基因hlyA,设计合成引物和荧光探针,结合免疫磁珠筛选,选择简便的DNA提取方法,建立适用于检测肉类制品中单增李斯特氏菌的荧光PCR方法。对该方法进行特异性、灵敏度及模拟样品检测效果的研究。结果对20株不同菌属的标准菌株和30株野生李斯特氏菌菌株,及混合菌液的检测,结果显示该方法具有良好的特异性。对染菌模拟样本的检测结果表明,经过24h增菌,该方法的检测低限为1cfu/g,整个流程只需27h。结论免疫磁分离荧光PCR方法为快速、简便和准确检测肉类制品中单增李斯氏菌提供了一个新的途径。
翁文川杨汝德焦红胡锋科许龙岩凌莉
关键词:免疫磁珠分离
基于TaqMan探针双重荧光PCR检测食品中鼠伤寒沙门菌和肠炎沙门菌被引量:9
2013年
目的建立基于TaqMan探针双重荧光PCR检测鼠伤寒沙门菌和(Salmonella typhimurium,ST)和肠炎沙门菌(Salmonella enteritidis,SE)的方法。方法根据ST的STM4599序列(GenBank:AERV01000023.1)和SE特异序列(GenBank:AF370707.1),分别设计引物和探针,ST探针的5'端标记FAM、SE探针的5'端标记VIC,建立基于TaqMan探针双重荧光PCR检测方法。结果 ST和SE的引物和探针分别特异性地扩增出16株ST和15株SE,而28种不同血清型沙门菌和17株变形杆菌等扩增结果均为阴性。ST和SE的双重荧光PCR扩增效率均为94.2%,R2分别为0.998和0.995,最低检测浓度分别达到300 CFU/ml、260 CFU/ml。结论建立的方法特异性好、灵敏度高,整个试验可在31h完成,是快速检测ST和SE的有效方法,可用于食品中ST和SE的特异性检测。
袁慕云许龙岩曹际娟阳静张旺陈碧玲相大鹏
关键词:鼠伤寒沙门菌肠炎沙门菌TAQMAN探针食品
阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分型及耐药研究被引量:11
2010年
目的:研究北京、新疆、广东、辽宁等地和新西兰、美国、印度进口食品中分离的阪崎肠杆菌(ES)分子型别和耐药情况。方法:用限制性内切酶XbaⅠ酶切ES染色体DNA进行脉冲场凝胶电泳(PFGE)实验,用BioNumerics软件对不同地区分离的ES进行比对,分析菌株之间的相似度。用Vitek2进行药敏实验,分析ES耐药情况。结果:38株ES(其中ES12为标准菌株)分成37个PFGE型,相似度在25%~100%,未表现出优势带型和地区特异性,而部分食品被遗传紧密相关的ES克隆株污染。药敏实验结果显示37株ES共有9种耐药谱,部分菌株对呋喃类、头孢类、β-内酰胺类耐药。结论:建立的PFGE方法可应用于ES的分子分型和溯源。
许龙岩袁慕云刘静宇赵贵明邹志飞阳静焦红
关键词:阪崎肠杆菌脉冲场凝胶电泳分子分型耐药
阻抗法快速预测盒装巴氏奶货架期被引量:3
2001年
采用阻抗法进行盒装风行巴氏奶货架期预测。结果表明,风行巴氏奶货架期与细菌数对数值密切相关。在30℃、6h预培养下加样100、200μ1及37℃、6h预培养下加样100~400μ1进行阻抗测定,建立回归方程式均可快速准确地进行盒装风行巴氏货架期预测,整个预测过程耗时11~14h。
李志勇易敏英高健婷翁文川许龙岩
关键词:阻抗法货架期预测巴氏奶奶制品